熊玲媛
- 作品数:8 被引量:45H指数:3
- 供职机构:厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 甜菊钙调蛋白基因的克隆及结构分析被引量:4
- 2002年
- 钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应 .我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA ,逆转录合成cDNA第一链 ,以此为模板 ,参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成 5’端和 3’端引物 ,利用多聚酶链式反应 (PCR)扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因 .序列分析表明 ,它们均由 4 5 0个核苷酸组成 ,编码 14 8个氨基酸 .在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白基因均有很高的同源性 ,同源率在 83%以上 ,编码的氨基酸序列同源性更高 ,同源率高达 95 %以上 .这两个基因之间存在差异 ,其核苷酸序列同源率为 85 % ,编码区的氨基酸序列的同源率为 99% ,仅在第 12
- 熊玲媛徐金森陈睦传
- 关键词:甜菊钙调蛋白基因CDNA克隆聚合酶链式反应基因克隆
- 查尔酮合酶基因的克隆及双元载体的构建被引量:2
- 2002年
- 以中国水仙为材料 ,利用RT PCR方法克隆查尔酮合酶基因 (CHS)的cDNA ,核酸序列分析表明 ,该基因的编码区长 116 7bp ,编码 389个氨基酸 .通过进一步的中间克隆 ,将CHS连上CaMV35s启动子和Tnos终止子 .进一步将重组片段插入植物表达载体 pCAMBIA130 1,PCR及测序结果都证明植物双元表达载体p130 1BΩC构建获得成功 .
- 黄胤怡沈明山陈亮熊玲媛陈睦传
- 关键词:查尔酮合酶基因植物表达载体基因克隆类黄酮
- GFP-mut2植物表达载体的构建及在甜菊愈伤组织中的表达被引量:2
- 2002年
- 构建了GFP mut2的植物表达载体 ,在农杆菌的介导下使GFP mut2基因整合到甜菊核基因组中并得到了表达 ,从而建立了以绿色荧光蛋白基因为报告基因的根癌农杆菌介导的甜菊转基因系统 .
- 熊玲媛陈亮沈明山黄胤怡陈睦传
- 关键词:植物表达载体甜菊愈伤组织绿色荧光蛋白基因基因表达
- 无瓣海桑Sonnerati aapertala钙调蛋白基因的克隆及序列分析被引量:1
- 2002年
- 用高等植物钙调蛋白的保守序列设计两端引物 ,以红树植物海桑属无瓣海桑Sonneratiaapertala总DNA为模板 ,扩增出无瓣海桑钙调蛋白基因 ,并以之构建重组质粒pT ACaM .经测序分析比对 ,发现无瓣海桑钙调蛋白基因全长 1418bp ,其中第 1外显子 76bp ,第 2外显子 371bp ,中间为一 946bp的内含子所隔开 .编码 148氨基酸的蛋白质 ,其编码区序列与已知的其他高等植物的钙调蛋白基因核苷酸序列同源性高达 85 %以上 .而蛋白质序列同源性达95
- 陈亮杨大林熊玲媛邵寒娟林涛王鸣刚
- 关键词:SONNERATIA钙调蛋白基因无瓣海桑同源性红树植物
- 红树植物拟海桑钙调蛋白基因的克隆及分析被引量:3
- 2002年
- 钙调蛋白 (Calmodulin)是生物细胞内一种重要的调控蛋白 ,通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长和发育 .作者以高抗盐红树植物海桑属拟海桑 (Sonnera tiaparacaseolaris)总DNA为模板 ,参考GenBank上植物钙调蛋白基因序列合成 5′端和 3′端引物 ,利用多聚酶链式反应 (PCR)扩增了拟海桑钙调蛋白基因 ,与克隆载体pBsk(+)重组 ,转化EscherichiacoliDH5α得到重组克隆子 ,DNA序列分析表明 ,所得片段的编码区在核苷酸序列上与迄今已知的几种植物钙调蛋白基因有很高的同源性 ,同源率在 85%以上 ;与水稻、苹果、衣藻等相似 ,其基因编码区被一个位于第 75位核苷酸之后的内含子所中断 .
- 熊玲媛林涛周涵韬徐金森葛运生陈睦传陈亮
- 关键词:红树植物克隆钙调蛋白基因聚合酶链式反应DNAPCR
- 甜菊(Stevia rebaudiana Bertoni)钙调蛋白基因的克隆、表达及绿色荧光蛋白基因转化甜菊的研究
- 甜菊/(Stevia rebaudiana Bertoni/)是一种新型糖源作物,其糖苷具有高甜度、低热能、易溶解、耐热、稳定等特点,已成为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源植物,广泛用于食品、医药等行业。但是由于甜菊是...
- 熊玲媛
- 关键词:甜菊钙调蛋白绿色荧光蛋白
- 文献传递
- 盐胁迫对甜菊细胞内游离Ca^(2+)浓度的影响(简报)被引量:1
- 2002年
- 钙离子不仅是植物生长发育所需的一种大量元素,而且起了偶联细胞外刺激与胞内反应第二信使的作用,是多种受体激动后信息传递过程的中心环节。近年的研究表明:高温、干旱、触摸、低渗、低温、风、机械刺激、病原菌感染等多种环境胁迫均能引起胞质Ca^(2+)水平的改变。这种变化被认为是植物细胞感受环境胁迫的原初反应之一,它通过启动基因表达和胞内一系列生理生化过程调节细胞对环境改变的适应反应。胞质Ca^(2+)水平的改变有两种来源:胞外Ca^(2+)跨膜内流和胞内钙库如内质网中的Ca^(2+)释放。
- 熊玲媛徐金森洪付祥陈睦传
- 关键词:盐胁迫甜菊LSCM
- 鹤望兰基因组DNA的提取方法被引量:33
- 2002年
- 由于鹤望兰组织内含有大量多糖类及多酚类物质 ,严重干扰DNA的抽提 ,利用常规的SDS法、CTAB法和高盐低pH值法都难以抽提出高质量的鹤望兰基因组DNA .本文报道了在进行若干预处理之后 ,再用常规的SDS、CTAB、SDS裂解的高盐低pH值法和CTAB裂解的高盐低pH值法提取基因组DNA的改进方法 .根据外观、琼脂糖凝胶电泳检测、D2 60nm/D2 80nm比值的测定、限制性酶切反应、PCR扩增的结果表明 ,用改进方法提取的基因组DNA无论在纯度上还是在完整性上都比常规方法要好 .其中改进SDS裂解的高盐低pH值法是提取鹤望兰基因组DNA的最好方法 .图 3表2参
- 洪付祥徐金森熊玲媛蔡邦平王振忠陈睦传
- 关键词:鹤望兰基因组DNA限制性内切酶酶切