李頔 作品数:4 被引量:12 H指数:2 供职机构: 四川大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
番茄转录因子SlWRKY53的分离及生物学功能鉴定 被引量:6 2013年 构建番茄SlWRKY53的过量表达载体,通过农杆菌介导转入番茄(Solanum lycopersicum)品种Ailsa Craig(AC+),获得转基因阳性植株.定量分析显示,这些转基因株系中SlWRKY53基因表达量显著高于野生型.表型分析显示,转基因植株对盐胁迫抗性强于野生型.对抗病性进行检测,转基因植株抗性稍强,但与野生型相比无明显差异.由此推测番茄SlWRKY53基因的过量表达能够一定程度增强植株抵抗盐胁迫的能力. 刘畅 牛向丽 刘继恺 唐维 张霞 张凝 李頔 刘永胜关键词:番茄 农杆菌介导转化 抗盐 番茄RBX1基因的功能初探 被引量:2 2013年 E3泛素连接酶是泛素蛋白酶体途径中非常重要的蛋白复合体,而大部分的E3连接酶都以Cullin蛋白作为支架,所有基于Cullin蛋白的E3连接酶都含有一个催化亚基RBX1。RBX1对于E3复合体结合E2和Cullin蛋白的活化具有重要作用。利用酵母双杂交技术鉴定出番茄RBX1蛋白与番茄CUL4蛋白有直接的相互作用。通过荧光定量PCR(Real-time PCR)技术分析野生型番茄中RBX1基因的组织特异性,结果显示RBX1基因在番茄各组织中均有表达,但在花与果实中表达量较高,茎和叶中相对较少。同时构建植物过量表达载体PBI121-35S-RBX1并转化番茄,获得3株过量表达和3株RBX1共抑制转基因植株。研究发现共抑制的转基因植株表现出叶片变大、顶端优势变弱和不育等表型,说明RBX1基因在番茄的生长发育中发挥重要作用,推测植物RBX1基因可能与生长素和油菜素内酯等植物激素应答以及细胞增殖有关,为进一步研究该基因在植物中的生物学功能提供了线索。 田雪芬 唐晓凤 李頔 刘永胜关键词:番茄 E3泛素连接酶 酵母双杂交 番茄SlWD1基因的克隆及SlWD1与DDB1的相互作用 被引量:2 2013年 在真核生物中,CDT2作为一个WD40家族蛋白,是CUL4-DDB1 E3泛素连接酶复合体的重要组成部分.其主要功能是将CUL4-DDB1 E3泛素连接酶和靶向蛋白连接起来,从而实现靶蛋白的泛素化修饰.利用RT-PCR技术和3’RACE技术,本研究在番茄中克隆到一个与人类CDT2同源的基因,命名为SlWD1.通过对番茄SlWD1蛋白序列与其它模式生物的蛋白序列进行氨基酸保守结构域分析和同源性比对,发现SlWD1具有2个非常保守的WD40家族的DWD结构域.酵母双杂交和免疫共沉淀实验都证明,SlWD1与DDB1具有相互作用;实时定量RT-PCR分析证明,SlWD1基因在各个组织中都表达,为组成型表达,但是,在生殖器官中的表达量要明显比其它的组织高. 张治国 高永峰 苗敏 刘继恺 孙晓春 张凝 李頔 刘永胜关键词:番茄 E3泛素连接酶 酵母双杂交 免疫共沉淀 番茄MSI2-like基因的克隆及功能初探 被引量:2 2015年 研究通过对番茄MSI2-like蛋白序列与其它模式植物的蛋白序列进行同源性比对,发现番茄MSI2-like与马铃薯的同源性最高;另外还预测了其蛋白质的理化性质及三级结构.酵母双杂交实验证明,MSI2-like与UV-Damaged DNA Binding Protein 1(DDB1)具有相互作用.同时,利用RNA干涉技术构建植物双元载体,农杆菌介导法转化番茄得到转基因植株,该转基因植株在干旱胁迫条件下有一定的抗旱功能.再利用实时荧光定量PCR分析MSI2-like基因表达的组织差异性,发现它在各个组织中都表达,但是在生殖器官花中的表达量明显较其他组织高. 李頔 唐晓凤 刘永胜关键词:番茄 酵母双杂交 RNA干涉 干旱胁迫