杨文巍
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
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- CD40siRNA对实验性自身免疫性心肌炎大鼠Th17细胞及其细胞因子白细胞介素-17与白细胞介素-23的作用被引量：7
- 2013年
- 目的探讨CD。小分子干扰RNA（CD40siRNA）对实验性自身免疫性心肌炎（EAM）大鼠的心肌病理改变、心肌组织中Th17细胞及外周血中IL-17、IL-23水平的影响。方法选取40只健康雄性6—8周龄Lewis大鼠，体质量185—210g，随机分为对照组、EAM组、CD。siRNA组及小分子干扰RNA（siRNA）组，每组10只。EAM组、CD40siRNA组及siRNA组以猪心肌球蛋白与完全弗氏佐剂的混合液0．2mL大鼠足垫区皮下注射，对照组大鼠足垫区皮下注射PBS0．2mL。CD40siRNA组与siRNA组免疫后第8天分别尾静脉注射CD40siRNA表达载体、siRNA表达载体。免疫后21d处死所有大鼠，光镜下观察心肌病理变化并计算心肌组织病理积分；实时荧光定量-PCR法检测心肌组织Th17细胞分化的特异性转录因子基因RORCmRNA表达水平，ELISA法检测外周血IL-17、IL-23水平。结果1．CD40siRNA组心肌组织病理积分较EAM组明显下降（2．34±0．60比3．40±0．35，P〈0，05）；2．C040siRNA组RORCmRNA较EAM组明显下降（2．13±0．28比2．93±0．36，P〈0，05）；3．CD40siRNA组IL-17水平较EAM组明显下降（114．38±8．29比148．70±5．04，P〈0，05）；4．CD40siRNA组IL-23水平较EAM组明显下降（107．00±7．69比136．98±23．16，P〈0，05）。结论CD40siRNA可减轻EAM大鼠心肌炎症，其机制可能与抑制EAM大鼠Th17细胞分化特异性转录因子基因RORCmRNA的表达、减少IL-17及IL-23的分泌有关。
- 杨文巍韩波王介忠刘奉琴高聆
- 关键词：实验性自身免疫性心肌炎白细胞介素-17白细胞介素-23
- CD40siRNA对自身免疫性心肌炎大鼠Th17细胞及IL-17与IL-23的作用
- 目的：病毒性心肌炎是儿童的常见疾病之一，可导致心律失常、扩张型心肌病、心力衰竭、心源性休克甚至猝死等严重后果。其发病机制尚不明确，但越来越多的研究资料证明自身免疫性损伤是造成病毒性心肌炎后期心肌损害的重要原因。因此建立自...
- 杨文巍
- 关键词：自身免疫性心肌炎TH17细胞白介素17白介素23
- CD40siRNA对实验性自身免疫性心肌炎大鼠Th17细胞及IL-17与IL-23的作用
- ：探讨CD40siRNA对EAM大鼠的心肌病理改变、心肌组织中Th17细胞和外周血中白介素17(IL-17)、IL-23浓度的影响.方法：选取40只健康雄性6～8周龄Lewis大鼠,体质量为185～210g,随机分为EA...
- 杨文巍韩波王介忠刘奉琴高聆
- 关键词：自身免疫性心肌炎TH17细胞白介素17白介素23
- 大鼠CD40基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
- 目的构建大鼠CD40基因RNAi慢病毒载体,从源头上沉默CD40的表达,减轻或阻断免疫反应,研究病毒性心肌炎的发病机制。方法针对大鼠CD40基因RNAi设计4组有效靶序列,合成靶序列的寡核苷酸序列。退火形成双链DNA,与...
- 王介忠韩波高聆杨文巍
- 动脉导管未闭患儿TFAP2B基因变异筛查
- 2013年
- 目的检测动脉导管未闭(PDA)患儿TFAP2B基因序列,探讨TFAP2B基因变异与PDA的关系。方法选取74例PDA患儿为病例组,100例健康儿童为对照组,分别收集外周血并提取基因组DNA。应用聚合酶链反应扩增TFAP2B基因的全部外显子及其两侧的部分内含子,采用Sanger测序法对扩增片段进行测序。将所测得序列与Genbank及NCBI数据库中TFAP2B基因序列进行比对,以识别TFAP2B基因有无突变或多态性。应用χ2检验比较TFAP2B基因多态在病例组和对照组之间的频率分布差异。结果病例组和对照组TFAP2B基因均发现1个新的单核苷酸多态位点(SNP),TFAP2B基因第1外显子编码区上游第34位鸟嘌呤转变为腺嘌呤(c.1-34G→A)。该位点等位基因及基因型在病例组和对照组间的频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TFAP2B基因c.1-34G→A单核苷酸多态位点与动脉导管未闭之间无明显相关。
- 孙瑾韩波魏美丽杨文巍王介忠刘永蛟
- 关键词：动脉导管未闭基因突变单核苷酸多态性儿童
- 大鼠CD40基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的构建大鼠CD。基因RNAi慢病毒载体。方法针对大鼠CD40基因RNAi设计有效靶序列，合成靶序列的寡核苷酸序列。退火形成双链DNA，与经Hpal和Xhol双酶切后的GV118载体连接产生短发卡RNA慢病毒载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定。随后进行Westernblot外源筛选最佳干扰靶点、慢病毒包装及病毒滴度测定。结果CD40siRNA成功插入慢病毒载体。慢病毒载体经293T细胞包装成功，测定病毒的滴度为2．0×10^12TU／L。结论成功构建大鼠CD40基因的RNAi慢病毒载体，为后期进一步研究病毒性心肌炎发病机制及新的治疗方法提供工作基础。
- 王介忠韩波高聆杨文巍
- 关键词：CD40RNAI慢病毒载体病毒性心肌炎
- 动脉导管未闭患儿TFAP2B基因变异筛查
- 目的检测动脉导管未闭(PDA)患儿TFAP2B基因序列,探讨TFAP2B基因变异与PDA的关系。方法收集74例PDA患儿的外周血标木,以100例儿童作为对照。应用聚合酶链反应扩增TFAP2B基因的全部外显子及其两侧的部分...
- 孙瑾韩波魏美丽杨文巍王介忠刘永蛟
- CD40siRNA对EAM大鼠的作用及其对CD4^+ CD25^+ Treg的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨CD40siRNA对EAM大鼠的治疗作用及对CD4+CD25+Treg的影响。方法 40只雄性Lew is大鼠随机分成4组,正常组、EAM模型组、CD40siRNA治疗组和siRNA治疗组,每组10只。于实验第1天、第8天正常组大鼠双后肢足垫区皮下注射PBS缓冲液,0.2 mL/只;另3组大鼠双后肢足垫区皮下注射充分混合的猪心肌球蛋白,0.2 mL/只。第8天CD40siRNA治疗组尾静脉注射25μL CD40siRNA慢病毒表达载体;siRNA治疗组尾静脉注射25μL siRNA慢病毒表达载体。第21天处死所有大鼠,用光学显微镜观测心肌病理积分;流式细胞仪分析大鼠脾脏中CD4+CD25+Treg的表达。结果各组大鼠均无死亡,心肌组织病理积分CD40siRNA治疗组(11.70±2.95)明显低于EAM模型组(17.00±1.76)(P<0.05),CD4+CD25+Treg的表达较EAM模型组明显上调[(40.7±4.0)%vs(12.2±1.1)%,P<0.05]。结论 CD40siRNA可减轻EAM大鼠的心肌炎症,其机制可能与上调CD4+CD25+Treg的表达有关。
- 王介忠韩波高聆杨文巍刘奉琴吕建利赵立健
- 关键词：心肌炎调节性T细胞
