王广斌
- 作品数：57 被引量：189H指数：7
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学航空宇航科学技术冶金工程更多>>
- 转化生长因子β1转染骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化被引量：12
- 2007年
- 目的:通过转化生长因子β1基因转染大鼠的骨髓间充质干细胞,观察目的基因的分泌情况及干细胞向软骨细胞分化效果,为构建新型的软骨组织工程学种子细胞提供新思路。方法:实验于2005-10/2006-09在中国医科大学细胞生物实验室完成。实验材料:6周龄Wistar大鼠10只,质粒pcDNA3.1-TGF-β1(由吉林大学徐莘香教授惠赠),转化生长因子β1、Ⅱ型胶原小鼠抗大鼠单克隆抗体(Neomaker公司)。实验分组:分为未经转染的骨髓间充质干细胞(未转染组)、转染空载的骨髓间充质干细胞(转染空载体组)和转染转化生长因子β1的骨髓间充质干细胞(转染转化生长因子β1组)。实验方法:①密度梯度离心法和贴壁分离法相结合分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,免疫荧光法检测细胞表面标志。②质粒pcDNA3.1-TGF-β1扩增、提取、鉴定。③转化生长因子β1基因转染骨髓间充质干细胞。实验评估:①四甲基偶氮唑盐法测定筛选后细胞的增殖活性。②Westernblot检测转染后细胞转化生长因子β1和Ⅱ型胶原蛋白表达。结果:①免疫荧光法检测骨髓间充质干细胞:CD29和CD44表达阳性,CD34和CD45表达阴性。②pcDNA3.1-TGF-β1真核表达载体的酶切鉴定:基因测序与GeneBank cDNA序列相符。③转染基因对骨髓间充质干细胞增殖活性的影响:基因转染后骨髓间充质干细胞的增殖力变强,转染组的细胞增殖力高于未转染组和转染空载体组。④转化生长因子β1表达:转染后的骨髓间充质干细胞较未转染和转染空载体的骨髓间充质干细胞分泌转化生长因子β1蛋白增加。⑤Ⅱ型胶原的蛋白表达:在转化生长因子β1目的基因转染后的骨髓间充质干细胞Ⅱ型胶原蛋白表达较未染和转染空载体的骨髓间充质干细胞增强。结论:应用基因转染技术将转化生长因子β1目的基因导入骨髓间充质干细胞中,在蛋白质水平鉴定转染成功,且骨髓间充
- 贺明付勤王广斌宫树一
- 关键词：间质干细胞基因转染转化生长因子Β
- 小腿后方支撑支具
- 本实用新型小腿后方支撑支具，包括小腿支撑装置、大腿支撑装置；还包括用于所述小腿支撑装置与大腿支撑装置转动连接的角度旋转卡盘，角度旋转卡盘由带有角度刻度的盘面与通过盘面及盘面上的转轴转动连接的小腿侧连接支撑板、大腿侧连接支...
- 李彬王广斌王佳时贺明白伦浩
- 文献传递
- 患肢体位对全膝关节置换术后失血量的影响被引量：4
- 2012年
- 全膝关节置换术（TKA）是失血量最大的手术之一，导致的贫血是影响患者术后恢复的重要因素。为改善术后贫血，临床上普遍做法是进行异体输血，不但存在疾病传播及免疫反应等不良反应，也增加了医疗费用支出。2008年9月至2009年5月，我们将42例初次TKA患者患肢术后置于屈髋屈膝30。体位，并与42例术后患肢放于伸直体位的初次TKA患者进行比较，观察对术后失血量的影响，疗效满意。现报告如下。
- 李彬白伦浩傅永慧王广斌贺明王佳时
- 关键词：全膝关节置换术术后恢复失血量异体输血免疫反应
- 骨折微创手术用双爪复位固定器
- 本实用新型公开了一种骨折微创手术用双爪复位固定器，该双爪复位固定器由四部分构成，所述的四部分分别为调节螺旋杆、第一爪型结构、第二爪型结构、直线型走线空心套管；所述的第一爪型结构与第二爪型结构滑动连接，所述的调节螺旋杆分别...
- 李彬王广斌周秉正白伦浩
- 文献传递
- miR-646 抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移的机制初探被引量：3
- 2017年
- 目的探讨mi R-646对骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。方法通过MTT实验检测mi R-646过表达或受到抑制后对U2OS细胞增殖的影响。Transwell实验分析mi R-646过表达或受到抑制后对U2OS细胞迁移的影响。MIRDB预测mi R-646与表皮生长因子受体(EGFR)的位点结合后,利用荧光素酶报告及实验检测mi R-646对EGFR的靶向作用,并通过Western blotting检测mi R-646对EGFR通路的作用。结果 MTT结果表明,转染mi R-646后U2OS细胞的增殖受到了显著地抑制,24 h时抑制率为21.76%±1.05%,相反,当mi R-646受到抑制后U2OS细胞的增殖得到了促进,24 h时促进的比率为18.89%±0.81%。Transwell实验发现mi R-646可以抑制骨肉瘤细胞系U2OS的迁移能力。随后MIRDB预测发现mi R-646与EGFR的3’UTR区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了mi R-646可以直接作用于EGFR。Western blotting结果证明mi R-646对U2OS细胞增殖迁移能力的抑制在一定程度上是通过mi R-646对EGFR通路的抑制实现的。结论 mi R-646可以通过抑制EGFR通路的活性,进而抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移功能。
- 裴祎牟帅薛峰滕松龄王广斌
- 关键词：骨肉瘤表皮生长因子迁移增殖
- 脊髓损伤大鼠骨组织微环境中RANKL/OPG表达的改变被引量：2
- 2010年
- 目的研究脊髓损伤(SCI)大鼠骨组织微环境中RANKL/OPG表达的改变,探讨SCI对骨代谢的影响。方法 20只雄性6wSD大鼠,分为SCI组和Sham组。饲养3w后收集右侧胫骨测定骨密度,左侧胫骨切取后立刻液氮冷冻保存,一部分用于骨组织提取RNA,半定量RT-PCR分析RANKL、OPG、Col1α1、OCN基因的表达变化;另一部分用于酶免疫分析(EIA)方法测量骨组织中RANKL和OPG的含量。结果 3w时SCI组胫骨的骨密度明显低于Sham组,骨密度的下降既发生在胫骨近端干骺端(-26.3%,P<0.05),又发生在胫骨干(-21.2%,P<0.05)。RT-PCR检测表明,SCI后3w大鼠胫骨近端骨组织微环境中RANKL的表达显著上调(+122.2%,P<0.01),OPG(-22.1%,P<0.05)和OCN(-25.3%,P<0.05)的表达显著下调。RANKL和OPG的表达改变也得到了EIA的证实。结论 SCI时RANKL过表达及OCN和OPG表达下调,提示SCI时易发生骨质疏松。
- 柳达黄瑛李彬王广斌许晓军付勤戴力扬
- 关键词：脊髓损伤骨保护素
- 人工股骨头置换与PFNA内固定治疗高龄股骨转子间不稳定骨折的疗效分析被引量：10
- 2010年
- 目的对高龄不稳定性股骨转子间骨折病人进行回顾性分析,比较双极人工股骨头置换和防旋型股骨近端髓内钉(PFNA)固定两种治疗方案的疗效及术后并发症发生率。方法随访病例共65例,男16例,女49例,年龄80～101岁,平均87岁;Evans分型,ⅢA型25例,ⅢB型29例,Ⅳ型11例;A组34例:行双极人工股骨头置换治疗;B组31例:行PFNA内固定治疗。结果随访时间6～23个月,两组的住院时间、助行器辅助下床活动时间、在院并发症发生率、功能评价均无显著性差异(P>0.05);而手术时间、术中失血量有显著性意义(P<0.05)。结论采用双极人工股骨头置换与PFNA内固定治疗高龄股骨转子间不稳定骨折,两组病例卧床时间短、在院并发症发生率低,但PFNA治疗组手术时间更短、术中出血量更少,并且避免了股骨头置换术后关节疼痛、假体松动及翻修等问题。
- 王广斌付勤刘忠厚李建军贾长青许晓军
- 关键词：股骨转子间骨折骨折愈合防旋型股骨近端髓内钉
- 神经肽P物质调控脊髓损伤大鼠骨髓间充质干细胞源性成骨细胞RANKL/OPG的表达被引量：8
- 2010年
- 目的研究P物质(substance P,SP)对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)源性成骨细胞RANKL/OPG表达的影响,从而揭示SP在骨代谢中的作用。方法 20只雄性6w龄SD大鼠制作脊髓损伤模型。3w后测定胫骨骨密度,收集股骨髓腔细胞悬液,MSCs诱导成骨细胞培养至第二代,用10-8mol/L SP进行作用。用免疫细胞化学的方法进行RANKL和OPG的染色并定量分析;用半定量RT-PCR分析RANKL、OPG、Col1α1、OCN基因的表达变化;用EIA方法检测细胞培养基中RANKL和OPG蛋白的表达变化。结果 3w时SCI组胫骨的骨密度明显低于SHAM组,骨密度的下降既发生在胫骨近端干骺端(-26.3%,P<0.05),又发生在胫骨干(-21.2%,P<0.05)。通过免疫细胞化学的方法进行定量分析显示,SP处理后比不加处理因素的MSCs源性成骨细胞表达RANKL显著增加(P<0.05)。SP作用72h后MSCs源性成骨细胞RANKL的表达显著上调(+160.2%,P<0.01),OPG的表达显著下调(-45.5%,P<0.01),OCN的表达显著下降(-42.9%,P<0.01)。结论 SP在成骨细胞与破骨细胞偶联的关系中发挥重要作用。它既可以对成骨细胞产生直接作用(抑制OCN的基因表达),又可以通过成骨细胞间接的作用于破骨细胞(促进RANKL表达,抑制OPG表达),增强破骨细胞的活性,导致骨吸收和骨形成失衡,最终发生骨质疏松。
- 柳达黄瑛刘忠厚王广斌李彬许晓军付勤戴力扬
- 关键词：脊髓损伤P物质成骨细胞破骨细胞
- 全膝关节置换术后股四头肌功能的相关性研究被引量：3
- 2012年
- 膝骨关节炎是一种慢性、退行性改变,具有关节软骨缺损、软骨下骨囊变、骨赘形成等特点[1],是老年人群中的高发疾病,常引起严重的疼痛和功能受限,最终需要进行全膝关节置换术（TKA）来治疗。
- 贺明白伦浩王佳时王广斌
- 关键词：全膝关节置换术术后肌功能股四头关节软骨缺损退行性改变
- 不同分离方法对骨髓基质干细胞成软骨分化的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨分离骨髓基质干细胞(BMSCs)的两种基本方法-贴壁分离法和密度梯度离心法对BMSCs成软骨分化能力的影响。方法抽取兔双侧股骨骨髓,等分,一份(A组)用贴壁分离法,另一份(B组)用密度梯度离心法分离BMSCs,倒置显微镜观察BMSCs的生长情况,选择两组同代的BMSCs,用TGF-β1诱导其向软骨方向分化。诱导后的细胞用免疫组化检测II型胶原表达情况,用原位杂交检测II型胶原mRNA表达情况,最后计算两种检测方法的细胞阳性率。结果A、B两组细胞经TGF-β1诱导后,II型胶原免疫组化阳性率分别为76.1%和77.7%,II型胶原mRNA原位杂交阳性率分别为70.3%和71.0%。结论贴壁分离法和密度梯度离心两种分离方法对BMSCs的生长和成软骨分化无显著差别。
- 王广斌贺明付勤李建军
- 关键词：骨髓间充质干细胞软骨分化
