汪江波
- 作品数:6 被引量:11H指数:3
- 供职机构:广西壮族自治区南溪山医院更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区卫生厅资助项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 巨噬细胞源性泡沫细胞适配子PM1的特异性
- 目的:研究特异性寡核苷酸适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变结合的特异性,为动脉粥样硬化的体内靶向治疗提供实验依据。方法:对适配子PM1进行FITC标记,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞...
- 严鹏科汪江波张慧段才闻李世煌
- 关键词:适配子特异性巨噬细胞源性泡沫细胞动脉粥样硬化病变
- SELEX技术筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌适配子的研究被引量:3
- 2013年
- 目的利用指数富集的配体进化技术(SELEX)筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的适配子,并研究适配子AM6与MRSA结合的特异性,为研发MRSA的特异性诊断试剂和靶向治疗药物打下基础。方法体外构建81个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库;通过反复的SELEX筛选获得MRSA的适配子并进行一级结构分析;利用荧光显微镜和PCR扩增法鉴定AM6与MRSA结合的特异性。结果经过20轮环筛选,获得了25个与预期大小相同的ssDNA序列,它们之间没有共同的保守序列;AM6仅与MRSA结合,而不与甲氧西林敏感葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)、甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSSCN)、大肠埃希菌结合。结论利用SELEX技术成功地筛选出MRSA的适配子,其中适配子AM6能特异性结合MRSA。
- 汪江波李赞东赵延斌侯德凤廖玲李艳红毛伟丽
- 关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌适配子
- 泡沫细胞寡核苷酸适配子PM2的特异性研究被引量:2
- 2011年
- 目的研究寡核苷酸适配子对动脉粥样硬化病变组织结合的特异性。方法将前期研究获得的特异性适配子命名为PM2,FITC标记后,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、巨噬细胞源性泡沫细胞结合情况。采用高脂方法建立兔的动脉粥样硬化模型。利用PCR方法和荧光显微镜观察适配子与动脉粥样硬化病变结合情况。结果 PM2适配子与巨噬细胞源性泡沫细胞高度特异性结合,但不与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞结合;PM2适配子能特异性结合动脉粥样硬化斑块组织,而不结合正常动脉组织结合。结论筛选出的PM2适配子特异性结合巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变。
- 林广庆严鹏科汪江波张慧段才闻李世煌
- 关键词:SELEX特异性巨噬细胞源性泡沫细胞动脉粥样硬化病变
- Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子的初步研究被引量:4
- 2012年
- 目的利用Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子。方法通过80mg/L氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素-链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细胞和血管平滑肌细胞为反筛细胞,利用Cell SELEX技术筛选与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的寡核苷酸序列,并对最后一轮筛选结果进行克隆测序。结果 PCR的退火温度对PCR产物的量有显著的影响,退火温度由65℃提高为72℃时的产物量明显增加。利用生物素-链霉亲和素磁珠分离法获得了纯度高、产量大的ssDNA文库;经过18轮筛选后,成功获得了28个与预期大小相同的ssDNA序列。结论利用Cell SELEX技术筛选出了巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子,为研发用于动脉粥样硬化的早期无创诊断试剂和靶向治疗药物奠定了基础。
- 汪江波李艳红严鹏科
- 关键词:CELLSELEX技术巨噬细胞源性泡沫细胞适配子
- 泡沫细胞靶向适配子的体外筛选
- 目的:筛选巨噬细胞源性泡沫细胞的寡核苷酸适配子,为动脉粥样硬化的靶向治疗提供实验依据。方法 以80mg/L ox-LDL孵育THP-1巨噬细胞72小时,建立泡沫细胞模型;利用指数富集配基的系统进化技术,从体外合成的随机单...
- 严鹏科汪江波张慧段才闻李世煌
- 关键词:巨噬细胞源性泡沫细胞
- 动脉粥样硬化靶向适配子的亲和力筛选被引量:3
- 2015年
- 目的:筛选动脉粥样硬化高亲和力适配子,为动脉粥样硬化靶向引导物的体内应用提供实验基础。方法将前期研究获得的一组巨噬细胞源性泡沫细胞适配子中的12个适配子进行生物素标记,采用酶联寡聚核苷酸吸附试验(ELONA)方法测定其亲和力(Kd),采用高脂方法建立载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)动脉粥样硬化模型,将亲合力最高的适配子Cy5进行荧光标记,激光共聚焦显微镜下观察其与动脉粥样硬化病变组织的结合能力。结果12个巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子均具有较好的亲和力,解离平衡常数(Kd值)范围在4.33-39.58 nmol/L之间,其中9号适配子(Apt9)的亲和力最高,Kd值为(4.33±0.33)nmol/L,体内亲和力检测发现Apt9能特异性结合ApoE-/-动脉粥样硬化血管斑块病变组织。结论筛选的Apt9适配子能与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变血管组织特异性结合,可以用于进一步的体内研究。
- 钟文飞汪江波吴仲洪胡华钟朱秋连林彩燕严鹏科
- 关键词:巨噬细胞源性泡沫细胞适配子动脉粥样硬化