杨柯柯
- 作品数：16 被引量：45H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- PinX1基因对鼻咽癌细胞顺铂化疗敏感性的影响及其机制被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨PinX1基因对鼻咽癌细胞顺铂化疗敏感性的影响及其机制.方法 采用慢病毒构建的pCDH-CMV-PinX1-copGFP质粒载体转染鼻咽癌细胞,构建含PinX1基因载体的鼻咽癌Lenti-PinX1-5-8F细胞,同时构建Lenti-Ctrl-5-8F细胞（将不含PinX1基因的空载体转染5-8F细胞获得）及5-8F细胞作对照.将上述鼻咽癌细胞依实验分为4组：实验组为Lenti-PinX1-5-8F细胞＋顺铂组（含PinX1基因的Lenti-PinX1-5-8F细胞中加入顺铂药物）,对照组为Lenti-PinX1-5-8F细胞组（含PinX1基因）、顺铂药物组（5-8F细胞中加入顺铂）及5-8F细胞组.分别采用荧光定量PCR、流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、小室技术、Western印迹法及药物敏感试验检测PinX1基因表达、端粒酶活性、鼻咽癌增殖抑制、与顺铂抗癌的协同作用及肺耐药相关蛋白（LRP）及B细胞淋巴瘤基因-2（Bcl-2）基因的表达,观察PinX1基因在鼻咽癌细胞中对顺铂化疗敏感性的影响及其机制.结果 Lenti-PinX1-5-8F细胞中端粒酶活性相对量均显著低于Lenti-Ctrl-5-8F细胞、5-8F细胞（0.146±0.004比0.967 ±0.016、1.000±0.034,均P＜0.01）.16 μg/ml的顺铂与PinX1基因联合能显著增强端粒酶活性下调后对鼻咽癌细胞的抑制作用.Lenti-PinX1-5-8F细胞＋顺铂组的细胞增殖指数均显著低于Lenti-PinX1-5-8F细胞组、顺铂药物组、5-8F细胞组[（14.39±3.66）％比（32.97±3.00）％、（31.18±4.24）％、（47.19±4.19）％,均P＜0.01].Lenti-PinX1-5-8F细胞中LRP、Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.64±0.14、0.57 ±0.12,均显著低于Lenti-Ctrl-5-8F细胞的0.84±0.19、0.81±0.16和5-8F细胞的0.83±0.35、0.78±0.27（均P＜0.01）.结论 PinX1基因能增强顺铂对鼻咽癌细胞的化疗敏感性,其作用有可能是通过下调鼻咽癌细胞端粒酶活性、抑制Bcl-2和LRP基因而实现的.
- 申聪香刘艳慧文忠杨柯柯李冠雪张沈华张鑫雨
- 关键词：鼻咽肿瘤化疗端粒酶
- 鼻内镜术后囊泡形态学变化及其对鼻腔预后转归影响的临床观察研究
- 目的探讨慢性鼻窦炎(伴或不伴鼻息肉)鼻内镜术后术腔囊泡形成过程、形态学变化规律对鼻腔术后黏膜愈合转归过程的影响,为缩短术后恢复时间提供理论依据。方法1对象按照慢性鼻窦炎、鼻息肉诊断和治愈标准(2007 EPOS),纳入慢...
- 文忠王军旗申聪香于超生赖肖芬王海丽钟品能杨柯柯
- 文献传递
- 脂肪来源间充质干细胞(ADSC)调控变应性鼻炎模型鼠T细胞免疫状态的研究
- 目的 探讨体外分离培养小鼠ADSC,并在构建变应性鼻炎模型鼠的基础上进一步探讨ADSC对模型鼠辅助性T细胞、Treg细胞的调节作用及其机制.方法 采用胶原酶消化联合贴壁筛选法分离提取小鼠ADSC;OVA联合明矾构建变应性...
- 文忠申聪香李冠雪张沈华杨柯柯
- PinX1基因联合顺铂调控鼻咽癌细胞端粒酶活性、抑制增殖迁移的实验研究
- 研究背景 鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma NPC)是我国南方地区高发的一种恶性肿瘤(发病率每年在10-150/1001000),也是头颈部常见的恶性肿瘤之一,治疗上以放疗或辅助诱导化疗加放疗为主...
- 杨柯柯
- 关键词：鼻咽癌肿瘤多药耐药抗凋亡基因BCL-2
- 文献传递
- NLRs模式识别受体在变应性鼻炎患者鼻粘膜中的表达和意义
- 目的 探讨NLRs样模式识别受体(PRR) Nod1、Nod2、Nalp3在变应性鼻炎患者鼻粘膜中的作用及意义.方法 分别采用Real-Time RT-PCR、免疫组织化学及western-blot检测Nod1、Nod2...
- 文忠张沈华申聪香李冠雪杨柯柯史欣
- Lenti-TK介导间充质干细胞对鼻咽癌CD133^+干细胞的靶向迁移及杀伤作用被引量：2
- 2013年
- 目的:观察慢病毒-胸苷激酶(lentivirus-thymidine kinase,Lenti-TK)/间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对鼻咽癌CD133+干细胞的靶向迁移及杀伤作用。方法:构建包含TK基因的重组慢病毒表达载体Lenti-TK,感染MSC后得到Lenti-TK-MSC,RT-PCR及Western blotting检测Lenti-TK-MSC中HA-TK的表达。免疫磁珠法从鼻咽癌5-8F细胞中分选CD133+细胞;Transwell小室迁移实验检测Lenti-TK-MSC对CD133+5-8F细胞的趋向性;Lenti-TK-MSC联合更昔洛韦(ganciclovir,Lenti-TK-MSC/GCV)与CD133+5-8F细胞共培养,CCK-8试剂盒检测其对细胞的杀伤作用和旁观者效应。结果:成功构建重组慢病毒载体Lenti-TK,其滴度为1×108UT/ml,Lenti-TK(MOI=50)感染MSC 72 h时,感染效率达(95.1±0.1)%。Lenti-TK-MSC迁移至CD133+5-8F细胞组的细胞数明显多于CD133-5-8F细胞组、未分选5-8F细胞组[(83.0±8.7)vs(29.6±5.3)、(38.3±5.2),P=0.000]。Lenti-TK-MSC/GCV处理组与单独GCV处理组、Lenti-TK-MSC/GCV条件培养液(即Lenti-TK-MSC加入1 mg/L GCV培养48 h的培养上清)处理组相比,CD133+5-8F细胞的存活率明显降低[(37.2±2.3)%vs(98.5±3.1)%、(83.8±3.4)%,P=0.000]。Lenti-TK-MSC数量达到混合细胞总数(Lenti-TK-MSC和CD133+5-8F细胞)的20%时,CD133+5-8F细胞存活率为(68.2±2.3)%,表现出明显的旁观者杀伤效应。结论:Lenti-TK感染后MSC对鼻咽癌CD133+5-8F细胞具有靶向迁移及杀伤作用。
- 李冠雪申聪香文忠钟品能杨柯柯张沈华
- 关键词：鼻咽癌间充质干细胞旁观者效应
- 脂肪来源间充质干细胞调控变应性鼻炎小鼠T细胞免疫状态的研究被引量：12
- 2016年
- 目的 探讨脂肪来源间充质干细胞（adipose—derivedstemceils，ADSC）对变应性鼻炎（allergicrhinitis，AR）小鼠辅助性T细胞（Th）、调节性T细胞（Treg）的调节作用及其机制。方法取Balb／c小鼠60只，采用随机数字表法随机分为6组（分组表示为：致敏／激发／处理），分别为实验组1（OVA／OVA／高剂量ADSC）、实验组2（OVA／OVA／低剂量ADSC）、实验组3（0VA／OVA／磷酸盐缓冲液PBS）、实验组4（OVA／OVA／0）、对照组1（PBS／PBS／0）和对照组2（O／O／0）。常规分离提取小鼠ADSC，卵清蛋白（ovalbumin，OVA）联合氢氧化铝构建AR小鼠模型，尾静脉注射CM-Dil标记的ADSC（高剂量组：3×10^6；低剂量组：1×10^6）连续3d，48h后处死，酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测血清中自细胞介素（interleukin，IL）4、IL-6、IL-10和叮干扰素（Y interferon，IFN-y）的水平，反转录聚合酶链反应（reversetranscriptasepolymerasechainreaction，RT—PCR）检测脾脏中上述各细胞因子mRNA的表达，荧光显微镜下观察ADSC在AR模型鼠鼻黏膜中的迁移分布，鼻黏膜HE染色观察嗜酸粒细胞浸润情况。以SPSS13．0软件进行统计学处理。结果成功分离培养并鉴定小鼠ADSC。AR模型小鼠症状学评分与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组1与实验组4相比，血清IL4、IL-6水平下调[组1：（17．95±7．78）、（27．51±5．93）pg／ml；组4：（56．82±9．12）、（70．034-7．22）pg／m1]，IFN-1、IL-10水平上调[组1：（367．74±、13．79）、（417．10±72．40）p∥ml；组4：（199．464-11．25）、（122．50±15．57）pgZml]，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。实验组1与实验组2相比，血清IL-4、IL．6水平下调[组1：（17．95±7．78）、（27．51±5．93）pg／ml；组2：（41．57±12．27）、（56．21±9．23）pg／m1]，IFN-1、IL-10水平上调[组1�
- 李冠雪刘艳慧申聪香文忠张沈华杨柯柯
- 关键词：调节性T细胞
- 83例单螨及双螨过敏性鼻炎舌下特异性免疫治疗临床疗效分析
- 目的观察比较舌下特异性免疫治疗对单螨及双螨过敏的过敏性鼻炎的疗效分析。方法选择2009-2010年在我院门诊就诊的83例对尘螨过敏的过敏性鼻炎患者,诊断标准、评分及疗效参考2004年兰州标准,对符合入组标准的患者进行各症...
- 文忠于超生申聪香赖肖芬王军旗杨柯柯
- 文献传递
- 囊泡分子免疫病理学改变对鼻内镜术后鼻腔黏膜上皮预后转归的影响被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨囊泡分子免疫病理学改变对鼻内镜术后鼻腔黏膜上皮预后转归的影响。方法:依EPOS标准选取40例(80侧)慢性鼻窦炎、鼻息肉患者为研究对象,根据术后对囊泡处理方式的不同分为囊泡刮除(右侧)和不刮除(左侧);依据囊泡数量及大小分为轻度组(44侧,单侧术腔囊泡数目≤5个且囊泡直径均≤5mm)及中重度组(36侧,单侧术腔囊泡数目>5个或囊泡数目≤5个而囊泡直径>5mm)。鼻内镜下比较轻度组、中重度组术后鼻黏膜上皮化情况;用苏木精-伊红染色及透射电镜观察囊泡的病理形态学变化;免疫组织化学法比较术后不同时间各组(术后1～3周、6～8周及11～14周)和对照组(下鼻甲黏膜、鼻息肉)转化生长因子β1(TGFβ1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。结果:病理学观察发现,囊泡上皮基膜不连续、间质水肿、炎细胞浸润、病理性腺体增多;超微结构显示,囊泡微管结构出现异常,线粒体减少;分子免疫学结果显示,在术后1～3周、6～8周及鼻息肉组织中TGFβ1的表达明显高于术后11～14周及下鼻甲黏膜组织(P<0.05);术后6～8周及鼻息肉组织囊泡中VEGF的表达明显高于术后1～3周、11～14周及下鼻甲黏膜组织(P<0.05)。中重度组囊泡刮除较不刮除鼻黏膜更快上皮化,与轻度组比较平均时间缩短1.5周(P<0.05),轻度组囊泡刮除和不刮除对术腔黏膜上皮化的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论:囊泡是鼻内镜术后有可能经历的阶段,其出现可能提示是鼻腔黏膜术后对炎症存在的反映,存在病理形态学改变及VEGF、TGFβ1的高表达,VEGF、TGFβ1术后的动态变化可以成为鼻内镜术后鼻腔黏膜预后转归的监测指标之一。术后对中重度囊泡进行清除有利于鼻腔黏膜的恢复和愈合。
- 王军旗文忠申聪香王海丽钟品能杨柯柯李冠雪张沈华
- 关键词：囊泡预后转归
- Nods样模式识别受体在变应性鼻炎患者下鼻甲黏膜中的表达及意义
- 张沈华申聪香文忠李冠雪杨柯柯史欣
