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鄱阳湖区泥鳅遗传多样性研究被引量：12: 2010年; 采用同工酶电泳、RAPD引物PCR扩增和线粒体DNA细胞色素b基因全序列3种方法,对鄱阳湖3种斑纹泥鳅的遗传结构进行分析。同工酶电泳显示3种斑纹泥鳅在LDH、MDH和EST这3种同工酶之间存在群体和组织差异;RAPD试验结果显示6条RAPD引物在18尾鄱阳湖泥鳅个体中共扩增出了169条不同分子量的RAPD标记,其中多态性带101条,多态性带的比例为59.56%,平均每个引物产生9.39条带和5.61条多态性带,不同斑纹泥鳅的遗传多样性指数显示3种斑纹泥鳅的遗传水平处于较高水平。以特异性引物进行PCR扩增,获得了1140bp的细胞色素b基因全序列。结果显示,3种不同斑纹泥鳅中检测出了1个共有单倍型和3个特有单倍型。与共有单倍型相比,大花斑泥鳅特有单倍型有91个变异位点,而小花斑泥鳅与无花斑泥鳅特有单倍型的变异位点为20和24个。基于单倍型构建的NJ树和MP树,显示大花斑泥鳅的特有单倍型EU145023处于独立的分支上,这反映出鄱阳湖地区不同斑纹的泥鳅之间在线粒体DNACytb基因中出现了一定距离的分化。; 曾柳根张伟甘云飞王军花洪一江; 关键词：泥鳅同工酶 RAPD 细胞色素B

表达新型defensin抗菌肽的DNA: 本发明属于生物技术领域，涉及一种表达新型defensin抗菌肽的DNA，序列如SEQ：1。该DNA表达的抗菌肽及其衍生物可用于水产病害防治，具有广泛用途。; 彭扣洪一江王军花盛军庆; 文献传递

鄱阳湖中华鳖染色体核型、G带和Ag-NORs的分析被引量：3: 2010年; 以常规方法制备鄱阳湖中华鳖的染色体标本,分析其核型。其核型公式为2n=66=4M+8Sm+16T+38mc,NF=78。用胰酶法制备染色体G-带,绘制了G带模式图。采用了稍加修改的Foresti方法研究鄱阳湖中华鳖染色体的Ag-NORs核型,其Ag-NORs数目主要为2个,多态性主要表现为银染粒的大小和染色的深浅,数目的多态不显著。比较鄱阳湖中华鳖和其它一些已研究过的龟鳖类动物的银染核型,绝大多数种类的Ag-NORs数为2,这说明龟鳖类动物rDNA非常保守,该类动物的演化过程较为缓慢。; 王军花饶友生龚贵如洪一江; 关键词：中华鳖核型 G-带 AG-NORS 鄱阳湖

池蝶蚌血细胞吞噬活性的研究: 本文对1-6龄池蝶蚌血细胞的吞噬活性的变化进行了研究。通过池蝶蚌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和噬水气单胞茵吞噬过程的研究发现：池蝶蚌血细胞吞噬过程可由两种途径完成，一是血细胞伸出丝状或片状伪足。二是血细胞形态发生...; 盛军庆郭磊王军花洪一江; 关键词：池蝶蚌血细胞大肠杆菌吞噬活性

阿瓦斯汀不同的给药途径对兔角膜新生血管及角膜超微结构的影响: 目的:　　通过研究阿瓦斯汀不同的给药途径分别对兔角膜新生血管及超微结构的影响,探索阿瓦斯汀治疗角膜新生血管较安全持久有效的给药途径,为临床应用阿瓦斯汀治疗角膜新生血管性疾病提供实验依据。　　方法:　　选用健康...; 王军花; 关键词：角膜烧伤新生血管阿瓦斯汀给药途径超微结构

池蝶蚌Sox2基因在不同组织及不同月龄精巢中的表达被引量：4: 2012年; Sox基因家族在胚胎发育过程和性别分化中起重要作用,为研究池蝶蚌中Sox基因的功能,以人SRY基因HMG-box保守区的序列设计简并引物,以雌、雄池蝶蚌基因组DNA和精巢cDNA为模板进行扩增,获得了2个不完全相同的序列,分别为DNA-HMG1、DNA-HMG2和cDNA-HMG,长度均为220 bp,编码73个氨基酸。与人等物种Sox1、Sox2、Sox3及Sox14有很高的同源性,雌雄个体之间没有序列差异性。采用RACE-PCR扩增获得了池蝶蚌性腺Sox2部分cDNA片段,长度为1774 bp,该序列核苷酸与欧洲帽贝的SoxB和人类的Sox2的同源性最高;在部分开放阅读框249个氨基酸残基中,具有Sox家族典型的HMG-box结构域,与人类、小鼠、原鸡和斑马鱼等Sox2的HMG-box同源性为98%。为了解该基因在各组织中的表达情况,采用实时荧光定量PCR方法分析了外套膜、闭壳肌、鳃、肠、肝、肾、精巢和卵巢在内的8种组织hs-Sox2的表达情况,结果显示,hs-Sox2基因在8种组织中均有表达,其中在肾脏中的表达量最高,其次是肠与闭壳肌,在雄性性腺中的表达量明显高于雌性性腺,在肝脏中的表达量最低;为了解hs-Sox2在不同性腺发育时期的表达情况,采用实时荧光定量PCR方法分析了5个不同月龄的精巢组织中hs-Sox2的表达情况,结果显示在39月龄性腺的表达量最高,其次是16月龄性腺,63月龄蚌中的表达量最少。以上结果表明,hs-Sox2基因可能参与了池蝶蚌精巢的发育及功能的维持。; 曾柳根徐灵王军花盛军庆辜清彭扣洪一江; 关键词：池蝶蚌性腺荧光定量PCR

池蝶蚌细胞色素P450基因的克隆与表达分析: 细胞色素P450(cytochrome P450,CYP),起着与底物结合以及末端氧化酶的作用,具有底物氧化性和功能多样性的特征.在多种外源性化合物代谢和内源性物质生成的过程中,该酶起到了十分重要的作用.池蝶蚌(Hyri...; 侯喜洋王军花盛军庆彭扣辜清洪一江; 关键词：细胞色素P450 池蝶蚌; 文献传递

嗜水气单胞菌诱导的池蝶蚌血细胞cDNA文库的构建和亲环蛋白基因序列的初步分析被引量：5: 2011年; 实验利用灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)诱导处于四龄池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)14h,将诱导后的池蝶蚌血细胞的总RNA进行逆转录,用LD-PCR法合成双链cDNA,从而首次成功构建池蝶蚌血细胞的全长cDNA文库。原始文库的滴度为4×106 cfu/cm3,重组率为90%,扩增后文库的滴度为3.55×109 pfu/mL。目前文库已随机测序672个样品,将所得双向序列进行拼接,去除载体,并多序列比对去除重复序列后,发现436条为已知功能序列,其余为未知功能序列。序列中最小长度270 bp,最大长度为2153 bp,平均大小608.6 bp,表明插入片段大小理想。从文库中筛选获得免疫相关基因池蝶蚌亲环蛋白A(HsCyp A)全长基因并进行序列分析。结果显示,HsCyp A全长1229 bp,序列包括52 bp的5′非编码区、495 bp的开放阅读框、682 bp的3′非编码区和29 bp的poly(A)尾,没有明显的加尾信号。对Cyp A氨基酸序列二级结构进行了较详细的分析并进行了三维建模,同时构建了其系统进化树,分析表明亲环蛋白家族是一个在进化上非常保守的蛋白家族。综合分析,Cyp A在水生动物中不仅仅只是一种组成型蛋白,而是可能在病原感染防御中发挥重要作用。; 谢凯徐灵盛军庆曾柳根王军花洪一江; 关键词：池蝶蚌血细胞 CDNA文库嗜水气单胞菌亲环蛋白

水温对免疫兴国红鲤免疫细胞影响的研究: 2002年; 用肠型点状产气单胞菌灭活疫苗免疫兴国红鲤,第1组饲养于水温为(22.1±1.9)℃的水体中,第2组饲养于(11.4±1.3)℃的水体中,;第3组为对照组,水温同1组。20 d 和40 d 后测定外周血、脾、头肾、体肾、胸腺中的细胞成分含量变化。结果表明,常温下,免疫鱼外周血中的小淋巴细胞值在20 d 期下降,40 d期上升,而中性粒细胞则相反;在脾、头肾、体肾和胸腺中,前期的淋巴细胞总值上升;中性淋巴细胞总值下降。低温下,前期能抑制免疫反应水平,而后期抑制作用逐渐消失。; 洪一江胡成钰王军花余志坚林光华; 关键词：兴国红鲤免疫器官水温淋巴细胞

池蝶蚌金属硫蛋白基因的原核表达及活性分析被引量：1: 2014年; 筛选池蝶蚌性腺转录组并运用RT-PCR方法扩增池蝶蚌金属硫蛋白(metallothionein,MT)ORF框序列。该序列有216个碱基组成,编码71个氨基酸,其中半胱氨酸含量丰富,富含金属硫蛋白典型的Cys-X(1-3)-Cys结构。多序列比对表明,池蝶蚌MT蛋白序列和其他物种MT序列有很高的同源性,与三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)MT蛋白具有100%的同源性。将该ORF框片段导入原核表达载体pET-32a上,在IPTG诱导下成功在E.coli BL21(DE3)中融合表达。SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小约为27kDa,在25℃,终浓度为1mM IPTG诱导4h表达量最高,重组蛋白主要存在上清液中,纯化并获得了重组蛋白。细胞增殖实验表明,纯化的MT融合蛋白有生物活性并能有效地减轻宫颈癌Hela细胞的氧化胁迫效应。; 王诚远胡芳琴刘国凤王军花彭扣盛军庆洪一江; 关键词：池蝶蚌金属硫蛋白原核表达活性分析

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