王亮
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
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- 骨形态发生蛋白-2基因转染骨髓间充质干细胞移植对糖尿病大鼠骨折愈合的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察骨形态发生蛋白-2（BMP-2）基因转染大鼠骨髓间充质干细胞（BM-SCs）移植对糖尿病骨折愈合的影响，探讨糖尿病骨折治疗的新方法。方法Wistar雄性成年6周龄大鼠50只，按随机数字表法分为对照组和实验组，均制成糖尿病骨折模型，体外高糖环境下腺病毒介导的BMP-2转染BMSCs，分别于骨折局部移植相应的BMSCs。术后1，2，3，4，6周行X线检查；取骨痂行HE染色，免疫组化检测骨痂中BMP-2的灰度值；ELISA法检测血清中BMP-2的浓度。结果第4周实验组骨痂BMP-2灰度值为83±3，对照组为1184-4（P〈0．01）。第4周实验组血清BMP-2浓度为（203．80±8．96）ng／L，对照组为（139．15±4．19）ng／L（P〈0．01）。结论BMP-2基因转染的BMSCs移植能促进糖尿病大鼠骨折的愈合。
- 王德亮邢德国吴建军王亮田克立刘中浩宫明智
- 关键词：骨髓祖代细胞骨形态发生蛋白质类基因转移技术
- 胰岛素样生长因子-1基因转染骨髓间质干细胞移植对糖尿病大鼠骨折愈合的影响被引量：6
- 2012年
- 目的观察胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因转染的骨髓间质干细胞（BMSCs）移植对糖尿病大鼠骨折愈合的影响，探讨糖尿病骨折的基因疗法。方法Wistar雄性6周龄大鼠50只，随机分为对照组、实验组，链脲佐菌素诱导为糖尿病模型后均造成右侧胫骨骨折，体外高糖环境下Ad．IGF-1转染BMSCs，将相应组别的BMSCs移植于骨折局部。于1、2．3、4、6周摄X线，取局部骨痂行苏木素一伊红（HE）染色，并免疫组织化学检测骨痂中IGF-1，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IGF-1。结果第g周骨痂IGF．1灰度值：实验组为103±5，对照组为109±4（P〈0．05）。第4周血清IGF-1浓度：实验组为（668．80±8．07）ng／L，对照组为（569．20±9．31）ng／L（P〈0．01）。结论IGF-1基因转染的BMSCs移植能促进糖尿病大鼠的骨折愈合。
- 王德亮邢德国王亮吴建军田克立刘中浩宫明智
- 关键词：胰岛素样生长因子-1糖尿病骨折转染
- 糖尿病和卵巢去势对大鼠NO、TGF-β_1及骨密度的影响及相互作用
- 2011年
- 目的探讨糖尿病及卵巢去势对一氧化氮(NO)、转化生长因子β1(TGF-β1)、骨密度的影响及其相互作用。方法雌性Wistar大鼠160只,随机分为4组:正常对照组(A组),糖尿病模型组(B组,链脲佐菌素诱导制备),单纯去势模型组(C组,切除双侧卵巢),糖尿病并发去势模型组(D组,制成糖尿病模型后切除双侧卵巢),于造模后4,8,12,16 w,进行骨密度检测,并应用放免法检测血清雌激素水平,硝酸还原酶法检测血清NO水平,ELISA法检测血清TGF-β1水平,免疫组织化学法检测骨中TGF-β1水平。结果糖尿病及卵巢去势均可使血清NO水平逐渐降低(P<0.05),两者同时存在时,即糖尿病并发卵巢去势模型,血清NO水平降低更为明显。糖尿病可使血清TGF-β1水平升高(P<0.05),卵巢去势可使血清TGF-β1水平降低(P<0.05),但两者同时存在时血清TGF-β1变化不明显(P>0.05)。糖尿病及卵巢去势可使大鼠股骨骨密度降低(P<0.05),两因素同时存在时,股骨骨密度降低更明显。但在上述指标变化中,统计分析两者无明显的协同或拮抗作用,我们推测两因素间存在有叠加作用。结论糖尿病与卵巢去势同时存在,骨密度降低幅度更大,可出现更严重的骨质疏松。
- 高红伟刘中浩邢德国王亮宫明智
- 关键词：糖尿病卵巢去势骨密度一氧化氮转化生长因子Β1
- 高糖环境对骨形态发生蛋白-2、胰岛素样生长因子-1转染大鼠骨髓间充质干细胞基因表达的影响被引量：6
- 2011年
- 【摘要】目的观察骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）在高糖环境下能否转染大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC），转染成功后目的基因表达。方法腺病毒载体介导大鼠BMP-2和IGF-1基因高糖环境下转染Wistar大鼠BMSC，应用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测基因复制及表达。结果高糖环境下BMP-2、IGF-1基因各自及共同转染BMSC后，BMSC成活，BMP-2基因表达的产物峰值出现在转染后72h，BMP-2组灰度值为（1．86±0．06），产物浓度为（58．60±1．61）μg/L，BMP-2＋IGF-1组灰度值为（2．374-0．34），产物浓度为（67．61±1．91）μg/L，两组差异均有统计学意义（P〈0．05）；IGF-1基因表达的产物峰值出现在转染后48h，IGF．1组灰度值为（1．48±O．03），产物浓度为（65．17±3．64）μg／L，BMP．2＋IGF-1组灰度值为（1．93±0．17），产物浓度为（73．94±4．30）μg／L，两组差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高糖环境下BMP-2、IGF-1可转染BMSC，且转染后基因表达产物量显著增加。BMP-2、IGF-1基因在基因表达上有协同作用。
- 王亮邢德国吴建军刘中浩田克立宫明智
- 关键词：骨形态发生蛋白-2胰岛素样生长因子-1高糖骨髓间充质干细胞
- 高糖对骨形态发生蛋白-2、胰岛素样生长因子-1基因转染大鼠骨髓基质干细胞增殖的影响被引量：3
- 2011年
- 目的 观察高糖环境下骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因转染大鼠骨髓基质干细胞（BMSC）后BMSC的增殖.方法 用Ad-BMP-2和Ad-IGF-1转染大鼠BMSC,Wester blot检测蛋白表达.噻唑蓝（MTT）比色法及流式细胞术检测细胞增殖.结果 Western blot检测到转染组细胞中有目的 蛋白表达.MTT结果显示第5天细胞增殖能力达到高峰,5 d光吸收值：A～E组分别为0.324±0.027、0.319±0.017、0.622±0.028、0.626±0.020、0.778±0.031.流式细胞术结果显示A～E组细胞处于增殖期的比重分别为23.92±3.07、23.51±2.11、34.37±6.85、35.04±1.45、42.56±1.15.结论 高糖环境下BMP-2和IGF-1基因转染均能促进BMSC增殖,联合转染对BMSC增殖有协同效应.
- 吴建军邢德国王亮田克立刘中浩宫明智
- 关键词：骨形态发生蛋白-2胰岛素样生长因子-1骨髓基质干细胞高糖细胞增殖
