杨先知
- 作品数：44 被引量：264H指数：9
- 供职机构：浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 苏浙闽地区婴幼儿急性腹泻患者病毒检测及临床特征分析被引量：16
- 2019年
- 目的分析苏浙闽地区婴幼儿急性腹泻患者常见病毒及患儿临床特征,为婴幼儿急性腹泻的流行病学研究和临床治疗提供参考。方法选取2010至2014年苏浙闽地区多家医院门诊就诊的急性腹泻患儿1 452例,采用ELISA法检测A组轮状病毒(HRV),多重PCR法检测诺如病毒(NoV)、肠道腺病毒(EAdV)和星状病毒(HAstV),并用RT-PCR法对A组轮状病毒阳性的样本进行G和P分型。结果 1 452例患儿中由常见病毒引起的急性腹泻患儿有707例,占总调查患者的48.69%。急性腹泻患儿常见病毒感染中单一病毒感染占90.10%(637/707),其感染病毒的构成以轮状病毒最多(47.52%,336/707),其次为诺如病毒(36.07%,255/707)以及星状病毒(2.40%,17/707)和肠道腺病毒(4.10%,29/707)。病毒感染腹泻患儿中多重感染者共70例,占9.90%(70/707),以A组轮状病毒合并诺如病毒感染最为常见,占多重感染者的68.57%(48/70)。226份A组轮状病毒阳性标本中,G分型以G1为优势分型,占33.19%;P分型中则以P [11]比例最高,占38.50%;G、P型组合以P [11]G11为主(38.50%)。结论 A组轮状病毒是引发婴幼儿急性腹泻的主要病毒,诺如病毒次之,且婴幼儿病毒性腹泻患者可合并多种病毒感染。不同地区腹泻患儿病毒感染阳性率有差异,轮状病毒基因型表现则具有多样性。
- 何佳慧崔大伟杨先知谢国良郑书发余斐董月皎陈瑜
- 关键词：婴幼儿急性腹泻
- 手足口病肠道病毒检测中两种核酸提取方法的比较被引量：3
- 2013年
- 目的对手工核酸提取法和全自动核酸提取仪法在手足口肠道病毒RNA荧光定量PCR检测中提取效率、重复性、耗时和成本进行比较。方法手工法试剂盒和全自动核酸提取仪对样本进行核酸提取,采用实时荧光定量PCR进行评价。结果提取仪法阳性46例,试剂盒法阳性43例,二者无明显差异(P>0.05)。提取仪法重复性高于试剂盒法(CV3.5%<5%)。核酸液终体积:提取仪法70μL,试剂盒法50μL。提取仪法耗时较短,成本较高;试剂盒法耗时较长,成本较低。结论两种方法结果无显著差异,均能满足临床需要,核酸提取仪法更具优势。
- 洪巧珍崔大伟杨先知秦志梅谢国良陈瑜
- 关键词：手足口病CT值
- 慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞应答与抗病毒治疗疗效的相关性
- 目的探讨CHB患者接受替比夫定治疗前后不同时期外周血CD4、CD8T淋巴细胞亚群数量和功能的变化及其与治疗疗效的相关性。方法选取给予替比夫定抗病毒治疗的CHB患者73例,在治疗前及治疗后12、24、36及48周,分别以荧...
- 李雪芬叶波杨先知鲁海峰吴炜陈瑜
- 文献传递
- 2013-2015年浙江地区新型甲型H1N1流行性感冒的流行病学和临床特征调查被引量：11
- 2016年
- 目的调查2013-2015年浙江地区哨点医院监测的新型甲型H1N1流行性感冒(简称流感)的临床特征及其流行病学特征。方法对2013-2015年浙江地区8家哨点医院纳入的符合急性呼吸道感染的患者进行流行病学和临床特征调查,采集研究对象呼吸道标本进行流感病毒检测,分析新型甲型H1N1流感病毒阳性组与阴性组的临床和流行病学特征。结果 8家哨点医院共纳入7 602例急性呼吸道感染患者,其中,实验室确诊新型甲型H1N1流感779例(10.2%),新型甲型H1N1流感患者中位年龄为51岁,115例(33.6%)患有至少1种慢性基础性疾病,新型甲型H1N1流感中哮喘比例(2.6%)高于流感病毒阴性患者(0.6%),差异有统计学意义(χ2=12.706,P<0.01)。新型甲型H1N1流感中恶心、呕吐所占比例高于流感病毒阴性患者,排痰性咳嗽、腹泻所占比例低于流感病毒阴性患者。新型甲型H1N1流感患者的白细胞计数和中性粒细胞计数均低于流感病毒阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论浙江地区人感染新型甲型H1N1流感的高发期为每年的冬春季节,其他时间呈散发。新型甲型H1N1流感的临床症状与非流感患者相比较无特异表现。
- 车飞虎崔大伟孙海燕高敏杨先知谢国良陈瑜
- 关键词：流行病学
- EV71相关的手足口病患儿体内细胞因子水平的变化和意义
- 目的：探讨不同病情的EV71感染的手足口病患儿(hand-foot-mouth disease,HFMD)细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因...
- 崔大伟毛其芬杨先知谢国良董月娇郑书发杨大干陈瑜
- 关键词：手足口病EV71细胞因子PBMCS
- 一种检测甲型流感病毒H7N9亚型的荧光定量RT-PCR试剂盒
- 本发明提供一种检测甲型流感病毒H7N9亚型的荧光定量RT-PCR试剂盒，对甲型流感病毒及H7N9型进行检测。本试剂盒包含定量RT-PCR反应液、酶混合液、引物探针混合液、标准品（甲型流感病毒、H7、N9、RNaseP）、...
- 李兰娟陈瑜谢国良崔大伟霍朝霞杨先知郑书发李雪芬
- 文献传递
- 浙江省急性腹泻患儿中肠道病毒检测分析研究被引量：15
- 2013年
- 目的探讨浙江省急性腹泻患儿的常见病毒组成。方法采集5岁以下(≤5岁)急性腹泻患儿的811份粪便标本,采用ELISA方法检测A组轮状病毒(RV),应用多重PCR方法同时检测B/C组RV、诺如病毒(NoV)、札如病毒(SaV)、肠道腺病毒(AdV)、星状病毒(AstV),并利用RT-PCR对RV的阳性标本进行G、P分型。结果811份粪便样本中,RV、NoV、SaV、AdV及AstV总的阳性比例分别为25.52%、18.37%、4.44%、2.71%和1.23%;65份(8.01%)混合感染标本中以RV和NoV混合感染所占比例最大(56.92%);116份RV的G/P分型中,G3型(37.93%)、G1型(32.75%)和P[8]型(57.76%)是RV的优势型别,且G3/P[8](27.59%)是混合感染最主要的组合。结论浙江省五种常见腹泻病毒及其混合感染的流行状况,为临床治疗和疾病监测提供参考价值。
- 陈平许志良崔大伟谢国良杨先知韩东升郑书发余斐陈瑜
- 关键词：肠道病毒急性腹泻
- 小鼠Foxp3蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2008年
- 目的:体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体。方法:从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32 a,转化E.coliBL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,N i2+-NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性。结果:成功构建了Foxp3-pET-32 a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体特异性与小鼠Foxp3蛋白结合。结论:成功表达小鼠Foxp3蛋白并制备了多克隆抗体。
- 鲍俊峰王胜军马洁崔大伟杨先知毛朝明仝佳邵启祥许化溪
- 关键词：FOXP3原核表达多克隆抗体小鼠
- 杭州地区2014-2015年急性胃肠炎患者感染诺如病毒的流行病学特征分析被引量：29
- 2016年
- 目的 了解2014-2015年杭州地区急性胃肠炎患者中诺如病毒的流行病学特征。方法 收集1 109份急性胃肠炎患者的临床流行病学资料和粪便样本,采用一步法双重荧光RT-PCR对样本中诺如病毒（GⅠ、GⅡ型）进行初筛,然后随机选择诺如病毒阳性的样本核酸进行多重RT-PCR扩增,对产物进行测序分析。结果 1 109份的粪便样本中,诺如病毒检出率为26.87%（298/1 109）,以GⅡ亚型为主,占25.52%（283/1 109）,GⅠ亚型占1.35%（15/1 109）;不同性别人群诺如病毒检出率差异无统计学意义（P〉0.05）;不同年龄组人群中诺如病毒检出率分别为16.94%（〈5岁）、19.45%（5～18岁）和32.26%（≥18岁）;全年均可检出诺如病毒感染,高发季节为12月至次年3月,阳性率为29.67%～37.08%。序列分析显示,GⅡ基因亚型中以GⅡ-4/Sydney株为主（46.43%,13/28）,其次为GⅡ-4/2006b株;GⅠ基因亚型中以GⅠ-1亚型为主（55.56%,5/9）。结论 诺如病毒是导致2014-2015年杭州地区急性胃肠炎的主要病原之一,GⅡ基因亚型特别是GⅡ-4/Sydney变异株和GⅡ-4/2006b变异株是该地区流行的优势毒株。
- 崔大伟李中杰林洁靳淼杨先知谢国良郑书发余斐陈瑜
- 关键词：诺如病毒急性胃肠炎聚合酶链反应基因型
- ABI 7500与TL 988实时荧光PCR仪的性能评价被引量：2
- 2015年
- 目的探讨ABI 7500与TL 988荧光定量PCR仪之间的性能差异。方法参照EP9-A2文件中的评价标准,两台仪器分别对5种不同浓度的甲型流感病毒阳性质控品进行检测,每个浓度测量20次,比对两种仪器的精密度、灵敏度,并评价两台仪器结果一致性。结果精密度:TL 988的变异系数(CV)从0.68%到1.52%,ABI7500的CV从1.93%到2.69%。两台仪器在检测高浓度的甲型流感病毒DNA时(107、106、105 copies/m L)差异无统计学意义(P>0.05),检测低浓度的病毒DNA时(104、103copies/m L)差异有统计学意义(P<0.05)。灵敏度:两种仪器检测浓度103copies/m L时,TL 988阳性检出率为100%,ABI 7500检出率为0。两种仪器检测数据相关性良好(r=0.998)。结论荧光定量TL 988 PCR仪器的性能(精密度和灵敏度)比ABI 7500好。
- 潘强龙周成林杨先知谢国良崔大伟
- 关键词：精密度一致性
