滕丽萍
- 作品数:13 被引量:31H指数:4
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:江苏省应用基础研究计划南京医科大学科技发展基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 大鼠胚胎发育后期胰腺中Mesothelin的表达被引量:8
- 2005年
- 目的:探讨大鼠胰腺胚胎发育后期胰岛形成及β细胞功能完善相关的基因表达调控.方法:采用高密度寡核苷酸芯片(A ffym etrix芯片)对孕15.5(E15.5)和E18.5胰腺进行基因转录水平分析并用RT-PCR验证基因在大鼠胰腺E12.5,E15.5,E18.5,初生和成年这五个不同发育时期的表达情况.结果:在差异或特异表达的基因中与胰腺细胞分化相关的转录因子和信号分子表达均下调,而与胰岛结构形成及β细胞代谢功能完善相关的基因表达上调,其中细胞黏附分子Mesothelin是在E18.5特异表达的基因,RT-PCR亦显示Mesothelin在大鼠胰腺胚胎发育后期特异性高表达.结论:Mesothelin可能对胰岛结构的形成和功能的完善及维持有重要作用.
- 滕丽萍胡静静袁庆新袁栎周锦勇郭静程梅刘超德伟
- 关键词:MESOTHELIN胰岛
- 大鼠胰腺发育过程中Munc13-1对胰岛素释放功能的影响被引量:8
- 2006年
- 目的:研究大鼠胰腺发育不同阶段Munc131基因及蛋白表达的变化及Munc131在胰岛素释放过程中的作用方法:应用显微分离及提取技术获得大鼠胚胎发育12.5d(E12.5),E15.5,E18.5,新生大鼠,出生后21d(P21)及成年大鼠胰腺组织;另外,从大鼠胚胎发育15d开始给予孕鼠半量饮食,造成宫内发育迟缓动物模型,提取其新生大鼠胰腺组织.采用RTPCR,RealtimePCR和Westernblot技术确定Munc131的表达情况,并测定不同发育时期血中胰岛素浓度.结果:胰岛素基因从E12.5开始出现,Munc131基因从E15.5开始表达,随着胎龄的增长,二者表达量皆增多.E15.5和E18.5时munc131蛋白表达量较少,以后明显增多.自E18.5即检测到血中胰岛素的存在,随着胚胎的发育,血胰岛素浓度逐渐升高.宫内发育迟缓新生大鼠比正常新生大鼠血胰岛素浓度低,同时Munc131基因及蛋白表达量亦比正常对照组明显减少.结论:Munc131在胰岛素释放过程中的作用,随着胚胎发育期胰岛素分泌的增多表达也增加,宫内发育迟缓新生大鼠胰岛素分泌减少时,Munc131的表达亦减少.
- 袁庆新刘超滕丽萍刘翠萍周锦勇郭靖程梅德伟
- 关键词:胰岛素分泌糖尿病宫内发育迟缓
- GSIS相关基因在大鼠胚胎胰腺发育后期表达模式
- 2008年
- 目的探讨大鼠胚胎发育晚期胰腺β细胞GSIS功能相关基因的表达趋势。方法利用显微分离方法分离胚胎15.5d(E15.5)和胚胎18.5d(E18.5)胰腺组织,提取RNA并与大鼠基因组芯片杂交。数据处理后,获得E15.5和E18.5胰腺组织基因表达谱。进而利用RT-PCR对芯片结果进行验证。结果在E15.5至E18.5,肝核因子(hepatocyte nuclear factor,Hnf)1α及4α特异表达,其下游基因胰岛素1(Ins1),葡萄糖转运体2(Glut-2)、L型丙酮酸激酶(L-PK)和醛缩酶B(Aldolase B)表达上调,而葡萄糖激酶(GCK)无表达。RT-PCR方法进一步验证,Hnf1α及Hnf4α在E18.5特异表达,至初生时,Hnf1α表达下调,Hnf4α无表达,GCK明显表达。结论Hnf1α及Hnf4α及其下游基因在大鼠胚胎胰腺发育后期出现高表达。
- 陶正贤仲燕周锦勇滕丽萍德伟袁栎
- 关键词:胰腺胚胎发育基因芯片
- Paxillin在大鼠胰腺不同发育阶段的表达
- 2007年
- 目的:探讨与胰岛形成和功能完善相关的基因在大鼠胰腺发育不同阶段的表达趋势.方法:采用高密度寡核苷酸芯片对孕12.5d(E12.5),E15.5,E18.5,新生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析,并用RT-PCR验证桩蛋白(pxn)和actopaxin在不同发育时期的表达情况.结果:与细胞迁移、聚集黏附相关的基因77.8%在胚胎18.5d高表达,22.2%在新生期高表达;整合素和激酶(ILK)在胚胎18.5d表达量最高,pxn和actopaxin在胚胎15.5d表达量达到高峰;成熟胰腺特异性基因多从胚胎18.5d开始出现明显高表达,调节胰腺细胞分化的相关转录因子表达量多从胚胎18.5d开始下降.结论:Pxn在胚胎发育中后期的高表达可能与胰岛形成及功能完善有关.
- 郭静滕丽萍刘莉洁程梅蔺扬波德伟
- 关键词:桩蛋白逆转录聚合酶链反应基因芯片
- 大鼠不同发育时期胰腺相关蛋白的差异表达被引量:7
- 2004年
- 探讨大鼠胰腺不同发育时期相关蛋白的差异表达 ,应用显微技术分离了大鼠孕 15 5天 ,孕 18 5天胚胎胰腺和新生鼠及成年鼠的胰腺 ,提取其蛋白质后 ,用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱分析等蛋白质组学方法 ,得到了 4个不同发育时期的蛋白质表达谱 .对其中的 6个在孕 18 5天胚胎胰腺中有高丰度表达 ,而在成年鼠胰腺中缺失的蛋白质点 ,4个在成年胰腺中特异表达的蛋白质点 ,8个在成年胰腺中表达明显下调的蛋白质点和 1个在成年中表达上调的点 ,进行了肽质量指纹分析和蛋白质鉴定 ,共获得 18个点的肽质量指纹图 .经BIOWORK等软件搜索大鼠非冗余蛋白质数据库来鉴定其身份 ,发现其中 7个点为大鼠甲胎蛋白 (AFP)、 5个点为胰脂酶相关蛋白 1前体、 1个点为微管蛋白 β、 2个点为蛋白二硫异构酶、 1个为FLN2 9基因产物的类似物、 1个为胰蛋白酶V A前体、 1个为过氧化物氧化还原酶 4 .其中AFP为特异表达于大鼠胚胎期及新生期胰腺的蛋白质 ,在孕 18 5天的胰腺中表达量最高 ,在成年胰腺中极低表达 .
- 周锦勇胡静静仲燕刘超柴伟栋袁栎滕丽萍德伟
- Mesothelin和Wnt-5a在大鼠胚胎胰岛形成中的表达
- 运用高密度寡和苷酸芯片建立大鼠胰腺发育不同阶段/(胚胎/(E/)12.5,E15.5,E18.5,新生和成年/)的基因表达谱,经过生物信息学数据分析发现许多与胰腺功能相关的基因在E18.5相对高表达,提示胚胎发育后期胰腺...
- 滕丽萍
- 关键词:MESOTHELINWNT-5A胰岛实时荧光定量PCR
- 文献传递
- BTG2基因在大鼠胚胎胰腺不同发育阶段的表达
- 2005年
- 利用高密度寡核苷酸芯片技术对大鼠胚胎胰腺发育中晚期(E12.5,E18.5,E15.5)调节内外分泌部细胞发育分化及功能代谢的基因的表达趋势进行研究。并用RT-PCR进行验证。用获得的基因信息对:NCBI等公共数据库进行检索,结果发现对细胞的分化、增殖和凋亡起调节作用的BTG2基因在大鼠胚胎胰腺E12.5、E15.5、E18.5天及成年、新生大鼠胰腺中均有表达,且E18.5天的表达量高于其他时期5倍多。推测BTG2可能在大鼠胚胎胰腺内外分泌细胞分化发育的不同阶段起到了促进作用,并参与胚胎胰腺发育晚期的功能代谢完善过程。
- 胡静静滕丽萍袁庆新袁栎周锦勇仲燕刘莉洁德伟
- 关键词:胚胎公共数据库发育分化NCBI分化发育分泌细胞
- 大鼠胰腺发育过程中胰岛素释放功能完善的研究被引量:3
- 2010年
- 目的:明确大鼠胰腺发育不同时期胰岛素合成及释放相关基因的表达差异,探讨胰岛素分泌功能完善的过程。方法:分离并提取SD大鼠胚胎发育12.5天(E12.5)、E15.5、E18.5、新生、出生后21天及成年大鼠胰腺组织,利用Affymetrix公司的高密度寡核苷酸芯片检测大鼠发育各阶段胰腺组织基因表达谱并分析胰岛素合成及释放相关基因的特异及差异表达情况。分别进行正常新生鼠、成年鼠血糖水平及正常新生第1、3、7、10、12天大鼠腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)。采用ELISA法测定新生鼠和成年鼠血中胰岛素浓度。新生大鼠胰岛细胞原代培养观察新生鼠胰岛细胞的形态。结果:在胰岛素合成及释放相关基因中,胰岛素基因及其特异性转录因子如PDX-1在大鼠E12.5~E15.5时即开始有表达,以后胰岛素基因持续存在且表达增多;胰岛素胞吐过程中的关键基因Syntaxin-1a、Vamp-2、Rab-3a、Munc13-1等从E15.5开始出现,以后表达量亦增多;而葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)相关基因中,葡萄糖转运体-2(Glut2)在胚胎早期开始表达,葡萄糖激酶(GCK)在胚胎中晚期才表达。自E18.5即检测到大鼠血中胰岛素的存在,随着胚胎的发育,血胰岛素浓度逐渐升高。新生大鼠对葡萄糖负荷不能耐受,出现IPGTT异常,出生1周以后IPGTT才逐渐趋于正常。新生鼠的胰岛形态与成年鼠相似,但体积相对较小,透亮度稍差。结论:大鼠胚胎胰腺发育早中期即已具备胰岛素合成及分泌的能力,但新生鼠刚出生时,其胰岛功能仍尚未完善,出生以后才逐渐对葡萄糖负荷有良好的反应性。
- 袁庆新滕丽萍徐宽枫德伟刘超
- 关键词:胰岛素释放基因表达糖尿病
- 大鼠胚胎胰腺发育后期基因表达谱的研究被引量:5
- 2005年
- 目的:研究大鼠胚胎发育至第15.5和18.5天胰腺基因表达谱,探讨特异性基因表达在正常内外分泌胰腺发育及糖尿病中所起的作用。方法:①实验于2003-09/2004-06在南京医科大学生化与分子生物学实验室完成。选用SD大鼠,雌雄各10只,将雌雄鼠按1∶2合笼,分别于胚胎发育至第15.5和18.5天,剖腹取出孕子宫,分离胚胎。②应用显微分离及提取技术获得胚胎发育不同阶段胰腺组织并提取RNA,采用高密度寡核苷酸芯片(Affemetrix芯片)对胚胎发育至第15.5天和第18.5胚胎胰腺进行基因转录水平分析,用生物信息学方法分析具体基因的表达情况。结果:胚胎发育至第18.5天与胚胎发育至第15.5天相比,差异表达2倍以上的基因共1319条。其中表达上升的基因664条,表达下降的基因655条,功能已知基因占63%,表达序列标识占37%。控制胰腺细胞分化的转录因子明显下调,与功能代谢相关的转录因子有上升趋势,内外分泌酶类、激素类表达有上升趋势,骨架蛋白有下降趋势,与激素、酶类分泌相关的因子基本无表达。结论:大鼠胚胎胰腺发育至第15.5~18.5天,内分泌典型胰岛结构及外分泌腺泡、导管结构已基本形成,功能细胞分化基因表达下降,而细胞代谢调节功能基因表达上升,因此,在大鼠胚胎发育至第15.5天胰腺,功能细胞的代谢调节功能开始完善。
- 袁庆新仲燕刘超刘翠萍袁栎周锦勇滕丽萍胡静静德伟
- 关键词:胰腺胎儿发育寡核苷酸序列分析基因表达
- 转录因子T-bet/GATA-3在哮喘大鼠中失衡表达及地塞米松的调节作用
- 2008年
- 目的观察T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘中失衡表达,探讨地塞米松对其调节作用。方法36只雄性SPF级SD大鼠随机分为对照组(C组)、哮喘组(A组)和地塞米松组(D组)。苏木精-伊红染色观察气道病理改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中IL-4、IL-5、IFN-γ含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Westernblot)测定法分别检测肺组织T-bet和GATA-3mRNA和蛋白表达。结果肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞、管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)A组比C组明显增多或增厚(P<0.01),D组明显低于A组(P<0.01);血清中IL-4和IL-5含量,A组高于C组(P<0.01),D组低于A组(P<0.01),IFN-γ含量A组和D组均低于C组(P<0.01);肺组织中T-betmRNA和蛋白表达A组明显低于C组(P<0.01),D组明显低于C组(P<0.01);肺组织中GATA-3mRNA和蛋白表达A组高于C组(P<0.01),D组与C组和A组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论转录因子T-bet/GATA-3在哮喘中失衡表达,地塞米松明显抑制转录因子T-bet表达,但对GATA-3表达无明显影响,其抑制哮喘的气道炎症并非通过调节转录因子T-bet和GATA-3的平衡实现。
- 卞涛陆国础殷凯生金淑贤周锦勇德伟滕丽萍
- 关键词:哮喘转录因子T淋巴细胞地塞米松