李爽 作品数:32 被引量:50 H指数:5 供职机构: 中国疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 核科学技术 环境科学与工程 更多>>
双着丝粒体半自动与人工分析估算生物剂量的比较研究 被引量:9 2020年 目的通过对双着丝粒体(dicentrics,dic)半自动和人工分析估算剂量的比较,探讨dic半自动分析估算剂量的优势和应对大规模核与辐射事故临床分类诊断的可行性。方法60Coγ射线离体照射两名健康男性的外周血样品,照射剂量为0、0.5、1、2、3、4、5和6 Gy,吸收剂量率为0.27 Gy/min,常规培养、制片;用高通量染色体自动扫描系统采集染色体中期高倍图像,用DCScore软件自动分析dic,用Ikaros软件人工计数dic+环(r),拟合基于每细胞dic或dic+r数的剂量-效应曲线,并用本实验室参加全国生物剂量估算比对的12份考核样品(0.7-4.5 Gy)估算剂量进行验证。结果半自动和人工分析检测到的每细胞dic或dic+r数均随照射剂量的增加而升高,显示量效关系有差异(r=0.984、0.972、0.972,P<0.01);基于每细胞dic或dic+r数拟合的3条剂量曲线均具有较为理想的拟合度(R2=0.998、0.999、0.999,P<0.01)。验证结果显示,在验证样品的照射剂量>2 Gy时,人工确认前基于自动分析dic估算的剂量与实际照射剂量的相对偏差均<21%,dic经人工确认后估算的剂量均接近于实际照射剂量(相对偏差≤±10%),而人工分析估算的剂量除0.7 Gy剂量点相对偏差为-25.71%,其他剂量点亦接近于实际照射剂量,但半自动分析可将剂量估算效率提高6倍。结论dic半自动分析能明显提高生物剂量估算的水平和效率,可应对发生大规模核辐射事件医学应急响应临床分类诊断的需要。 韩林 陆雪 李杰 李爽 王平 刘青杰 吕玉民关键词:电离辐射 生物剂量估算 人淋巴细胞S100A4基因在照射后不同时间点表达水平的剂量-效应关系 2015年 目的 应用实时荧光PCR技术检测不同剂量^60Co γ射线照射后不同时间永生化淋巴细胞系AHH-1中S100A4基因的表达变化情况,探讨其基因表达变化的剂量和时间效应关系.方法 永生化淋巴细胞系AHH-1接受0、1、3、5、8、10、15、18 Gy^60Coγ射线照射后4、8、12、24、48和72 h,利用反转录聚合酶链反应(PCR)以及实时荧光PCR技术检测细胞S100A4基因表达水平,分析各时间点其基因的相对表达水平与不同照射剂量之间的关系.结果 照射后各时间点,一定剂量范围内,AHH-1中S100 A4基因的表达水平上调,与照射剂量存在着一定的剂量-效应关系(R^2 =0.79~0.93,P<0.05);在一定时间范围内,AHH-1中S100A4基因表达水平的上调受照射后时间的影响(F=8.91,P<0.01).结论 在一定剂量范围内,辐射诱导的S100A4基因表达在转录水平的变化检测便捷,具有较好的剂量-效应关系,初步具备作为生物剂量计的基本条件. 冯建刚 李爽 封江彬 高玲 陆雪 陈德清 刘青杰关键词:实时荧光PCR S100A4 ^(60)Coγ射线全身照射后大鼠血浆中GDF-15、Flt-3L和SAA表达的剂量相关性研究 2019年 目的:探讨钴60(^(60)Co)γ射线照射对SD大鼠血浆中Fms样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)、血清淀粉样蛋白A(SAA)和生长分化因子-15(GDF-15)蛋白表达情况的影响。方法:将72只SD大鼠按照不同照射剂量分为0 Gy组、1 Gy组、3 Gy组和5 Gy组,每组18只,采用^(60)Coγ射线照射大鼠,剂量率为1 Gy/min。照射后1 d、3 d和5 d采集4组大鼠外周血,通过酶链免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中的Flt-3L、SAA和GDF-15蛋白表达水平。结果:SD大鼠血浆中的Flt-3L和GDF-15蛋白在照射后表达升高,升高的水平与辐射剂量相关。3 Gy组和5 Gy组血浆中的GDF-15蛋白在照射后1 d、3 d和5 d与0 Gy组相比表达均增高,差异有统计学意义(t=3.09,t=6.32,t=8.91,t=10.71,t=2.73,t=6.64;P<0.05);5 Gy组血浆中的Flt-3L蛋白在照后1 d、3 d和5 d与0Gy组相比表达均增高,差异有统计学意义(t=4.22,t=8.48,t=5.51;P<0.05);3 Gy组Flt-3L蛋白只在照后1 d和5 d表达增高,差异有统计学意义(t=5.79,t=3.69;P<0.05);GDF-15蛋白水平在照射后1 d的剂量-效应关系(R^2=0.936,P<0.05)优于照射后3 d和5 d(R^2=0.913,R^2=0.887;P<0.05);Flt-3L蛋白正相反,其在照射后5 d的剂量-效应关系最好(R^2=0.965,P<0.05);SAA只有在照射后1 d有随剂量升高表达增加的趋势。结论:血浆中的Flt-3L和GDF-15蛋白在全身照射的大鼠血浆中特定时间点呈现出比较良好的剂量-效应关系。 孙佳丽 李爽 田梅 刘青杰关键词:血清淀粉样蛋白A 低剂量照射诱导人淋巴细胞53BP1焦点形成的剂量-效应关系研究 被引量:2 2016年 目的:探讨低剂量60Coγ射线照射诱导人永生化淋巴细胞AHH-1中P53结合蛋白1(53BP1)焦点水平与照射剂量之间的关系。方法:用^(60)Coγ射线照射AHH-1细胞,照射剂量分别为0 m Gy、10 m Gy、25 m Gy、50 m Gy、100和200 m Gy,吸收剂量率为20 m Gy/min,37℃修复30 min后进行免疫荧光染色,利用激光共聚焦扫描显微镜分析细胞中53BP1焦点形成情况。结果:在剂量为0~200 mG y的^(60)Coγ射线照射30 min后,AHH-1细胞中53BP1焦点在每个细胞中的数目为0~4个,均符合泊松分布。从50 m Gy照射剂量开始53BP1焦点水平显著性增加,且焦点水平与照射剂量具有剂量-效应关系,剂量-效应曲线为y=(0.03×10^(-2))x+2.32×10^(-2)(R^2=0.9236,P<0.01)。结论:在低剂量电离辐射作用下,53BP1焦点水平具有较好的剂量-效应关系。 徐岩 封江彬 陆雪 李爽 高玲 田梅 蔡恬静 刘青杰关键词:低剂量照射 免疫荧光 低剂量电离辐射敏感生物标志物的筛选 随着科学技术的进步,电离辐射在工业、农业、卫生和国防等领域得到广泛应用,极大地促进了社会进步与经济发展.核与辐射技术在给人类带来巨大经济和社会效益的同时,国民接受的辐射剂量也在不断增加,发生各种核与辐射事故的可能性依然存... 刘青杰 李爽 刘强 吕玉民关键词:电离辐射 生物剂量 自动化分析 低剂量电离辐射对人淋巴细胞氧化应激及DNA损伤的影响 2024年 目的:探讨低剂量^(137)Cs γ射线照射后正常人淋巴细胞(AHH-1)是否产生氧化应激及DNA损伤,并引发DNA修复。方法:以剂量率为8.32 mGy/min的^(137)Cs γ射线照射AHH-1细胞,剂量分别为0(未照射)、0.01、0.02、0.05、0.075、0.1和0.2 Gy,照射后分别培养1、24、48和72 h。采用CCK-8试剂盒检测细胞存活率变化;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化损伤水平;免疫荧光方法分析γH2AX和53BP1焦点形成情况;实时荧光定量PCR方法检测DNA损伤修复相关基因CDKN1A、DDB2和POLH的mRNA表达水平变化。结果:与未照射组相比,照射后24和48 h,各剂量组细胞存活率显著增强(P<0.05);照射后48 h,MDA水平和SOD活性在0.2 Gy剂量组发生显著变化(P<0.05);0.02~0.075 Gy和0.2 Gy剂量组ROS相对荧光强度显著升高(P<0.05);0~0.2 Gy γ射线照后1 h,γH2AX和53BP1焦点数量随剂量增加而增加,且具有明显的剂量-效应关系(P<0.01);与未照射组相比,照射后48 h,DDB2和POLH mRNA相对表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:低剂量电离辐射引起人淋巴细胞产生氧化应激和DNA损伤,并促进DNA损伤修复相关基因在转录水平发生改变。 孙鑫 李爽 陆雪 蔡恬静 刘雅 刘青杰 张伟关键词:电离辐射 Γ射线 人淋巴细胞 氧化应激 DNA损伤 性别和年龄对60Co γ射线照射离体人外周血辐射敏感基因mRNA表达的影响 被引量:6 2019年 目的:探讨性别和年龄因素对电离辐射诱导的离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达变化的影响。方法:采集30例健康人离体外周血,以剂量率为1 Gy/min的60Coγ射线进行照射,照射剂量分别为0.5、1、2、3、4、6和8 Gy(以0 Gy为阴性对照组),照射后培养12 h,应用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测18个辐射敏感基因的mRNA表达水平变化,分析性别和年龄因素对这些基因mRNA表达水平的影响。结果:与阴性对照组相比,各剂量γ射线照射组人外周血18个辐射敏感基因的mRNA表达水平均明显增加,并且呈剂量-效应关系(R2=0.63~0.97,P<0.05)。在相同照射剂量,MDM2、XPC、FDXR、DDB2、ASTN2和TNFSF4 mRNA相对表达水平在不同个体之间存在较大的差异。女性外周血中BAX、TNFRSF10B、ASTN2、TNFSF4、POLH和GADD45A mRNA相对表达水平均高于男性,在0.5~8 Gy照射剂量范围内具有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。MDM2、FDXR、DDB2和RPS27L mRNA表达水平在不同年龄组间(20~29岁、30~39岁、40~49岁和50~60岁)存在差异(P<0.05或P<0.01)。结论:离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达水平的变化存在个体间差异,且与受照者性别和年龄相关。 李爽 陆雪 封江彬 田梅 蔡恬静 刘青杰关键词:电离辐射 性别 基于代谢组学方法筛选大鼠血浆辐射敏感代谢物 被引量:2 2020年 目的:筛选大鼠血浆辐射敏感代谢物并探索其代谢通路,为辐射损伤生物标志物研究提供科学依据。方法:用60Coγ射线对20只大鼠进行全身照射,照射剂量分别为0、1、3、5 Gy,剂量率为1 Gy/min,采用基于液相色谱质谱串联平台的非靶向代谢组学方法,检测大鼠受照7 d后血浆中代谢物的变化。结果:大鼠受照后,筛选出血浆中11个辐射敏感代谢物,主要涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢、初级胆汁酸生物合成等代谢通路。十八二烯酰基肉碱、十八一烯酰基肉碱、十六酰基肉碱、牛磺酸、L-犬尿氨酸及胞嘧啶随受照剂量的上升而显著下降(P<0.05),具有明显的剂量-效应关系。结论:大鼠受到γ射线照射后,血浆中代谢物水平发生显著变化,有6个代谢物具备成为辐射生物剂量计的基础条件。 赵骅 陆雪 蔡恬静 李爽 田梅 刘青杰关键词:代谢组学 电离辐射 生物标志物 60Co γ射线照射正常人外周血基因组合表达模型的建立 被引量:1 2018年 目的 探讨基因组合表达模型作为辐射生物剂量计的可行性。方法 0~8 Gy 60Co γ射线照射正常人外周血,利用实时荧光定量PCR检测10个辐射敏感基因表达变化,应用逐步回归方法建立基因组合表达模型;双盲法验证模型估算剂量的准确性。结果 照后6和12 h,10个辐射敏感基因的表达水平随受照剂量的增加而增加,均呈现良好的剂量-效应关系(R2=0.61~0.97,P〈 0.05);TNFSF4、PHPT1和FDXR基因相对表达量存在较大的个体间差异;照后6 h,PCNA、CCNG1、TNFSF4、PHPT1、GADD45A和FDXR建立的基因组合表达模型R2为0.88(F=54.8,P〈0.001);照后12 h,PCNA、CCNG1、TNFSF4、MDM2、GDF15和TNFRSF10B建立的基因组合表达模型R2为0.82(F=42.767,P〈0.001);各时间点基因组合表达模型估算的受照剂量均接近于真实照射剂量。结论 基因组合表达模型具备作为辐射生物剂量计的基本条件。 李爽 封江彬 陆雪 田梅 刘青杰关键词:基因表达 生物剂量计 电离辐射 一种用于研究UVB照射致早衰的原代黑素细胞培养方法 一种用于研究UVB照射致早衰的原代黑素细胞培养方法,涉及放射生物学、细胞生物学技术领域。为了培养具有更高灵敏性的原代黑素细胞,本发明提供了下述方法:将包皮样本浸泡,剪去多余组织,将皮肤样本切成条状;转移到有盖器皿中,加入... 高玲 闫娟 刘青杰 田梅 田雨汀 陆雪 李爽 蔡恬静文献传递