李茹冰
- 作品数:16 被引量:69H指数:7
- 供职机构:中国人民解放军更多>>
- 发文基金:“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用被引量:5
- 2003年
- 目的 :观察小分子多肽类物质心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用。方法 :建立培养心肌细胞阿霉素 (ADM)损伤模型 ,观察心肌肽素对心肌细胞肌酸磷酸激酶 (CPK)、乳酸脱氢酶 (LDH)及线粒体脱氢酶活性的影响 ,以荧光染料Fura- 2 -AM定量测定细胞内游离Ca2 + 浓度。结果 :心肌肽素可剂量依赖性降低细胞培养液中CPK和LDH活性及对抗细胞内线粒体脱氢酶活性下降 ,可剂量依赖性地降低培养心肌细胞 [Ca2 + ]i。结论 :心肌肽素对阿霉素损伤培养心肌细胞具有保护作用。
- 李茹冰付泳航万华印潘韵李继东李恕梁强孔祥平
- 关键词:心肌肽素阿霉素心肌钙
- 重组人心肌营养素对体外培养受损心肌细胞的保护作用被引量:4
- 2007年
- 心肌营养素是一种具有心肌保护功能的细胞因子.为鉴定人心肌营养素在体外具有促进受损大鼠心肌细胞存活的生物学活性,构建pQE-huCT-1表达载体,在大肠杆菌中表达重组人心肌营养素(rhCT-1);利用含有还原型及氧化型谷胱甘肽的复性体系,恢复变性蛋白的天然构象;通过MTT法鉴定rhCT-1的促进受损大鼠心肌细胞存活的生物学活性.pQE-huCT-1在M15菌中得到高效表达,但95%的目的蛋白以包涵体形式存在;通过变性、复性及Ni-NTA纯化,得到纯度为90%的可溶性重组蛋白.利用无血清培养基培养新生大鼠心肌细胞,造成缺血损伤;利用低浓度阿霉素损伤大鼠心肌细胞,构建阿霉素损伤模型;通过加入rhCT-1治疗,发现rhCT-1具有明显的促进受损心肌细胞存活的作用;心肌细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性随rhCT-1浓度的升高而增强,且呈显著的剂量依赖性关系;通过测定预防组和治疗组心肌细胞SDH和乳酸脱氢酶(LDH)活性,发现预防组较治疗组在促进细胞线粒体产生SDH和降低培养液上清LDH活性方面效果更加显著,说明rhCT-1可能是在心肌细胞损伤早期通过抑制细胞凋亡而达到心肌保护作用的.本研究通过复性获得了可溶性rhCT-1,它在体外具有显著的促进受损心肌细胞存活的生物学活性.
- 刘冠群孔祥平佟明华李茹冰陈文吟游松
- 关键词:心肌营养素-1心肌保护琥珀酸脱氢酶阿霉素
- 心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用被引量:8
- 2000年
- 目的 :研究心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用。方法 :采用MTT比色法 ,观察阿霉素中毒心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的活力。结果 :心肌肽素及 5个分离组分均显示了促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 ,其中P1组分活力较强 ;各组分相加亦显示促进酶活力的作用 ,但未见显示相加效应。结论 :心肌肽素对阿霉素所致心肌细胞损伤的促进修复作用 ,系各组分所含物共同作用的结果。
- 杨联萍孔祥平李茹冰曾平鲁
- 关键词:心肌肽素阿霉素细胞培养
- 肝细胞提取物对正常肝和肝癌细胞作用的研究被引量:7
- 1997年
- 取乳猪肝细胞提取物(HE),用高效液相色谱分离纯化,观察HE及各组份对肝癌细胞BEL-7402和原代肝细胞的影响。结果显示,当 HE浓度大于 100mg/L时,对 BEL-7402细胞的 DNA合成和脱氢酶活力均有明显的抑制作用,IC_(50)(半数抑制浓度)分别为606mg/L和272mg/L。在各组分中,组分3和4的抑制作用最强,抑制活性比 HE高 10倍。50~500mg/L的 HE对正常肝细胞的酶活性和 DNA合成有明显的促进作用,其中组份1、2和5的促进作用明显。当HE浓度为1000mg/L时,对正常肝细胞的DNA合成和酶活力也有明显的抑制作用。提示,HE中存在正负双向生长调节因子。采用DNA电泳和流式细胞术结果显示,HE及组分3、4诱导BEL-7402细胞生长抑制的方式可能是细胞程序性死亡。
- 孔祥平邹清雁杨联萍张宜俊曾平鲁李灼亮李茹冰易学瑞
- 关键词:乳猪细胞程序性死亡肝肿瘤
- 1.1类心血管创新药盐酸椒苯酮胺的研究
- 李茹冰李健吴新荣韩丽萍朱晋辉杨向阳李若冰万华印范礼理朱莉亚
- 药学与制剂研究优化了原料合成及制剂工艺,采用慢冻干技术,制定了质量标准,制剂处方合理,冻干工艺稳定。主要药效学显示PPTA能增加收缩蛋白对Ca2+的敏感性,甚至有抗Ca2+超载作用,可防治缺血-再灌注损伤,兼有护心和强心...
- 关键词:
- 关键词:制剂工艺心血管药
- 心肌肽素抗心律失常作用及对钙和钾离子通道的影响被引量:18
- 2000年
- 目的 :观察心肌肽素对室速、室颤发生率及心室肌细胞钙、钾电流的影响。方法 :建立整体动物心肌缺血 -再灌流损伤模型。以膜片钳技术记录单个心室肌细胞内向钙电流及电流 -电压曲线、内向整流钾电流及延迟整流钾电流。结果 :心肌肽素可降低室速、室颤发生率 ,在一定浓度下对心肌细胞内向钙电流有明显的抑制作用 ,且该作用具有一定的电压依赖性 ,而对内向整流钾电流及延迟整流钾电流均无作用。结论 :心肌肽素能降低缺血 -再灌流损伤大鼠严重室性心律失常的发生率 。
- 孔祥平万华印李茹冰王丽华吴燕李婉王晓良
- 关键词:心律失常钙通道钾通道心肌肽素
- Pichia酵母表达重组人可溶性TRAIL的纯化与生物活性被引量:5
- 2006年
- 目的分离纯化Pichia酵母表达的重组人可溶性TRAIL,并检测其生物活性。方法以Pichia酵母分泌型表达TRAIL,采用硫酸铵沉淀和柱层析纯化可溶性TRAIL蛋白。以SDSPAGE、ESIMS和Westernblot法鉴定其纯度及特异性。以细胞透射电镜、DNALadder和MTT法检测其诱导肿瘤细胞凋亡活性。结果目的蛋白以可溶形式存在,蛋白相对分子质量22000,纯化后纯度95%。Westernblot证实为TRAIL蛋白。电镜、DNALadder和MTT均证实其具有诱导肿瘤细胞凋亡活性。结论Pichia酵母表达rhsTRAIL可用柱层析法纯化,并具有诱导肿瘤细胞凋亡的生物活性。
- 李茹冰傅泳航李继东佟明华杨联萍孔祥平
- 关键词:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体生物活性
- 心肌肽素对大鼠心肌匀浆脂质过氧化的影响被引量:3
- 2000年
- 目的:观察小分子多肽类物质心肌肽素对心肌匀浆孵育脂质过氧化的影响。方法:制备5%(质量体积浓度)大鼠新鲜心肌匀浆液。取1.9ml匀浆液,分别加入0.1ml生理盐水及不同浓度心肌肽素,使心肌肽素终浓度分别为5,10,20μg/ml,置37℃水浴振荡60min。分别以硫代巴比妥酸法和光化学扩增法检测心肌脂质过氧化反应终产物MDA的含量及细胞内SOD活性。结果:心肌肽素可剂量依赖性地显著降低心肌匀浆中MDA的含量,提高SOD活性。结论:心肌肽素有抗心肌脂质过氧化损伤的作用。
- 孔祥平万华印杨联萍李茹冰
- 关键词:心肌缺血心肌肽素脂质过氧化
- 重组人肝增强因子工程菌JM109的发酵工艺研究被引量:8
- 2000年
- 目的:研究表达重组人肝增强团子(hALR)工程菌JM109的发酵工艺。方法:采用发酵罐发酵,优化工程菌发酵的培养基配方、pH值、诱导表达时间、补料方式等。结果:在pH6.9条件下,培养6h后诱导表达5h,同时补科,5L罐发酵工程菌,菌体收得量可达湿重33.0g/L。目标蛋白表达量约占菌体总蛋白的31.3%。结论:此发酵工艺可以较好地提高ALR工程菌菌体得率和目标蛋白表达量。
- 李茹冰单中元付泳航杨联萍易学瑞孔祥平
- 关键词:发酵工艺大肠杆菌工程菌
- 心肌肽素对缺氧-再给氧损伤心肌细胞的保护作用被引量:16
- 2001年
- 目的 :研究多肽类物质心肌肽素对缺氧 -再给氧损伤心肌细胞的保护作用。方法 :复制培养心肌细胞缺氧 -再给氧损伤模型 ,缺氧 6 0min ,再给氧 30min ,观察心肌肽素对细胞超微结构的影响。以ACAS 5 70进行细胞内游离Ca2 +的定性检测 ;以荧光染料Fura - 2 -AM定量测定细胞内游离Ca2 +浓度 ;以荧光偏振法测定细胞膜脂质流动性。结果 :心肌肽素能使心肌细胞线粒体超微结构的损伤减轻 ;可剂量依赖性地降低 [Ca2 +]i 和提高细胞膜脂质流动性 ;可明显减少Ca2 +伪彩色三维图色彩值。结论 :心肌肽素对缺氧 -再给氧损伤心肌细胞有明显保护作用 ,可能与其降低 [Ca2 +]i
- 万华印孔祥平杨联萍李茹冰张宜俊
- 关键词:肽类心肌低氧膜流动性