杨丽华
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新生大鼠少突胶质前体细胞低糖缺氧损伤模型的建立被引量：3
- 2011年
- 目的:利用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)低糖缺氧损伤模型。方法:取新生1 d Sprague-Dawley(SD)大鼠大脑皮质,体外混合及纯化培养获得OPCs,O4免疫荧光染色鉴定;取纯化2 d的OPCs,分为正常组和Na2S2O4损伤组,Na2S2O4损伤组又分为0.5、1 h和1.5 h三组,倒置显微镜下观察各组细胞形态;CCK-8法检测细胞存活率;透射电镜观察细胞超微结构。结果:免疫荧光染色鉴定显示纯化的细胞绝大部分为O4阳性;形态学观察显示,缺氧0.5 h,大部分细胞突起回缩,胞体变圆,颜色变暗,随低糖缺氧损伤时间的延长OPCs逐渐脱壁,1.5 h时只有少数贴壁细胞;CCK-8法检测显示损伤0.5、1 h和1.5 h组细胞的存活率显著降低,与正常组比较均有统计学意义,损伤后1.5 h与0.5 h比较,细胞的存活率具有显著性差异;电镜观察损伤1.5 h后的细胞,线粒体肿胀,有些细胞胞核固缩成块,细胞器破碎。结论:用浓度为2mmol/L Na2S2O4的低糖培养基处理OPCs 1.5 h可以建立有效的低糖缺氧损伤模型。
- 姚瑞芹王兴启刘轩于红丽袁红花杨丽华
- 关键词：少突胶质前体细胞细胞培养连二亚硫酸钠低糖
- 槲皮素对缺氧缺血性脑白质损伤新生大鼠学习记忆能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究槲皮素(QUE,黄酮类化合物)对缺氧缺血性脑白质损伤新生大鼠学习记忆能力的影响。方法生后3 d Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,随机分成对照组、模型组和QUE处理组(20 mg/kg和40 mg/kg),每组15只。模型组和QUE处理组行右侧颈总动脉结扎及缺氧处理以建立缺血缺氧性脑白质损伤模型。QUE处理组每日给药一次,连续6周。第6周时分别用Morris水迷宫及开场试验评价其学习记忆能力和行为情感。结果从训练的第2天开始,模型组逃避潜伏时间(EL)明显长于对照组(P<0.01),20和40 mg/kg QUE处理组EL明显短于模型组(P<0.05)。模型组大鼠穿越原平台次数明显低于对照组(P<0.01)及两个QUE组(P<0.05)。开场试验显示,模型组大鼠后肢站立次数较对照组增加,中央区域驻留时间较对照组延长,QUE处理后大鼠后肢站立次数较模型组明显减少(P<0.05),中央区域驻留时间明显缩短(P<0.05)。结论 QUE可以明显改善缺血缺氧性脑白质损伤新生大鼠的学习记忆及行为情感障碍,对中枢神经系统脑白质损伤具有保护作用。
- 黄晶晶刘轩王兴启杨丽华戚大石姚瑞芹
- 关键词：槲皮素缺血缺氧脑白质损伤MORRIS水迷宫新生大鼠
- 新生3日龄幼鼠缺血缺氧性脑损伤后行为发育及认知功能的变化
- 观察缺血缺氧对新生3日龄SD大鼠生长发育、学习记忆以及情感行为等的影响。方法:结扎幼鼠右侧颈总动脉,2h后再置缺氧仓缺氧处理2 h;对照组仅游离右侧颈总动脉。术后不同时间点对各组存活大鼠进行生长发育评价;术后第6w开始分...
- 姚瑞芹曾田杨丽华黄晶晶戚大石王兴启刘轩
- 关键词：缺血缺氧新生鼠
- 文献传递
- 医学细胞生物学实验教学改革的几点思考被引量：12
- 2015年
- 医学细胞生物学实验教学作为医学细胞生物学本科教学过程中的一个重要环节,其教学内容的改进和教学质量的提升对学生深入理解基本理论知识,培养学生的基本科研素质、动手能力和创新精神有着重要作用。结合徐州医学院医学细胞生物学实验教学中存在的问题和学生的反馈意见,从教学思想、教学内容、教学手段和考核方法四个方面提出了改革意见,以期通过实验教学改革提高学生的创新能力和综合实践能力。
- 付燕燕陈彦吴健宋远见刘屹武秀香李风杨丽华熊晔姚瑞芹
- 关键词：医学细胞生物学实验教学教学改革
- 槲皮素保护少突胶质前体细胞缺氧低糖损伤的体外研究
- 2011年
- 目的观察槲皮素(quercetin,QUE)对Na2S2O4联合低糖培养基诱导少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)缺氧低糖损伤的保护作用。方法建立OPCs缺氧低糖损伤模型(OGD);在所建模型基础上,通过检测OPCs相对存活率、LDH漏出率及观察细胞形态学变化,研究槲皮素对OPCs缺氧低糖损伤的保护作用,并比较QUE共孵育和预孵育对OPCs的保护效果。结果随OPCs损伤时间延长细胞凋亡数量增多,而QUE能提高OPCs相对存活率、降低LDH漏出率并改善其形态学变化,其神经保护作用有剂量效应,且共孵育比预孵育的保护效果更明显。结论槲皮素可通过提高OPCs相对存活率及减少LDH漏出率对缺氧低糖损伤的OPCs发挥保护作用。
- 王兴启刘轩杨丽华于红丽翟玥刘静姚瑞芹
- 关键词：槲皮素少突胶质前体细胞体外研究
- 过表达Olig2和Nkx2.2人胚胎干细胞系的建立
- 2015年
- 目的:建立过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞(hESCs)系.方法:利用RT-PCR从鼠N2A细胞克隆出Olig2和Nkx2.2的ORF片段,将Olig2和Nkx2.2基因编码序列分别和带有HA及Flag的载体连接,构建Olig2-HA和Nkx2.2-Flag重组载体.将构建的载体分别与2种病毒辅助包装原件载体质粒共转染293T细胞,制备并浓缩Olig2-HA和Nkx2.2-Flag慢病毒颗粒,感染hESCs,嘌呤霉素筛选的阳性克隆传代培养10代后鉴定细胞内Olig2和Nkx2.2的表达.结果:PCR扩增得到含Olig2和Nkx2.2基因编码序列的特异性条带;携带有Olig2和Nkx2.2基因的慢病毒能够同时感染hESCs,表达Olig2-HA和Nkx2.2-Flag融合蛋白,并稳定遗传.结论:成功构建了同时过表达Olig2和Nkx2.2的人胚胎干细胞系.
- 杨丽华王婷马丽罗梦娇曲学彬武秀香姚瑞芹
- 关键词：OLIG2过表达人胚胎干细胞克隆
- 高纯度少突胶质前体细胞改良培养方法的建立被引量：5
- 2010年
- 目的对传统培养方法进行改良,以获得更高纯度的少突胶质前体细胞(OPCs)。方法新生1～2d Sprague-Dawley(SD)大鼠的大脑皮质混合胶质细胞原代培养8d后,采用恒温摇床振荡分离法、差速贴壁法和胰酶消化法结合条件限定培养基纯化培养细胞,台盼蓝染色光学显微镜观察细胞形态;纯化培养2d后进行A2B5和DAPI免疫荧光染色鉴定和细胞纯度分析。结果光学显微镜观察发现纯化培养细胞的胞膜完整,细胞无损伤;免疫荧光染色后细胞纯度分析显示,A2B5染色阳性细胞占DAPI染核细胞的百分比为98.14%。结论通过对传统的混合胶质细胞培养及振荡分离和纯化方法的改进,能够培养出高纯度的OPCs。
- 王兴启刘轩杨丽华戚大石刘静姚瑞芹
- 关键词：少突胶质前体细胞细胞培养纯化
- 缺血缺氧性脑损伤对新生3日龄幼鼠学习记忆及情感行为的影响被引量：6
- 2010年
- 目的观察缺血缺氧对新生3日龄SD大鼠生长发育、学习记忆以及情感行为等的影响,建立早产儿缺血缺氧性脑白质损伤的动物模型。方法结扎幼鼠右侧颈总动脉,2 h后再置缺氧仓缺氧处理2 h;对照组仅游离右侧颈总动脉。术后不同时间点对各组存活大鼠进行生长发育评价;术后第6周开始分别用Morris水迷宫和开场实验对大鼠学习记忆能力和情感行为进行测评。结果模型组大鼠存活率为80.6%,体重增长缓慢,从生后8～28 d与对照组相比均差异具有显著性(P<0.01);31.0%模型组大鼠于7周内存在右侧眼睑持续闭合,对照组则无;同日龄8 d前翻正反射模型组大鼠所需时间较对照组长(P<0.05);Morris水迷宫实验显示模型组大鼠上台成功率较对照组显著降低(P<0.05),逃避潜伏时间较对照组明显延长(P<0.01);开场实验显示模型组大鼠后肢站立次数和中央区域驻留时间较对照组显著增加,两组间差异均存在显著性(P<0.01)。结论缺血缺氧损伤可导致新生幼鼠生长发育迟缓、学习记忆以及情感行为等障碍,用此法制作的动物模型可用于模拟新生儿缺血缺氧脑损伤的研究。
- 曾田杨丽华黄晶晶戚大石王兴启刘轩姚瑞芹
- 关键词：缺血缺氧学习记忆新生鼠
- 槲皮素对缺血缺氧脑损伤新生幼鼠胼胝体髓鞘超微结构的保护作用被引量：1
- 2011年
- 目的：观察槲皮素（quercetin）对3日龄幼鼠缺血缺氧损伤后胼胝体髓鞘超微结构的影响.方法： 将SD新生大鼠随机分为对照组、溶剂组和槲皮素处理组.溶剂组和槲皮素处理组大鼠结扎右侧颈总动脉,然后置8%O2和92%N2混合气体装置中缺氧2h,缺氧后1h分别灌胃给予槲皮素（20mg·kg^-1·day^-1）和相应的溶剂.术后28d透射电镜观察胼胝体髓鞘超微结构.结果： 对照组大鼠胼胝体髓鞘厚度及数目均正常;与对照组相比,溶剂组大鼠部分髓鞘厚度变薄,髓鞘化轴突的数目明显减少;而槲皮素处理组大鼠髓鞘厚度及髓鞘化轴突的数目与溶剂组相比增加.结论： 槲皮素对缺血缺氧导致的髓鞘损伤具有保护作用.
- 姚瑞芹曾田黄晶晶于红丽董富兴刘静杨丽华
- 关键词：槲皮素脑缺血缺氧髓鞘超微结构
- 肝脏富含的转录激活蛋白1(LAP1)对肝癌干细胞负向调控作用的研究
- 原发性肝癌是一种全球常见的、高发的恶性消化系统肿瘤，其中肝癌所致的死亡率在中国高居第二位。根据其组织学分型，肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见的类型，占总数的85％-90％。对于...
- 杨丽华
- 关键词：肝细胞癌雄激素受体拮抗剂干细胞药理活性
- 文献传递
