杨学慧 作品数:10 被引量:29 H指数:4 供职机构: 河北联合大学附属医院 更多>> 发文基金: 留学人员科技活动项目择优资助经费 教育部留学回国人员科研启动基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
N-乙酰半胱氨酸对大鼠心脏移植缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响 被引量:6 2013年 目的观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对大鼠心脏移植后心肌缺血再灌注损伤导致的细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。 方法健康雄性Lewis大鼠60只,体重200~220 g,随机分为3组,每组20只,供、受体各10只。对照组:摘取供心前30 min经供体大鼠下腔静脉注射生理盐水1 mL;供体预处理组:摘取供心前30 min经供体大鼠下腔静脉注射NAC(300 mg/kg),受体不作处理;受体预处理组:于移植前30 min经受体大鼠下腔静脉注射NAC(300 mg/kg),供体不作处理。各组均建立同种异体异位心脏移植模型。术后观察受体大鼠存活情况;于移植后6、24 h取静脉血检测天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量;移植后24 h,取心肌组织检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)活性,观察心肌组织学及超微结构,免疫组织化学染色检测活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)蛋白表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。 结果各组心脏移植手术均成功,大鼠均存活至实验完成。移植后6 h,供、受体预处理组AST、ALT、LDH均显著低于对照组(P 〈 0.05),24 h时供体预处理组AST、ALT及受体预处理组AST、LDH低于对照组(P 〈 0.05);供、受体预处理组间各指标比较差异均无统计学意义(P 〉 0.05)。移植后6、24 h组内比较,除受体预处理组ALT差异无统计学意义外(P 〉 0.05)外,移植后24 h两组各指标均显著低于6 h(P 〈 0.05)。供、受体预处理组心肌组织中SOD含量及SOD/LPO均高于对照组(P 〈 0.05),供、受体预处理组比较差异无统计学意义(P 〉 0.05);各组LPO比较差异均无统计学意义(P 〉 0.05)。组织学及透射 伊雪 崔翔宇 邬鹏宇 王帅 王耕野 杨学慧 杨方 郑素琴 李占清关键词:心脏移植 N-乙酰半胱氨酸 缺血再灌注损伤 细胞凋亡 EPO对同种异体心脏移植中供心保护作用的实验研究 2015年 目的通过建立同种异体心脏移植模型来探讨促红细胞生成素(EPO)预处理供受体对供心的保护作用及其可能机制。方法健康雄性SD大鼠60只随机分成3组,每组20只。对照组:摘取供心前30min经尾静脉注射生理盐水0.5ml;EPO供体预处理组:供体摘取供心前30min经尾静脉注射EPO 5000U/kg,受体不处理;EPO受体预处理组:受体于移植前30min经尾静脉注射EPO 5000U/kg,供体不处理。利用4℃HTK液保存供心16h后建立大鼠同种腹腔心脏移植模型。观察手术成功情况并评价供心功能;移植后8h和24h采血化验:CK-MB和Tn T变化;移植24h后处死大鼠取供心留取组织标本检测:SOD和LPO的活性;SABC法检测组织中caspase-3蛋白表达;Tunel法评价心肌细胞凋亡。结果供心全部成功复跳,并存活到实验结束;EPO预处理组心功能较对照组明显改善(P<0.05);移植8h,供、受体预处理组CK-MB、Tn T均显著低于对照组(P<0.05),移植24h供体预处理组CK-MB、Tn T及受体预处理组CK-MB、Tn T低于对照组(P<0.05);供、受体预处理组间各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。移植后8、24h组内比较,移植后24h两组各指标均显著低于8h(P<0.05)。心肌组织中SOD和LPO活性:供受体预处理组SOD活性明显高于对照组,LPO活性显著低于对照组(P<0.05);供、受体预处理组间比较无统计学差异(P>0.05)。EPO预处理组心肌组织中细胞凋亡指数分别为:3.36±0.36、3.48±0.22明显低于对照组3.21±0.50,差异有统计学意义(P<0.05)。EPO供体预处理组细胞凋亡指数与受体预处理组(3.36±0.36 vs 3.48±0.22)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。供、受体预处理组caspase-3蛋白表达量均低于对照组(P<0.05),但受体预处理组caspase-3蛋白表达量高于供体预处理组(P<0.05)。结论 EPO预处理供受体可通过减少氧自由基产生,提高氧自由基清除能力,抑制心肌细胞凋亡来发挥保护供心作用,提高移植心脏功能。 杨学慧 伊雪 王帅 张卫红 李占清 邬鹏宇关键词:同种异体心脏移植 促红细胞生成素 缺血再灌注损伤 细胞凋亡 莱菔硫烷对大鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:6 2014年 目的 建立大鼠同种异体异位心脏移植模型,莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)预处理受体大鼠,观察并探讨其对大鼠心肌冷缺血再灌注损伤的保护作用.方法 健康雄性Lewis大鼠140只,其中100只采用数字表法随机分为对照组、SFN0.5组、SFN0.75组、SFN1.0组和SFN25组5组,每组20只(供、受体各10只).各组受体大鼠分别于受体移植前24h经尾静脉注射等量生理盐水、SFN0.5mg· kg-1 bw-1、SFN 0.75mg·kg-·bw-、SFN 1.0mg·kg-1 ·bw-和SFN 2.5 mg·kg-1·bw-.将冷藏于4C HTK液18h的供心,移植到受体大鼠腹腔内,建立大鼠同种异体异位心脏移植模型.移植后6、24 h分别从受体鼠眼内眦静脉或腔静脉采血,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(TnT)水平;移植后24 h,取供心心肌组织,检测心肌组织中脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,应用免疫组织化学检测移植心肌组织诱导型一氧化氮合酶(inducible Nitric Oxide,iNOS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、低氧诱导因子-1oα(Hypoxia in-ducible factor,HIF-1α)的表达,电镜观察心肌超微结构变化.另外40只大鼠应用Kaplan-meier分析其生存率.结果 与对照组大鼠比较,其他4组经SFN预处理大鼠的中位生存期明显高;血清中LDH、TnT、CK-MB水平均有不同程度下降;心肌LPO含量均降低(P<0.05);SOD/LPO比值高(P<0.01);心肌超微结构损伤程度轻.另外,与对照组比较,SFN0.75组、SFN10组(P<0.05)、SFN2.5组(P<0.05)大鼠的心脏功能评分较高;移植后6、24 h,SFN0.5组心肌组织SOD活性升高(P<0.05);SFN0.75组、SFN1.0组、SFN2.5组心肌组织iNOS表达降低(P<0.01);SFN1.0组、SFN2.5组Caspase-3表达低(P<0.05);SFN10组、SFN25组HIF-1α表达低(P<0.05).结论 SFN可通过抗氧化、抗细胞凋亡机制,减轻心脏移植中冷缺血再灌注损� 李占清 伊雪 邬鹏宇 王帅 杨学慧 崔翔宇 刘志勇 郑素琴 杨方关键词:心脏移植 心肌再灌注损伤 细胞凋亡 莱菔硫烷 一氧化氮合酶在N-乙酰半胱氨酸调控大鼠心肌冷缺血-再灌注损伤中的变化 被引量:1 2015年 目的:观察一氧化氮合酶(NOS)在N-乙酰半胱氨酸(NAC)调控大鼠心肌冷缺血-再灌注损伤中的变化。方法:将健康雄性Lewis大鼠60只随机分为3组。(1)对照组:摘取供心前30 min,经供体大鼠下腔静脉注射生理盐水0.5 mL;(2)供体预处理组:摘取供心前30 min,经供体大鼠下腔静脉注射NAC300 mg/kg,受体大鼠不作预处理;(3)受体预处理组:移植前30 min,经受体大鼠下腔静脉注射NAC300 mg/kg,供体大鼠不作预处理。将冷藏于4℃HTK液18 h的供心移植至受体大鼠腹腔,建立同种异体心脏移植模型。于再灌注24 h后取供心采用免疫组化方法检测诱导型一氧化氮合酶/内皮型一氧化氮合酶(iNOS/eNOS)蛋白表达水平,以免疫组化评分(IHS)表示。采用Real time-PCR法检测iNOS/eNOS mRNA表达。结果:与对照组相比,供、受体预处理组的iNOS蛋白表达降低,IHS评分分别为3.00±0.15、1.50±0.22、1.63±0.26,P<0.05;而eNOS蛋白表达升高,IHS评分分别为2.00±0.21,3.60±0.16,3.40±0.26,P<0.05。与对照组相比,受体预处理组iNOS mRNA表达降低(0.43±0.17对1.00±0.41,P<0.05),供体预处理组eNOS mRNA表达升高(3.06±1.47对1.00±0.65,P<0.05)。结论:NOS参与了NAC预处理减轻移植大鼠心肌缺血-再灌注损伤的过程。 伊雪 崔翔宇 邬鹏宇 王帅 王耕野 杨学慧 郑素琴 李占清关键词:N-乙酰半胱氨酸 心脏移植 冷缺血再灌注损伤 一氧化氮合酶 褪黑素预处理受体对移植肾的保护作用及其机制探讨 2014年 目的 探讨褪黑素预处理受体对移植肾的保护作用及其可能的机制. 方法 40只Lewis大鼠应用随机数字表随机分为对照组和实验组,每组20只(供、受体各10只).实验组:50 mg/kg褪黑素+5 ml牛奶在移植前2h经胃管注入受体大鼠;对照组:5 ml牛奶在移植前2h经胃管注入受体大鼠.移植后0、6和24 h分别采血检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)及天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH);移植后24 h取移植肾检测肾组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO);过碘酸-雪夫染色(PAS染色)观察组织学变化,免疫组化法检测肾移植物中核转录因子-κB (nuclear factor kappa B,NF-κB)和半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)阳性肾小管数. 结果 实验组与对照组移植后6 h BUN分别为(36.26± 19.05)、(53.64± 16.57) mmol/L,移植后24 h血Cr分别为(144.09±76.91)、(259.01±132.60) μmol/L,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).移植后24 h,实验组血清AST、ALT、LDH均低于对照组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).移植后24 h实验组和对照组移植肾组织中SOD分别为(8.91±4.38)、(2.21 ±0.45) U/mg,LPO分别为(9.5±5.8)、(60.8±23.7) pmol/mg,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).两组肾小管损伤指数分别为1.50±0.22、3.00±0.15,NF-κB阳性小管评分为2.00±0.21、3.60±0.16,caspase-3阳性小管评分为2.77±0.48、3.38±0.52,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 褪黑素预处理受体可能通过降低体内的氧化应激反应,提高抗氧化酶活性,增强清除自由基的能力,抑制脂质过氧化反应和凋亡的发生来减轻移植肾的缺血再灌注损伤,提高移植肾功能. 伊雪 邬鹏宇 杨学慧 王耕野 王耕银 崔翔宇 王帅 杨方 李占清关键词:肾移植 褪黑素 缺血再灌注损伤 莱菔硫烷预处理对大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤的影响 被引量:5 2013年 目的:观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤的影响。方法:健康雄性Lewis大鼠60只随机分成3组,每组20只。对照组:受体大鼠于移植前24 h经鼠尾静脉注射等量的生理盐水;NAC组:受体大鼠于移植前半小时经下腔静脉注射N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)300 mg/kg;SFN组:受体大鼠于移植前24 h经尾静脉注射SFN 2.5 mg/kg。其中供心冷藏于4℃HTK液18 h,建立大鼠心脏移植模型。采用半定量法评价心脏功能,再灌注后6、24 h分别从受体鼠内眦静脉和下腔静脉取血,检测血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶(creatinekinase-MB,CK-MB)、肌钙蛋白(troponin T,TnT)的水平;移植后24 h摘取供心,观察心肌组织学及超微结构的变化,检测心肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性及脂质过氧化物(lipid hydroperoxide,LPO)含量。结果:心脏功能评分SFN组、NAC组较对照组均明显提高(P<0.05);再灌注6 h,与对照组相比,NAC组血清中LDH、CK-MB和TnT的活性均降低(P<0.05)。SFN组血清中LDH、CK-MB和TnT的活性均降低(P<0.05);再灌注24 h,NAC组LDH和TnT的活性亦均降低(P<0.05),CK-MB的活性未见明显变化,SFN组血清中CK-MB和TnT的活性亦均降低(P<0.05);NAC组和SFN组心肌组织学及超微结构的损伤程度均较对照组明显减轻;与对照组相比,NAC组心肌组织SOD活性及SOD/LPO比值明显升高(P<0.05),LPO含量未见明显变化(P>0.05);SFN组供心心肌组织LPO含量显著降低(P<0.05),SOD活性未见明显变化,SOD/LPO明显提高(P<0.01)。结论:SFN能保护移植心脏,其机制可能与其诱导Ⅱ期酶产生,提高心肌细胞对氧化应激的防御能力,减少自由基对心肌的氧化损伤有关。 伊雪 王帅 邬鹏宇 崔翔宇 杨学慧 郑素琴 杨方 万松 李占清关键词:心脏移植 莱菔硫烷 冷缺血再灌注损伤 氧化应激 自制约束复温保暖套在全麻体外循环术后患者复温中的应用 被引量:4 2011年 目的观察自制约束保暖套对全麻低温体外循环术后患者的复温效果。方法将自制约束保暖套应用于120例低温体外循环术后患者,观察复温时间、烫伤、循环稳定情况。结果 110例患者经过60 m in后平稳复温至正常,末梢暖,循环稳定,无烧烫伤事件发生。结论自制约束保暖套对全麻体外循环后患者的复温安全、有效。 张卫红 杨学慧 艾海丽 赵芳菲 陆学荣 郑贸根关键词:体外循环 莱菔硫烷抗凋亡对移植大鼠心脏的保护作用 被引量:10 2014年 目的莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)抗氧化作用减轻心肌的缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)的研究已有报道,文中研究SFN抗细胞凋亡作用对移植心脏IRI的影响。方法健康雄性Lewis大鼠40只随机分成2组,每组20只。对照组受体大鼠于移植前24 h经鼠尾静脉注射等量的等渗盐水,实验组受体大鼠于移植前24 h经尾静脉注射SFN 2.5 mg/kg。实验组和对照组的供心均冷藏于4℃HTK液18 h,建立大鼠异体异位心脏移植模型。半定量方法分析评价移植心脏功能,免疫组织化学检测移植心脏心肌组织Caspase-3蛋白的表达,Tunel法检测心肌细胞凋亡,Kaplan-Meier分析移植心脏存活时间(BN→Lewis)。结果实验组移植心脏的中位生存期明显高于对照组(7 d vs 5 d,P<0.05),心脏功能评分实验组较对照组明显提高[(3.67±0.21)分vs(2.44±0.29)分,P<0.05],心肌组织Caspase-3蛋白的表达实验组较对照组明显降低[(1.38±0.14)分vs(2.03±0.21)分,P<0.05],心肌细胞凋亡指数较对照组明显降低(0.56±0.04 vs 0.78±0.01,P<0.05)。结论 SFN对移植心脏的保护作用可能与其抑制Caspase-3蛋白的表达、减少心肌细胞凋亡有关。 王帅 伊雪 邬鹏宇 崔翔宇 杨学慧 王耕野 郑素琴 杨方 李占清关键词:莱菔硫烷 缺血再灌注损伤 凋亡 心脏移植 N-乙酰半胱氨酸提高大鼠心脏移植的供心存活时间研究 2015年 目的观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预处理对心脏移植缺血再灌注损伤(ischemiareperfusion injury,IRI)的保护作用。方法健康雄性Lewis大鼠80只和BN大鼠20只,按数字表法随机分为3组。对照组:摘取供体心脏前30 min或移植前30 min经下腔静脉注射0.9%氯化钠溶液2 m L;供体预处理组:摘取供心前30 min经下腔静脉注射NAC 300 mg/kg,受体不处理;受体预处理组:受体于移植前30 min经下腔静脉注射NAC 300 mg/kg,供体不处理。供心冷藏于4℃HTK(histidine-tryptophan-ketoglutarate)液18 h后建立大鼠腹腔异位心脏移植模型(Lewis→Lewis)。使用Kaplan-Meier分析其生存率(BN→Lewis);分别于移植后24 h取移植物检测过氧化脂质(lactoperoxidase,LPO)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果 NAC预处理组大鼠生存率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。移植后24 h供心心肌组织中SOD浓度较对照组高,差异有统计学意义[(4.71±1.09)U/m L vs.(2.38±0.39)U/m L,P<0.05];两组LPO浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。供体预处理组与受体预处理心肌组织中LPO、SOD浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在大鼠心脏移植中NAC通过直接抗氧化及提高氧化酶活性减轻了供心IRI,提高了供心的存活率。 陆学荣 杨学慧 李占清 伊雪 崔翔宇 王帅 王耕银 邬鹏宇关键词:N-乙酰半胱氨酸 心脏移植 缺血再灌注损伤 N-乙酰半胱氨酸对大鼠心脏移植缺血再灌注损伤时基质金属蛋白酶的影响 被引量:3 2014年 目的观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理对心脏移植缺血再灌注损伤(IRI)时基质金属蛋白酶(MMP)的影响,并探讨其可能的机制。方法健康雄性Lewis大鼠60只,随机分为3组。对照组:摘取供体心脏前30 min经供体大鼠腹腔静脉注射生理盐水0.5 ml;供体预处理组:摘取供心前30 min经供体大鼠腹腔静脉注射NAC 300 mg/kg;受体预处理组:受体于移植前30 min经受体大鼠腹腔静脉注射NAC 300 mg/kg。供心冷藏于4℃组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液(HTK)18 h后建立大鼠腹腔异体异位心脏移植模型。移植后24 h光镜下观察心肌胶原含量的变化;免疫组织化学法检测心肌组织中MMP2/9蛋白表达;采用实时PCR检测MMP2和基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)mRNA表达。结果 NAC供体/受体预处理组心肌胶原含量明显低于对照组(4.49±0.62/5.88±0.96 vs.10.43±0.93,P<0.01);免疫组织化学法半定量评分显示NAC供体/受体预处理组MMP2/9蛋白含量明显低于对照组(1.60±0.22/2.13±0.23,1.63±0.18/2.78±0.16 vs.3.00±0.15/3.78±0.15,P<0.01),受体预处理组心肌组织中MMP2 mRNA明显低于对照组(1.45±0.72vs.2.77±1.62,P<0.05),而供体预处理组TIMP2 mRNA明显高于对照组(2.59±2.12 vs.0.63±0.50,P<0.05)。结论在大鼠心脏移植中NAC对供心IRI具有保护作用,可能是通过NAC直接抑制活性氧所致的MMP2/9升高,激活TIMP2,减轻了心肌IRI。 伊雪 李占清 杨述亮 邬鹏宇 王帅 崔翔宇 关晓海 杨学慧 郑素琴关键词:N-乙酰半胱氨酸 心脏移植 缺血再灌注损伤 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂