王建东
- 作品数：11 被引量：17H指数：2
- 供职机构：成都医学院更多>>
- 发文基金：四川省财政育种工程优秀论文基金国家自然科学基金四川省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 大鼠Armcx3基因真核表达载体的构建及表达
- 2015年
- 帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是一种高发于中老年的神经系统退行性疾病，临床表现为静止性震颤、肌强直、运动迟缓和姿势步态异常等。以往研究表明，线粒体动态变化失衡，是引起神经元细胞死亡和帕金森病发生的一个重要因素。
- 王建东黄永秀王正维刘腾夏慧南张红
- 关键词：真核表达PC12细胞
- 医药生物技术在心血管疾病中的应用进展被引量：2
- 2017年
- 生物技术是21世纪最具发展活力和潜力的科技领域之一。近年来,人们在以基因组学、蛋白质组学、基因工程、细胞工程、基因芯片技术、干细胞技术和转基因动物技术等为代表的现代生物技术领域取得的重大进展,直接推动了以医药生物技术为核心的现代医药技术的迅猛发展,也为现代医药产业开辟了更为广阔的新领域。
- 金家贵王建东张红杨林
- 关键词：医药生物技术心血管疾病
- 调节细胞自噬对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的影响
- 2012年
- 以鱼藤酮处理的PC12细胞为帕金森病体外模型,分别使用雷帕霉素作为自噬途径的促进剂,巴佛洛霉素A1和3-甲基腺嘌呤作为抑制剂,检测调节细胞自噬对细胞凋亡的影响,发现巴佛洛霉素A1极大提高了细胞凋亡率,3-甲基腺嘌呤则可以减轻鱼藤酮诱导的细胞凋亡,而雷帕霉素虽然促进受损细胞凋亡,但降低了受损细胞早期的死亡率.构建pEGFP-LC3稳定转染的PC12细胞,流式细胞检测结果显示,抑制或促进细胞自噬,细胞内自噬相关蛋白LC3均有明显增加.
- 张红刘湧金家贵杨淑霞张芹刘进王建东
- 关键词：帕金森病自噬鱼藤酮PC12细胞
- BRG1介导的染色质重塑复合物及其对神经系统发育调节机制的研究进展
- 2008年
- BRG1介导的染色质重塑参与了真核生物多种生理和病理调控过程。在过去的几年中,人们发现BRG1介导的染色质重塑在神经干细胞的维持、增殖、分化以及神经元发育成熟等方面也具有重要的作用。本文对BRG1介导的染色质重塑复合物及其对神经系统发育调节机制的研究进展作一介绍。
- 张红王建东程曦
- 关键词：染色质重塑神经系统发育
- 鱼藤酮诱导PC12细胞自噬的初步研究
- 2015年
- 目的研究鱼藤酮处理对PC12细胞自噬水平的影响。方法培养PC12细胞,分别用0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10μmol/L鱼藤酮处理细胞12h,以及1μmol/L鱼藤酮分别处理细胞0、2、6、12、18、24h,Western blot检测各组细胞内LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ含量,荧光显微镜检测GFP-LC3荧光斑点的数量,透射电镜观察细胞超微结构。结果随着鱼藤酮处理浓度升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和GFP-LC3荧光斑点数量均随之增加;随着鱼藤酮处理时间延长,GFP-LC3荧光斑点数量也随之增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值先升高后降低,透射电镜显示细胞线粒体受损和细胞自噬水平增加。结论鱼藤酮对PC12细胞自噬的影响具有量效性和时效性。
- 刘腾黄永秀王丹崔涌泉王建东张红
- 关键词：鱼藤酮自噬PC12细胞
- “分子与细胞”翻转课堂教学模式在临床专业教学中的探究被引量：6
- 2021年
- 提高医学创新人才培养手段是医学教育改革的重点内容之一。"分子与细胞"是临床医学教育改革的重点专业基础课,也是一门全新的整合课程,具有学时多、难度大且要求和临床专业紧密结合的特点。如何转变临床专业课程的传统教学模式,是临床专业课程改革创新的焦点。该研究通过基于嵌入式文献阅读和临床案例式的翻转课堂教学模式,将传统的面对面授课转化为以学生为中心的授课方式,将课堂主阵地由线下转移至线上,为线下课堂提供了更多创新融合的方式,同时增强了医学生对于生命学基本原理的理解,为培养具有精准医学专业背景的医学生提供了理论基础。通过三年的翻转课堂实施,临床专业卓越医生试点班学生对教学满意度以及学生成绩显著提升,说明在临床专业整合课程开展翻转课堂教学具有积极意义。
- 彭确昆王建东何浪韦鹤蒋欣妮王兰杨雨晗
- 关键词：JBLCBL整合课程
- 线粒体自噬分子机制的研究进展被引量：7
- 2011年
- 线粒体是细胞内物质能量代谢的主要场所，其生成的ATP是细胞生命活动的主要能量来源。线粒体受损能够导致活性氧（reactive oxygen speeies，ROS）或者细胞凋亡因子的释放，可以造成细胞的损伤或者促使细胞凋亡。因此．及时清除这些受损伤的线粒体，维持线粒体的正常功能与数量对细胞生命活动是至关重要的。近年来，人们逐渐认识到自噬溶酶体途径在调控细胞内受损线粒体的降解、维持线粒体的代谢稳定方面发挥了重要作用。
- 王建东张红刘湧
- 关键词：分子机制细胞内物质细胞凋亡因子能量代谢生命活动
- 灵芝孢子多糖LPS3对Lactacystin诱导PC12细胞损伤的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨灵芝孢子多糖LPS3对蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导PC12细胞损伤的影响。方法体外培养PC12细胞,建立Lactacystin诱导PC12细胞损伤的模型,用CCK-8法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI流式细胞法检测细胞调亡,免疫荧光法检测胞浆中α-synuclein聚集物的生成。结果模型组经20μmol·L-1Lactacystin处理24 h后,PC12细胞活力比空白对照组降低,仅为64.7%;经不同浓度的灵芝孢子多糖LPS3预处理后,细胞活性明显提高,且其细胞活性随多糖浓度升高而升高;Lactacystin可以诱导PC12细胞凋亡,处理24 h后细胞凋亡率为45.40%,经灵芝孢子多糖LPS3预处理后,细胞凋亡率明显降低;PC12细胞经Lactacystin处理后,胞浆内可见明显的颗粒状、小团块状α-synuclein聚集体的生成;而经灵芝孢子多糖LPS3预处理后,胞浆中α-synuclein的聚集体明显减少。结论灵芝孢子多糖LPS3对Lactacystin诱导的PC12细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制α-synuclein聚集体的生成有关。
- 张红刘湧王建东
- 关键词：LACTACYSTINPC12细胞
- 大鼠线粒体膜蛋白Nix基因过表达与shRNA慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的构建线粒体膜蛋白Nix基因过表达与shRNA慢病毒载体。方法 PCR扩增获得Nix基因序列,与经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切的pHBLV-CMVIE-IRES-Puro载体连接获得Nix过表达重组慢病毒载体;以Nix为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切的pHBLV-U6-Scramble-Puro载体连接获得Nix shRNA重组慢病毒载体;将病毒包装辅助质粒与上述重组慢病毒载体共转染293T细胞,收集上清液并浓缩获得慢病毒浓缩液,3倍梯度稀释法测定病毒滴度;用病毒颗粒感染PC12细胞,经嘌呤酶素筛后得到稳定感染细胞株;荧光显微镜检测Nix荧光水平,Western blot检测Nix蛋白的表达。结果成功构建Nix基因过表达和shRNA慢病毒载体,并在293T细胞中包装获得病毒。重组病毒感染PC12细胞后,荧光显微镜检测Nix基因过表达细胞荧光水平增加,shRNA感染细胞荧光水平降低;Western blot检测显示Nix基因过表达PC12细胞中Nix蛋白表达显著升高,shRNA慢病毒感染细胞中Nix蛋白表达明显降低,而Nix shRNA1干扰效果最好。结论成功构建Nix基因过表达与shRNA慢病毒载体,并获得Nix过表达与干扰细胞模型。
- 张君莉黄永秀张红王丹刘腾李亚王建东
- 关键词：SHRNA慢病毒载体PC12细胞
- 慢病毒介导shRNA沉默LAMP-2A和TSG101表达对PC12细胞中EGFP-α-synuclein(A53T)降解的影响
- 2015年
- 目的采用慢病毒介导的shRNA干扰技术,下调PC12细胞中溶酶体相关膜蛋白-2A(lysosome-associated membrane protein type 2A,LAMP-2A)和肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene101,TSG101)的表达,并研究其对EGFP-α-synuclein(A53T)降解的影响。方法以LAMP-2A和TSG101为靶基因,合成寡核苷酸,退火形成双链DNA,与经Bam HⅠ、EcoRⅠ双酶切的p HBLV-U6-Puro载体连接获得重组慢病毒载体;将其与病毒包装辅助质粒共感染293T细胞,收集并浓缩上清液获得重组病毒,测定病毒滴度;病毒颗粒转染PC12细胞,经嘌呤酶素筛选获得稳定感染细胞株;Western blot检测LAMP-2A和TSG101蛋白的表达;分别采用LAMP-2A shRNA2和TSG101 shRNA1下调PC12细胞中LAMP-2A和TSG101蛋白的表达,并结合巴佛洛霉素A1处理,研究其对PC12细胞中EGFP-α-synuclein(A53T)、EGFP、α-synuclein(A53T)和LC3B蛋白的影响,免疫荧光检测各组PC12细胞中EGFP-α-synuclein(A53T)和LC3B蛋白的表达。结果成功构建干扰LAMP-2A和TSG101表达的慢病毒载体,并在293T细胞中包装获得病毒。重组病毒感染PC12细胞后,Western blot检测结果显示LAMP-2A shRNA2和TSG101 shRNA1干扰效果最好;下调LAMP-2A和TSG101蛋白表达均能够抑制细胞中EGFP-α-synuclein(A53T)、EGFP和α-synuclein(A53T)蛋白的降解(P<0.01),并提高LC3-Ⅱ蛋白的含量(P<0.01)。结论慢病毒介导的shRNA能有效地沉默PC12细胞中LAMP-2A和TSG101的表达,抑制细胞中EGFP-α-synuclein(A53T)的降解。
- 王建东刘腾张君莉刘海耘黄永秀张红
- 关键词：PC12细胞
