杜珊
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物医学院农业部动物生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 影响动物克隆效率因素的研究进展被引量：1
- 2010年
- 哺乳动物克隆效率低下成为目前制约动物克隆技术发展和应用的瓶颈。文章概述了动物克隆中供体细胞的选择、卵母细胞的去核方法、重构胚的激活和重构胚的培养等因素对克隆效率的影响以及提高克隆效率的策略,并对近年来影响动物克隆效率的因素作了详尽的论述,以期为该领域的科研工作者提供参考。
- 李亮亮杜珊刘军赵晓鹅马保华
- 关键词：动物克隆供体细胞
- 山羊乳腺上皮细胞转人β防御素3基因的研究
- 近年来体细胞核移植技术已被广泛应用于转基因动物的研究。其中,乳腺上皮细胞是乳腺生物反应器的靶细胞,外源重组基因经翻译修饰可在乳腺上皮细胞中合成具有生物活性的外源蛋白,因而乳腺上皮细胞是检测乳腺特异性表达载体表达能力的一条...
- 杜珊
- 关键词：基因转染山羊乳腺上皮细胞
- 文献传递
- 山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化被引量：2
- 2012年
- 为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了在不同电压(120、140、160、180、200V)、不同电击时长(5、10、15、20ms)以及2株细胞(GMEC1、GMEC2)的不同代数(第1代、第3代、第5代、第9代)条件下的转染效率,并利用优化条件对山羊乳腺上皮细胞进行人β-防御素3基因转染,经过G418筛选,最终获得单克隆细胞,同时对获得的单克隆阳性细胞进行体外诱导表达,并对诱导产物进行Western blotting鉴定。结果表明,不同遗传背景的细胞对转染效率的影响较小,而第1代培养的细胞转染效率要显著高于传代细胞,乳腺上皮细胞在电压180V、电击时长15ms、电击1次的条件下转染效率最高,优化条件下转染、筛选和扩增后获得稳定表达人β-防御素3蛋白的单克隆乳腺上皮细胞。研究工作为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺特异性表达载体的检测提供参考资料。
- 杜珊马保华李亮亮刘军赵晓娥张涌
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞电穿孔转染效率
- 序贯培养液G1/G2对山羊核移植胚胎发育和质量的影响被引量：2
- 2011年
- 为了优化山羊核移植胚胎体外培养体系,提高核移植效率,本研究检测了山羊体细胞核移植(SCNT)胚胎在序贯培养液G1/G2中的发育率和囊胚细胞凋亡,以及核移植胚胎移植后的妊娠率,以传统mSOF-FBS培养液作为对照组,评估序贯培养液G1/G2支持山羊核移植胚胎的发育能力。结果显示,与对照组相比,G1/G2组的囊胚发育率差异不显著((27.7±3.1)%vs(25.3±1.0)%,P>0.05),囊胚细胞数和囊胚细胞凋亡率显著降低(分别为(93.2±4.5)vs(109.1±6.2)和(4.9±0.2)%vs(11.3±0.1)%,P<0.05),但移植后的妊娠率显著增高(21.4%vs 8.0%,P<0.05)。结果表明,与传统的培养液mSOF-FBS相比,序贯培养液G1/G2能更好地支持山羊核移植胚胎的发育。
- 刘军郑聪颖李长雷杜珊李亮亮马保华张涌
- 关键词：山羊胚胎培养体细胞核移植
