王海蛟
- 作品数：7 被引量：10H指数：3
- 供职机构：复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 表皮葡萄球菌调控蛋白SarA的表达与特性研究被引量：3
- 2005年
- 表皮葡萄球菌是一种条件致病菌,它形成生物膜(biofilm)之后会产生耐药性并降低宿主的免疫力.由icaRADBC操纵子控制合成的胞间多糖黏附素(PIA)是生物膜的主要组成成分.在金黄色葡萄球菌已发现icaADBC的表达受到sarA基因表达的SarA蛋白的调控.SarA是一种DNA结合蛋白,可以激活ica操纵子中结构基因的表达.为了研究表皮葡萄球菌中sarA基因是否有类似作用,将能形成生物膜的表皮葡萄球菌RP62A的sarA基因克隆到pET-28a(+)上,在大肠杆菌BL21中实现了表达并进行了纯化,还对其结构进行了模拟;同时,利用穿梭质粒pHPS9将sarA基因通过电转化导入sarA基因缺失的表皮葡萄球菌S.epidermidis(ΔsarA)中.RT-PCR实验证明SarA对icaA基因转录有促进作用.药物敏感实验证实sarA的表达对表皮葡萄球菌的抗药性有重要影响.
- 梁国新范长胜王海蛟高山峨陶菊红张青
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜SARAICA操纵子
- 表皮葡萄球菌SarA对atlE、lipA和zinC基因表达调控的研究被引量：3
- 2007年
- 表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT-PCR和lacZ报告基因的分析结果显示,在表皮葡萄球菌ATCC35984中,SarA对atlE(自溶酶基因)表达起负调控作用,而对lipA(脂肪酶基因)和zinC(膜相关锌金属蛋白酶基因)的表达则有正调控作用.生物信息学分析表明,SarA控制atlE,lipA和zinC3种基因表达可能是通过与被调控基因上游的特定DNA序列的结合来实现的,该DNA结合区保守并富含AT碱基.根据已报道的金黄色葡萄球菌中SarA的结合位点序列,利用Omiga软件分析并推测了SarA结合atlE,lipA和zinC的可能区域.基于SarA是一种多功能的毒素相关调控因子,结果提示,SarA能调控众多因子,可以作为防治表皮葡萄球菌感染的一个药物筛选靶点.
- 王海蛟范长胜辛及娣陶菊红苑兴卉高山峨梁国新
- 关键词：SARA表皮葡萄球菌
- 利用大肠杆菌tyrB-aspA基因串联表达制备L-苯丙氨酸
- 2005年
- 从大肠杆菌K12菌株中获得tyrB和aspA基因,将2个基因串联并克隆到pλPR质粒上,然后转化到E·coliP2392菌株进行表达。相应酶活力和氨基酸产量检测结果表明,单基因表达和双串联基因串联表达菌株的酶活性成倍提高,与原始菌株相比,AspA活力分别提高243%与239%,TyrB活力分别提高到247%和236%。以基因双串联表达菌株E·coliPBA的菌体悬浮液为酶原,以铵盐、反丁烯二酸和苯丙酮酸为酶转化底物,反应3h后,苯丙酮酸转化苯丙氨酸的效率为93%,苯丙氨酸产率达到0·6g/(g·h)(细胞),是对照菌株的4·7倍。
- 范长胜李欣高山峨王海蛟焦晔王建刚梁国新陶菊红
- 关键词：天冬氨酸酶苯丙氨酸L-苯丙氨酸串联基因大肠杆菌E.COLI
- 利用aspA与tyrB基因串联表达制备苯丙氨酸
- 本文报道从大肠杆菌K12菌株中获得aspA和tyrB基因,将两个基因串联并克隆到pλPR质粒上,然后转化到E.coliP2392菌株进行表达.相应酶活力和氨基酸产量检测结果表明单基因表达和双串联基因串联表达菌株的酶活性都...
- 范长胜焦晔王建刚李欣高山峨王海蛟梁国新陶菊红
- 关键词：天冬氨酸酶苯丙氨酸
- 文献传递
- 利用tyrB与aspA基因在大肠杆菌中的偶联表达制备L-苯丙氨酸(英文)
- 2005年
- 报道了利用tyrB与aspA串联表达来合成苯丙氨酸.首先将tyrB与aspA串联在质粒pBV221上,构成串联表达质粒pBV-tyrB-aspA;然后将该重组质粒转化到E.coliK36菌株中表达.对基因编码的相关酶活性以及工程菌利用FA和PPA生成Phe进行研究,结果表明:利用AspA和TyrB的偶联反应可以有效的提高E.coliK36合成L-苯丙氨酸的能力.
- 李欣范长胜王海蛟高山峨梁国新陶菊红
- 关键词：代谢工程苯丙氨酸大肠杆菌
- 表皮葡萄球菌sarA的调控功能研究
- 表皮葡萄球菌(表葡菌)是人体皮肽和粘膜上定居的正常菌群之，通常情况下致病力很低。近几年来，随着留置静脉导管等侵袭性操作的增多，表葡菌已成为医院感染的重要致病菌，研究认为生物膜对于表皮葡萄球菌感染十分重要。
在前...
- 王海蛟
- 关键词：表皮葡萄球菌SARA医院感染生物膜抗生素抗性
- 文献传递
- 表皮葡萄球菌sigB基因调控生物膜合成的研究被引量：5
- 2006年
- sigB基因编码的S igm a factor B(σB)蛋白是一个普遍性的可通过与RNA聚合酶结合来调控多种基因表达的因子.为了验证表皮葡萄球菌sigB基因的调控作用,构建了含四环素抗性基因的打靶载体并采用双交换同源重组的方法对表皮葡萄球菌RP62A(ATCC35984)中sigB基因进行敲除.sigB基因敲除后的菌株,与出发菌株相比生物膜形成能力急剧下降,而在sigB基因座的回补菌株中,生物膜形成能力又恢复到接近出发菌株的水平.RT-PCR分析生物膜相关基因sarA(Staphylococcus Accessory Regu lator),icaA(icaADBC操纵子中的第一个基因)发现,sigB基因从转录水平上对二者进行正调控.lacZ报告系统的体外实验揭示了SigB可以通过作用于sarA的启动子区域正调控sarA表达.
- 高山峨范长胜苑兴卉梁国新陶菊红王海蛟辛及娣张青
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜SIGBSARA
