王君
- 作品数：6 被引量：46H指数：4
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 伏马毒素的毒性作用及其检测方法研究进展被引量：4
- 2010年
- 伏马毒素是由串珠镰刀菌产生的一种具有毒性及致癌性的真菌毒素。伏马毒素能够广泛污染玉米等粮食作物及相关食物制品和动物饲料,严重威胁人类及动物健康,成为继黄曲霉毒素之后的又一研究热点。本文介绍伏马毒素的危害性及检测的最新研究进展。
- 王君王元凯严亚贤
- 关键词：伏马毒素
- 伏马毒素B_1单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA方法的建立被引量：15
- 2011年
- 采用戊二醛法将半抗原伏马毒素B1分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白（KLH）和蛋白卵清白蛋白（OVA）偶联成为完全抗原KLH-FB1和OVA-FB1。OVA-FB1作为包被抗原建立ELISA方法;KLH-FB1作为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体。经三次亚克隆后,筛选出两株（6H3,6H11）能特异、稳定分泌抗FB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。选择其中一株杂交瘤细胞通过体内诱生腹水的方法制备单克隆抗体,经检测表明单克隆抗体的亚型为IgG1,轻链为κ型。采用间接ELISA测得腹水纯化后效价达l∶16 000,抗体对伏马毒素的半数阻断浓度（IC50）为8.26 ng/mL,对玉米赤霉烯酮、黄曲霉素B1等结构类似物几乎不存在交叉反应,与其他结构的氯丙嗪、链霉素等无交叉反应。利用获得的抗FB1单克隆抗体,建立了间接竞争ELISA检测方法,检测灵敏度为0.44 ng/mL,检测线性范围为0.93~73.06 ng/mL,加标回收率在线性范围内达到回收率可达78.4%~102%。
- 王雨晨王君王元凯严亚贤
- 关键词：半抗原单克隆抗体间接竞争ELISA
- 玉米赤霉烯酮检测方法研究进展被引量：5
- 2009年
- 王元凯王君严亚贤
- 关键词：玉米赤霉烯酮
- 化学发光间接竞争ELISA检测伏马毒素B1方法的建立被引量：1
- 2012年
- 采用自制的抗伏马毒素B1(FB1)多克隆抗体,建立定量检测玉米中FB1的化学发光间接竞争ELISA方法。通过化学偶联分别获得免疫抗原钥孔血蓝蛋白(KLH)-FB1和包被抗原卵清蛋白(OVA)-FB1。用KLH-FB1免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。以OVA-FB1为包被抗原,FB1为竞争抗原,建立检测FB1的间接竞争化学发光ELISA方法,并对该方法进行了条件优化。该方法对FB1标品进行检测,得到回归方程为Y=0.602 5-0.370 7 X,相关系数R2为0.986 2,检测限为0.14ng/mL,线性关系良好的检测范围为0.14～33.3ng/mL,玉米样品加标回收率83.5%～102%。表明建立的化学发光ELISA法敏感性好、特异性高,能用于玉米中FB1毒素的检测。
- 王君王元凯严亚贤
- 伏马毒素B1免疫学检测方法的研究
- 伏马毒素/(Fumonisins/)是一种主要由串珠镰刀菌/(Fusarium moniliforme/)产生的具有毒性及致癌性的真菌毒素,通常存在于受此类真菌污染的玉米等粮食作物及其相关的食品和动物饲料中。该毒素能够引...
- 王君
- 关键词：间接竞争ELISA
- 文献传递
- 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：19
- 2011年
- 玉米赤霉烯酮具有较强的生物毒性,检测谷物中的玉米赤霉烯酮在食品和饲料安全中具有重要的作用。将玉米赤霉烯酮与牛血清白蛋白的偶联物免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,并建立基于单克隆抗体的酶联免疫法作为检测玉米赤霉烯酮的方法。结果共筛选到4株抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,3株抗体亚类为IgG1,1株为IgG2b。选择其中的一株杂交瘤细胞2C9制备小鼠腹水,纯化后测定了抗体效价为1/40 000。以此单抗建立的间接竞争ELISA方法,其半数抑制率(IC50)为1.90 ng/mL,检测限(IC10)为0.051 ng/mL,检测区间(IC20-IC80)为0.115-13.900 ng/mL;且对玉米赤霉烯酮有很好的特异性。回收率检测在样品含1.46-93.80μg/kg时回收率为96.5%-113.0%。本实验建立的检测方法可用于多种谷物及饲料样本中玉米赤霉烯酮的检测。
- 王元凯王君王雨晨陈志飞严亚贤郝倩雯李树清于翠杨翠云孙建和
- 关键词：玉米赤霉烯酮单克隆抗体酶联免疫法
