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新型人转录因子hBKLF对K562细胞增殖、分化及血红蛋白合成作用的研究被引量：1: 2006年; 孕22周的胎肝是胎儿的主要造血器官,其中含有大量与造血相关的调控因子。人碱性Krüppel样因子(humanbasicKrüppel-likefactor,hBKLF)是本研究室从这一时期胎肝cDNA文库中新克隆的转录因子。对其C端的结构分析发现,它含有3个特征性C2H2锌指结构,因此属于KLF转录因子家族。前期的表达谱研究工作显示,hBKLF在成人外周血白细胞、骨髓和胎肝中表达量高,在红系中有表达,这提示它可能与造血相关。本研究以K562细胞为模型,研究hBKLF与造血细胞增殖、分化及血红蛋白合成的关系。构建hBKLF正义及反义真核表达载体,转染K562细胞,经G418筛选4周,得到稳定细胞株;用RT-PCR、Westernblot方法测定转染后K562细胞hBKLF表达水平的变化;以转染空质粒的K562细胞为对照组,在显微镜下直接观察转染正义质粒和反义质粒的两组细胞形态的改变;用MTT法比较增殖速率的变化;用甲基纤维素半固体培养法比较集落形成率的差别;用苯息丁法观察氯高铁血红素(hemin)诱导K562细胞分化后血红蛋白合成水平的差异。结果表明正义质粒和反义质粒经NcoI酶切鉴定构建正确。转染正义质粒的K562细胞(正义组)中hBKLF的mRNA及蛋白质表达水平增加,转染反义质粒的K562细胞(反义组)中hBKLF的mRNA水平降低。增殖活性在反义组、正义组、对照组分别为1.335±0.022、1.067±0.010、1.118±0.014,反义组K562细胞的增殖速率加快,正义组细胞增殖速率减慢(P<0.001)。细胞形态在各组间无明显区别。集落形成率在反义组、正义组、对照组分别为148±13、136±10、141±10,各组间无显著差异(P>0.05)。3组细胞血红蛋白合成水平在hemin诱导后均升高,诱导后血红蛋白升高倍数在对照组、反义组、正义组分别为9.064±1.637、14.360±2.185、4.820±0.404,反义组K562细胞合成血红蛋白能力增加,正义组合成血红蛋白能力下降(P<0.05)。结论hBKLF可以抑制K562细胞的增�; 王茫桔马晓芸石永进武淑兰贺福初; 关键词：血红蛋白 K562 细胞增殖细胞分化

小檗胺逆转MCF7/ADR细胞耐药性的研究: 目的钙调素拮抗剂小檗胺(Berbamine,BBM)是一种具有升高白细胞、抗肿瘤等多种药理作用的双苄基异喹啉类生物碱,目前作为升白细胞药物广泛用于临床,鉴于其对血管平滑肌细胞内游离钙的影响与维拉帕米相似,本文以阿霉素耐药...; 石永进韩艳秋武淑兰; 文献传递

“金龙胶囊”抑制HL-60细胞生长并诱导细胞凋亡被引量：13: 2002年; 目的:研究中药金龙胶囊冻干粉(Jin Long Capsules,简称JLC)对人白血病细胞的作用及其机制。方法:应用台盼兰拒染法观察0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.04mg/ml JLC对HL-60细胞的抑制作用,光镜及透射电镜观察细胞结构变化,DNA电泳、流式细胞术等检测细胞凋亡。结果:1.JLC可抑制HL-60细胞的生长,这种作用呈剂量和时间依赖性;2.JLC作用后细胞出现典型的凋亡形态学改变,DNA片段化,流式细胞仪可检出亚G_1期细胞;3.JLC作用后细胞阻滞于G_0/G_1期,S期细胞减少。结论:金龙胶囊冻干粉对白血病细胞有诱导凋亡作用,主要作用于S期。; 赵冬梅石永进关大创曹香红刘素宾武淑兰; 关键词：HL-60 金龙胶囊细胞凋亡中药

三氧化二砷诱导U266骨髓瘤细胞p16基因重新表达: 目的探讨三氧化二砷(AsO)通过干扰DNA甲基化诱导U266骨髓瘤细胞抑癌基因p16重新表达的可能性,以进一步阐明AsO的抗肿瘤作用机制。方法体外培养骨髓瘤细胞系U266,加入终浓度分别为0.5μM/L、1.0μM/L和...; 黎金庆李渊武淑兰; 文献传递

人类基因组DNA单核苷酸多态性的检测方法被引量：3: 2002年; 单核苷酸多态性 (SNP)作为新的遗传标记对基因定位及相关疾病的研究意义重大。本文对近年来 9种SNP检测方法的原理、应用及优缺点 ,包括基于 FRET原理的 Taqman法和分子灯塔法 ;基于分子杂交技术的寡核苷酸连接分析、等位基因特异性寡核苷酸探针杂交法、动态等位基因特异性杂交法及 DNA芯片法 ;及质谱法。; 李渊武淑兰; 关键词：单核苷酸多态性基因检测方法分子杂交分子探针基因芯片人类基因组

小檗胺下调MCF7及MCF7/ADR细胞Suivivin表达被引量：1: 2005年; 目的探讨钙调蛋白拮抗剂小檗胺(BBM)下调抗凋亡基因Survivin表达的可能性。方法采用人乳腺癌细胞MCF7及其耐阿霉素(ADR)MCF7/ADR细胞与不同浓度BBM培养72h后,采用半定量RT-PCR法检测SurvivinmRNA表达。结果20μmol/LBBM使MCF7和MCF7/ADR细胞SurvivinmRNA表达分别由0.43±0.02下降至0.21±0.04和0.57±0.05下降至0.45±0.04(P值均<0.01)。结论BBM可下调MCF7和MCF7/ADR细胞SurvivinmRNA表达。; 韩艳秋武淑兰; 关键词：小檗胺下调人乳腺癌细胞 PCR法检测抗凋亡基因耐阿霉素

小檗胺逆转MCF7/ADR细胞耐药性及其机制探讨被引量：5: 2004年; 目的　探讨钙调素拮抗剂小檗胺 (BBM)逆转多药耐药的可能性及其机制。　方法　乳腺癌细胞MCF7及其耐阿霉素 (ADR)MCF7 ADR细胞与ADR及不同浓度BBM共培养 ,经四唑盐 (MTT)比色法计算半数抑制浓度 (IC50 )、耐药倍数和增敏倍数 ;流式细胞仪检测细胞内ADR相对含量和P糖蛋白 (P gp)表达水平 ;半定量RT PCR检测mdr1基因mRNA表达。　结果　ADR对MCF7和MCF7 ADR的IC50 分别为 (0 98± 0 0 6 ) μmol L和 (10 1 2 0±5 72 ) μmol L ;MCF7 ADR对ADR的耐药倍数为 10 3。MCF7 ADR细胞 5 μmol L、10 μmol L和 2 0 μmol LBBM时对ADR呈剂量依赖性增敏作用 ,增敏倍数分别为 2 76、5 88和 2 8 2 6倍 (均P值 <0 0 1)。用 10 μmol 或 2 0 μmol LBBM处理MCF7 ADR细胞 2h ,细胞内的ADR相对含量增加 2 4 9和 2 81倍 (P <0 0 1) ;处理 72h使P gp表达分别下降10 0 9%和 6 2 82 % (均P值 <0 0 1) ,且mdr1基因mRNA相对表达值也呈下调趋势。　结论　BBM提高耐药细胞MCF7 ADR胞内的ADR浓度 ,下调mdr1基因及P gp的表达 ,使其对ADR的敏感性显著增高。; 韩艳秋石永进袁家颖朱燕武淑兰; 关键词：小檗胺逆转耐药性 P糖蛋白 MDRL基因

急性白血病/骨髓增生异常综合征患者DNA甲基转移酶亚型的表达: ＜正＞目的探讨人类DNA甲基转移酶（DNMT）亚型与急性白血病（AL）发病及骨髓增生异常综合征（MDS）向AL转化的关系。方法本文采用RT—PCR技术,对75例急性白血病/MDS患者的DNMT1、3A及3B的mRNA表...; 李渊武淑兰卜定方朱燕朱强曹香红; 文献传递

急性白血病/骨髓增生异常综合征患者DNA甲基转移酶亚型的表达被引量：2: 2003年; 目的　探讨DNA甲基转移酶 (DNMTs)亚型与急性白血病 (AL)发病及骨髓增生异常综合征 (MDS)向AL转化的关系。方法　半定量逆转录 (RT) PCR技术测定 75例AL/MDS患者的DNMT1、3A及 3B的mRNA表达水平。结果　低危MDS组 (2 1例 )DNMT各亚型的表达升高与正常对照组平均值无统计学差异 ,但以正常对照组平均值的 80 %单侧上界为界 ,则分别为 4 7 6 %、4 7 6 %和 4 2 9% ,高于正常对照 (P <0 0 1)。高危MDS组 (13例 )分别为 5 3 8%、76 9%和 92 3%高于正常对照 (P <0 0 1) ,其中DNMT 3B表达显著高于低危MDS组 (P <0 0 1) ,而DNMT1和 3A表达与低危组差异无显著性。AL组 (41例 )DNMT1、3A及 3B分别为 92 7%、97 6 %和 10 0 %高于正常对照 (P <0 0 1) ,且三种DNMT亚型表达水平均显著高于MDS组 (P <0 0 1)。急性淋巴细胞白血病组DNMT1表达显著高于急性髓细胞白血病组 (P <0 0 1) ,而二组的DNMT3A ,3B表达无统计学差异。结论　DNMTs表达水平的增高与AL的发病及MDS向AL转化过程密切相关 ,并以DNMT3B的关系最为密切。; 李渊武淑兰卜定方朱燕朱强曹香红; 关键词：急性白血病骨髓增生异常综合征 DNA甲基转移酶 RT-PCR 琼脂糖凝胶电泳

中国人22例Castleman病的临床特点分析(英文)被引量：4: 2004年; 目的　Castleman病是一种少见的慢性淋巴组织增生性疾病 ,分析 2 2例确诊的Castleman病的临床特点 ,对其分类提出新见解。方法　采用病历回顾性分析方法。结果　局灶性Castleman病 12例 ,4例有干咳、腹痛等症状 ,病理均为透明血管型 (HV) ,手术切除预后好。单一部位肿物合并粘膜皮肤水疱和溃疡 6例 ,HV型 5例 ,混合型 (Mix) 1例 ,其中 5例出现呼吸困难 ,严重低氧血症 ,肺功能为严重阻塞性通气功能障碍 ,胸片双肺过度充气 ,CT可见弥漫性支气管扩张 ,临床符合闭塞性细支气管炎 ,治疗效果差。多中心性Castleman病 4例 ,浆细胞型 (PC) 3例 ,Mix型 1例。均有发热 ,3例浮肿、贫血、血沉加快和γ球蛋白增高 ,2例有肾功能不全 ,1例甲状腺功能减退 ,1例四肢远端神经病变 ,性激素水平异常 ,乳腺增生 ,诊断POEMS综合怔 ,予糖皮质激素、化疗等治疗 ,2例缓解 ,2例效果差 ,随访 3例患者死亡。结论　Castleman病临床病变多样 ,应重视皮肤黏膜型Castleman病。此型与多中心性Castleman均治疗困难。; 李楠王仁贵王广发武淑兰; 关键词：CASTLEMAN病闭塞性细支气管炎副肿瘤性天疱疮

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武淑兰

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