梁红
- 作品数:9 被引量:3H指数:1
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人白细胞介素3突变体的构建及其在大肠杆菌中表达的研究
- 1997年
- 人白细胞介素3(IL-3)是与造血有关的细胞因子,可直接诱导人骨髓和外周血干细胞的集落形成和增殖。IL-3可通过高亲合力的结合位点对成熟骨髓效应细胞(巨噬细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞)发挥作用,可促进巨噬细胞、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞的活力,延长存活期并抑制其死亡。rhIL-3还可提高巨噬细胞和嗜酸性细胞的细胞毒、杀菌以及杀癌细胞的能力。IL-3以非融合型蛋白难于在大肠杆菌中高效表达。本室应用遗传工程技术构建了pBV220
- 王燕刘昕万瑛易绍萱纪贤文梁红毛琼国朱锡华
- 关键词:大肠杆菌中表达突变体嗜酸性细胞分子生物起始密码子
- 人X染色体单拷贝序列的分离及鉴定的研究被引量:1
- 1993年
- 本研究以人/鼠(CHO-K1)细胞总DNA为探针对人X染色体DNA文库进行了3轮筛选,单拷贝顺序的检出率为1.45%。其中DXFD52,71,73,75分别与一组含人X染色体及不含人X染色体的人/鼠杂种细胞DNA进行Southern杂交分析,确定DXFD52,71,73,75含人X染色体专性DNA顺序。采用染色体原位杂交的方法,将DXFD52精确定位于Xq12-q13。并对其进行了部分DNA顺序分析,结果证实DXFD52是人基因组中至今未被分离到的一个单拷贝DNA片段。继而对DXFD52进行限制性酶切图谱分析,并以其为探针在中国重庆地区正常人群中(随机个体38例、3个正常家系成员11例)进行了RFLP研究,发现该探针具有识别Hind Ⅲ,Bgl Ⅱ,Hinf Ⅰ的RFLP。
- 谭骏朱锡华纪贤文梁红陈小义王燕邱信芳薛京伦秦世真张冬梅
- 关键词:DNAX染色体
- 一例罕见的X;15平衡易位合并原发性闭经
- 1987年
- 国内有关X与常染色体平衡易位的核型时有报道,作者发现一例原发性闭经病人核型为46,X,t(X;15)(q21;q23),鉴于与以前的报道有所不同,特报告如下。病例摘要患者,女性,26岁,因原发性闭经来我室遗传咨询。患者为第2胎足月顺产,出生体重3450g。
- 计雪文陈小义梁红谭骏蒋文平
- 关键词:原发性闭经染色体核型平衡易位X
- 促红细胞生成素在酿酒酵母中的表达
- 1997年
- 促红细胞生成素(EPO)是一种特异刺激红系祖细胞向功能成熟的红细胞增殖分化的造血生长因子。重组人EPO(rhEPO)应用于临床治疗多种红细胞减少症取得了确切疗效。 酿酒酵母是迄今研究最为深入的真核生物之一,其遗传背景清楚,由此衍生的各种载体宿主菌表达系统较大肠杆菌载体宿主表达系统有更完备的基因表达调控机制和对表达产物的加工修饰及分泌能力;
- 易绍萱吴军刘昕王燕纪贤文梁红
- 关键词:酿酒酵母生成素分子生物细胞增殖分化
- 人凝血因子Ⅷ基因cDNA的部分分离的初步研究
- 1991年
- 我们用血友病FⅧ基因探针P114.12从人肝细胞cDNA文库中分离到3个有杂交信号的克隆。进一步鉴定,其中1个(FⅧhc_1)的克隆片段比所用的探针P114.12(0.65kb)增大0.45kb。通过FⅧhc_1部分顺序分析及微机搜索,FⅧhc_1有210bp与FⅧcDNA(5559-5769)完全同源,提示FⅧhc_1从FⅧ基因cDNA17号外显子向下游延伸了800~900bp。
- 谭骏邱信芳梁红薛京伦
- 关键词:血友病CDNA克隆
- 人TNFRI cDNA的克隆及酵母表达载体的构建
- 2004年
- 代佳平毛琼国王燕梁红刘昕
- 关键词:RT-PCR
- 银染单链构象多态性技术检测人IL-3基因突变
- 2001年
- 目的 对人白细胞介素 3(hIL 3)基因突变体进行分析和进一步鉴定 ,建立一种灵敏、快捷的检测基因突变和DNA多态性的方法 即银染单链构象多态性技术 (Singlestrandconformationpolymorphism ,SSCP)。方法 将野生型和突变型的人白介素 3(hIL 3)cDNA连接到PUC9和PUC19质粒载体上 ,转化入大肠杆菌 ,扩增质粒 ,用常规方法抽提 ,酶切 ,然后将酶切后的DNA片段进行PAGE胶电泳 ,银染检测野生型和突变型的异同。结果 以野生型hIL 3cDNA作为对照 ,连接到PUC9和PUC19上的电泳结果均为一致 ,突变型hIL 3cDNA的电泳带明显比野生型的电泳带靠后。结论 SSCP方法具有简便 ,快捷较灵敏的特点 ,对人白细胞介素 3(hIL 3)基因的点突变得到进一步的鉴定。
- 毛琼国刘昕王燕梁红
- 关键词:单链构象多态性基因突变基因诊断
- 小鼠IL-3 cDNA转化细胞移植体内表达的初步研究被引量:2
- 1996年
- 随着基因治疗技术的发展和多个细胞因子基因的克隆,人们提出了供细胞因子的基因治疗的设想,以期为肿瘤、老年性痴呆、严重的造血功能障碍等这样一类难治疾病的治疗另辟蹊径。为改善放射损伤小鼠受抑制的造血功能,我们采用基因治疗的方法,将小鼠IL-3基因cDNA与逆转录病毒载体重组,转染包装细胞PA317,用其分泌的含IL-3cDNA的复制缺陷逆转录病毒感染、转化NIH3T3细胞,从中筛选可在体外分泌IL-3的克隆,将可分泌IL-3的细胞种植到放射损伤小鼠体内后发现:受体小鼠血清中检出了IL-3的活性;其外周血白细胞计数升至55万/mm3,以成熟中性粒细胞为主;肝、脾脏内有大量各个分化阶段的中性粒细胞。这些结果表明:可以利用基因治疗技术,在体内表达IL-3,改善机体的造血功能。
- 刘昕朱锡华谭骏毛琼国纪贤文梁红
- 关键词:基因治疗IL-3CDNA
- PCR技术对人IL-3 cDNA进行定点突变的研究
- 1996年
- 本文利用PCR技术对人IL-3cDNA体外进行定点突变,将人IL-3cDNA第3位Met,第116位Lys密码子突变为Val密码子GTT。PCR扩增片段核苷酸序列与引物设计相应的cDNA突变体序列完全一致。结果证实此方法比经典寡聚核苷酸方法简单、迅速、成本低、效率高,也为基因的修饰,蛋白质工程研究提供了简便、稳定的方法。
- 王燕刘昕万瑛易绍瑄梁红毛琼国朱锡华
- 关键词:基因修饰