王菊
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 供职机构：郧阳医学院附属东风医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅资助项目湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 短发夹RNA抑制外源荧光素酶在肝癌细胞中的表达
- 2004年
- 目的:构建含荧光素酶(luciferase,luc)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,并观察其在肝癌细胞Bel-7402中抑制外源荧光素酶的表达. 方法:设计的两条反向重复的多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-luc重组质粒,与荧光素酶基因表达质粒pCMV- luc共转染肝癌细胞株BEL-7402,检测其对荧光素酶表达的影响. 结果:PCR和DNA序列分析证实了重组质粒构建成功. pshRNA-luc对共转染的pCMV-luc中的荧光素酶具有明显的抑制作用,抑制率可达86%(P<0.01). 结论:构建的pshRNA-luc表达质粒能有效地抑制荧光素酶在肝癌细胞中的表达,为RNA干扰用于肿瘤的基因治疗打下基础.
- 胡礼仪张有顺周新戴宗晴黄玲王菊
- 关键词：肝癌细胞荧光素酶基因短发夹RNA共转染短发夹状RNA双链DNA
- 多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肿瘤的筛查价值被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对于肿瘤诊断的临床应用价值。方法:使用多肿瘤标志物蛋白芯片检测仪检测46例健康体检者、63例已知的各期各种肿瘤患者和39例良性疾病患者的12种肿瘤标志物。结果:63例肿瘤患者中,51例结果异常,阳性率为80.95%,显著高于健康体检者与良性疾病患者(P<0.05)。被检测46例健康体检者中,一项以上超出参考值范围的结果有9例,占19.57%。结论:多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统具有较高灵敏度和特异性,对肿瘤的早期诊断具有一定的价值。
- 胡礼仪张有顺李毅王菊黄玲
- 关键词：蛋白质阵列分析
- MDR1短发夹RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究被引量：6
- 2004年
- 目的 构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)的表达质粒 ,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响。方法 根据Genbank中MDR1mRNA设计的两条多聚核苷酸序列 ,退火形成双链DNA ,再与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建 pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌细胞株BEL 74 0 2 /ADM ,RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测阿霉素对细胞的半数抑制浓度 (IC50 )。结果 PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制BEL 74 0 2 /ADMMDR1mRNA的表达 ,对阿霉素的耐药指数降低了17.5倍 ( 2 99.2 / 17.1)。结论 构建的 pshRNA MDR1表达质粒能有效地抑制转染细胞MDR1mRNA ,从而提高肿瘤细胞的药物敏感性。
- 胡礼仪张有顺周新张吉发袁房均黄玲王菊戴宗晴
- 关键词：多药耐药MRNA短发夹状RNARNA干扰
- CIK细胞的诱导及其对肝癌细胞毒作用的体外研究被引量：4
- 2005年
- 目的体外诱导细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK),并研究其生物学活性。方法从外周血和脐血分离单个核细胞(PBMC),经过细胞因子诱导、培养并扩增CIK细胞,以LAK作比较,流式细胞仪检测CIK细胞表面标志CD3、CD56。3H-TdR释放法检测CIK的增殖能力,MTT法检测对肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402,正常胎肝细胞L-02的杀伤活性。结果CIK细胞第二周进入快速增殖期,到第31d扩增倍数超过60倍,CD3+CD56+细胞扩增倍数达800倍以上;CIK对肝癌细胞的杀伤能力明显优于LAK细胞(65%～81%);对正常胎肝细胞的细胞毒作用(<5%)。结论CIK细胞是一种具有很强杀瘤活性的免疫活性细胞,具有临床应用前景。
- 胡礼仪张有顺周新戴宗晴黄玲王菊
- 关键词：CIK细胞体外研究细胞表面标志CD56^+胎肝细胞CD3^+
- 十堰地区1232例遗传咨询者外周血淋巴细胞染色体分析
- 2002年
- 目的 :探讨染色体异常在遗传咨询者中的发生情况。方法 :取受检者外周血进行淋巴细胞培养 ,常规收获制片 ,G显带处理 ,显微镜下进行染色体分析。结果 :在 12 32例遗传咨询者中共检出染色体异常 6 5例 ,异常检出率为 5 .2 8% ;检出染色体形态变异 5 9例 ,变异检出率为 4 .79%。结论 :妇产科及儿科许多疾病与染色体异常有关 。
- 武静王菊张有顺
- 关键词：染色体异常外周血淋巴细胞
- 载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究被引量：13
- 2004年
- 目的 :构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)表达质粒 ,观察对肝癌耐药细胞Bel 740 2 /R的MDR1mRNA的抑制作用。方法 :利用分子克隆技术 ,将含MDR1的双链DNA ,与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel 740 2 /R ;RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测细胞对药物的敏感性 ,流式细胞仪检测细胞内罗丹明 12 3 (Rh12 3 )的潴留和P gp的表达。结果 :PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制MDR1mRNA的表达 ;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低 ,P <0 0 5 ;P gp的表达阳性率降低了 5 7 3 % ;细胞内Rh12 3的浓度显著增高 ,P <0 0 5。结论 :构建的pshRNA MDR1表达质粒能有效地降低肝癌耐药细胞MDR1mRNA和P gp的表达。
- 胡礼仪周新张有顺戴宗晴黄玲王菊
- 关键词：RNA肝肿瘤
