杨应忠
- 作品数：80 被引量：274H指数：11
- 供职机构：青海大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 藏羚羊高原适应生物学机制的研究
- 格日力马兰杨焕明嘎琴杨应忠白振忠张雪峰常兰
- 该项目充分利用青藏高原特有的物种资源———藏羚羊作为研究对象，从整体———器官———细胞———分子水平等几个方面，利用解剖、电镜观察、血液指标测定、血流动力学、心肌收缩功能测定、呼吸功能检测等方法揭示了藏羚羊低氧适应的生...
- 关键词：
- 关键词：藏羚羊分子生物学
- 慢性高原病中VHL、HIF-1α、EPO水平测定及VHL基因598C＞T多态性分析
- 祁玉娟杨应忠李进章祁磊杨敏柯浩珍赞梅李燕
- 该研究目的观察慢性高原病患者血清中VHL，HIF-1α，EPO水平变化以及VHL基因598C＞T多态性分析，探讨慢性高原病的发病机制。通过选择平原健康汉族，高原健康组（9个汉族，21个藏族）及慢性高原病（11个汉族，19...
- 关键词：
- 关键词：高原病
- 高原低氧对药物代谢酶CYP2C9和2C19活性及蛋白表达的影响被引量：18
- 2012年
- 探讨高原低氧对药物代谢酶CYP2C9、2C19活性和蛋白表达的影响。平原、中度海拔急性缺氧、中度海拔慢性缺氧、高海拔急性缺氧和高海拔慢性缺氧等5组大鼠分别灌胃给予探针药物苯妥英钠(PHT)和奥美拉唑(OMZ),采用RP-HPLC法分别测定给药后12 h血清中苯妥英钠和代谢产物4'-羟基苯妥英(HPPH)以及3 h血清中奥美拉唑和代谢产物5-羟基奥美拉唑(5-OHOMZ)的血药浓度,以HPPH与PHT的浓度比值评价CYP2C9的活性,以5-OHOMZ与OMZ的浓度比值评价CYP2C19的活性。采用ELISA方法测定CYP2C9和2C19的蛋白表达。与平原对照组大鼠比较,中度海拔急性缺氧组、中度海拔慢性缺氧组、高海拔急性缺氧组和高海拔慢性缺氧组大鼠CYP2C9的活性和蛋白表达均无显著性变化。与平原对照组大鼠比较,中度海拔急性缺氧组、中度海拔慢性缺氧组、高海拔急性缺氧组和高海拔慢性缺氧组大鼠CYP2C19的蛋白表达无显著性变化,但高海拔急性缺氧组大鼠CYP2C19的活性显著升高,其他组无显著性变化。研究结果提示,高原低氧对CYP2C19的活性有一定影响。
- 李向阳刘永年袁明李永平杨应忠朱俊博
- 关键词：低氧CYP2C9CYP2C19活性蛋白表达
- 高原鼠兔血红素氧合酶1的基因克隆及序列分析
- 2013年
- 目的:克隆高原鼠兔血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)基因cDNA的全长序列,并分析其序列特征,为进一步揭示高原鼠兔低氧适应的分子机制提供有益参考。方法:从高原鼠兔肝组织中提取总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和cDNA末端快速克隆(RACE)技术扩增出HO-1基因cDNA全长序列并进行测序,测序结果采用生物信息学的方法进行分析。结果:克隆所得鼠兔HO-1基因cDNA全长片段大小为1466 bp,与预期一致,编码区长度为873 bp,编码290个氨基酸(GenBank登录号为:JX035934);序列分析结果显示,核苷酸序列和推测的氨基酸序列相似性比较,与兔、人、牛、小鼠、大鼠、猪和马的HO-1核苷酸序列的同源性分别为89%、87%、85%、79%、84%、85%和85%,与兔、人、牛、小鼠、大鼠、猪和马的HO-1氨基酸序列的同源性分别为89%、85%、84%、80%、79%、82%和67%,显示出高度保守性。构建的基于氨基酸序列的分子系统进化树聚类结果表明,高原鼠兔与兔的进化距离最近。结论:本实验首次成功克隆出高原鼠兔HO-1基因cDNA全长序列,为从低氧细胞保护角度,进一步探讨青藏高原土著物种适应高原的分子生物学机制研究提供实验依据。
- 杜杨杨应忠马燕曹雪峰格日力
- 关键词：高原鼠兔血红素氧合酶1低氧适应CDNA克隆
- 唐古特红景天降低大鼠低氧性肺动脉高压的作用及对ET-1,eNOS mRNA和蛋白表达的影响被引量：11
- 2013年
- 目的:研究唐古特红景天95%乙醇提取物对大鼠慢性低氧性肺动脉高压(HPH)的作用及其分子机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧+生理盐水组、低氧+低剂量药物组(1.25 g.kg-1.d-1)、低氧+高剂量药物组(2.5 g.kg-1.d-1)5组,每组15只。除对照组外,其余各组动物均置于低压氧舱内(模拟海拔4 500 m的高原环境),每24 h开舱0.5 h进行灌药等处理,连续30 d。检测各组大鼠的肺血流动力学变化、右心室肥厚指数;光镜观察直径50～100μm的肺动脉管壁厚度占外径的百分比(WT%);采用实时荧光定量PCR方法,检测各组动物肺组织内皮素-1(ET-1)和内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达;采用ELISA法检测各组动物血清ET-1和eNOS蛋白的含量。结果:与低氧对照组和低氧生理盐水组相比,高剂量唐古特红景天干预,具有以下药理作用:①降低大鼠的平均肺动脉压(mPAP),右心室肥厚指数(RV/LV+S),血红蛋白含量(Hb),红细胞压积(Hct)(P<0.01);②减轻大鼠肺动脉的肌化程度(P<0.05);③降低大鼠肺组织ET-1 mRNA表达,上调大鼠肺组织内皮细胞(eNOS)mRNA表达(P<0.05);④降低大鼠血清ET-1蛋白的含量,上调大鼠血清内皮细胞eNOS蛋白的含量(P<0.05)。结论:唐古特红景天对于HPH的形成具有一定的防治作用,其药理作用机制与上调eNOS mRNA和蛋白表达、抑制ET-1 mRNA和蛋白表达有关。
- 芦殿荣张树娜靳国恩白振忠永胜张得钧王欣佩杨全余嘎琴杨应忠马兰王海洁芦殿香格日力
- 关键词：低氧性肺动脉高压内皮素-1
- EGLN1基因多态性位点rs479200、rs2790870与高原肺水肿的关系
- 2015年
- 目的探讨EGLN1基因多态性位点rs479200、rs2790870与高原肺水肿(High-altitude pulmonary edema,HAPE)的关系。方法采用病例对照研究,选取HAPE患者128例(HAPE组)及性别、年龄等相匹配的127例为对照组。采用PCR-测序法检测EGLN1基因的rs479200、rs2790870单核苷酸位点的多态性。结果HAPE组和对照组间rs479200和rs2790870位点的C等位基因频率分别为42.2%、42.5%和52.3%、58.3%,T等位基因频率分别为57.8%、57.5%和47.7%、41.7%,两组C、T等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05);HAPE组和对照组间rs479200位点TT、TC和CC基因型频率分别为35.2%、45.3%、19.5%和36.2%、42.5%、21.3%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HAPE组和对照组间rs2790870位点TT、TC和CC基因型频率分别为24.2%、46.9%、28.9%和21.3%、40.9%、37.8%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EGLN1基因多态性位点rs479200、rs2790870的基因型及等位基因频率无差异,提示在本研究中与HAPE的发病无关。
- 陈芃李永平王亚平杨应忠
- 关键词：高原肺水肿单核苷酸多态性
- 藏羚羊血红素氧合酶-1基因编码区的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 目的:克隆藏羚羊血红素氧合酶-1基因编码区,并进行序列分析。方法:从藏羚羊肝组织中提取总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增出血红素氧合酶-1(HO-1)基因编码区cDNA片段,与载体连接构建重组质粒,经转化、扩增培养、鉴定后测序,测序结果利用生物信息学的方法进行分析。结果:藏羚羊HO-1基因编码区长度为897,编码298个氨基酸(GenBank登录号为:JQ809687);序列分析表明,藏羚羊HO-1基因的编码区序列与脊椎动物山羊和牛的相似性分别达到98%和96%,氨基酸序列相似性分别达到92%和97%,与其它脊椎动物HO-1基因的核苷酸及氨基酸序列相似性达到86%和87%以上,显示出高度保守性。构建的基于氨基酸序列的分子系统进化树聚类结果表明,藏羚羊与山羊的进化距离最近。结论:本研究成功地克隆出藏羚羊HO-1基因编码区序列,为从低氧细胞保护角度探讨青藏高原土著物种适应高原的分子生物学机制研究提供实验依据。
- 曹学锋杨应忠马兰马燕格日力
- 关键词：藏羚羊血红素氧合酶-1低氧适应CDNA克隆
- 高住低练对世居高原运动员运动能力的影响被引量：5
- 2006年
- 对世居高原的20名运动员(实验组、对照组各为男6名、女4名)进行了高住低练法的研究。其方法为:实验组(6男、4女)夜间睡在模拟4 000m低压舱(10:00pm-6:00 am;8小时),白天在原居住的高度进行强度训练(共4周),对照组(6男、4女)睡练均在2 260m,并执行相同的训练计划。结果显示,世居高原运动员对间歇性暴露于4 000m高原有较好的适应性,但未能达到刺激肾脏释放EPO和通气量增大的低氧效应;虽然实验组VO2m ax、3 000m比赛成绩自身前后比较有所提高(P<0.05),但与对照组相比无明显的差异(P>0.05)。
- 马福海格日力樊蓉芸刘海平靳国恩杨应忠曹越
- 关键词：高住低练高原运动员血乳酸最大摄氧量
- 高原低氧环境下大鼠血浆抗利尿激素水平变化研究被引量：1
- 2008年
- 目的:研究高原低氧环境下大鼠血浆抗利尿激素(PAVP)水平变化,探讨其与急性高原病的关系。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组,分别为24 h4、8 h7、2 h1、w及1个月(A、B、C、D、E)组,同时设立对照组(西宁地区,海拔2260m),将5个实验组由西宁地区带至青海大学可可西里高原医学研究基地(海拔4600 m),在不同时间点处死取材,应用放射免疫法检测PAVP的浓度,并与对照组比较。结果:PAVP浓度在初入高原后呈下降趋势,在48 h达到最低,后逐渐回升,至1 w时已经接近对照组水平,1个月时达到最高水平。结论:高原慢性低氧环境下,PAVP的浓度随着缺氧时间的延长而变化,此可能与机体缺氧程度及高原低氧习服过程有关。
- 罗朋立曹越韩淑芬钟英成白振忠靳国恩杨应忠格日力
- 关键词：高原低氧
- 小鼠死后环状RNA的降解规律及其用于死亡时间推断的适用性被引量：4
- 2019年
- 目的探讨小鼠小脑组织3种circRNA的降解规律,及其用于死亡时间推断的适用性。方法应用转录组学方法设计课题。将50只小鼠随机分为两个大组(4℃恒温箱组和20℃恒温箱组),用断颈法处死,每个大组小鼠按照死亡时间分为5个小组(死后0、24、48、96、168h 组,每小组5 只),其中0 h 组为对照组。取小鼠小脑组织,利用实时荧光定量PCR技术对β-actin,CDR1as circRNA,Rims2 circRNA及Dym circRNA 的表达水平进行检测,使用SPSS19.0 软件进行数据分析。结果CDR1as circRNA的M值在四组候选内参基因中最小,等于0.417;Rims2 circRNA与Dym circRNA 的表达量随着死亡时间增加而呈现递减趋势(P<0.05);4 ℃组Rims2 circRNA 与Dym circRNA的三次回归模型的回归系数r^2 最大(回归方程分别为^y = 1.392+2.691x-0.678x^2+0.059x^3,r^2 = 0.752,P<0.05;^y = 3.767+4.034x-1.385x^2+0.151x^3,r^2 = 0.834,P<0.05);20℃组Rims2circRNA 与Dym circRNA 的三次回归模型的回归系数较大(回归方程分别为^y = 3.532+0.170x+0.060x2-0.008x^3,r^2 = 0.544,P<0.05;^y = 5.814-2.172x+0.970x^2-0.106x^3,r^2 = 0.512,P<0.05)。结论小鼠小脑组织3 种circRNA 的降解规律: CDR1as circRNA 适合作为本实验中的内参基因;Rims2circRNA 与Dym circRNA 的表达量随着死亡时间增加而呈递减趋势(P<0.05);Rims2 circRNA 及Dym circRNA 的相对表达量受PMI 影响较大(P<0.05);4 ℃条件下相对于20℃条件下的PMI对circRNA 相对表达量的影响更大。
- 郝尔娃吴岳杨应忠马启宁赵洪乾于聪
- 关键词：法医Q-PCR
