李炎炎
- 作品数：24 被引量：12H指数：2
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省卫生厅重点科研课题江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学艺术机械工程更多>>
- 微小RNA-140-5p抑制胶质瘤细胞株U251、U87增殖和侵袭性的研究被引量：2
- 2015年
- 目的 分析微小RNA（miRNA,miR）-140-5p在人脑胶质瘤组织中的表达水平,观察miR-140-5p对胶质瘤细胞株增殖、凋亡与侵袭的影响.方法 通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测人脑胶质瘤组织与U251、U87MG细胞株中miR-140-5p的表达;用脂质体将miR-140-5pmimics转染至U251与U87MG细胞,同时设立空白及阴性对照组,Real-time PCR检测转染前后miR-140-5p在细胞中的表达水平.应用荧光显微镜观察转染效率,细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期与凋亡;Transwell实验判断U251、U87MG的侵袭能力.结果 miR-140-5p在人脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞株中表达明显低于非瘤脑组织,并且随着肿瘤恶性程度不断增加,miR-140-5p表达逐渐降低（非瘤脑组织、低级别与高级别胶质瘤相对表达量分别为1.013、0.375和0.130,P＜0.01）.U251和U87MG细胞转染miR-140-5p mimics后细胞的增殖与侵袭能力明显受到抑制,其中相对增殖率分别为61.22％与58.44％,穿膜细胞数亦减少了约50％,细胞周期阻滞于G0/G1期（P＜0.01）.转染miR-140-5p mimics后胶质瘤细胞株的凋亡率明显升高＞12％（P＜0.01）.结论 miR-140-5p在胶质瘤组织中低表达,过表达miR-140-5p可以抑制胶质瘤细胞株U251和U87MG的增殖,阻滞细胞周期,促进其细胞凋亡,并可有效抑制其侵袭力.
- 吴淳李炎炎李学涛吴至武程哲韩勇孙婷周幽心杜子威
- 关键词：胶质瘤细胞增殖
- MiR-218-5p抑制A2B5^+/CD133~–亚群胶质瘤干细胞的干性维持及侵袭性
- 2015年
- 该文目的为探讨miR-218-5p对表达A2B5+/CD133–的胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)亚群干性维持及侵袭性的影响。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测人脑胶质瘤组织及细胞株中miR-218-5p的表达;上、下调miR-218-5p慢病毒转染表达A2B5+/CD133–的胶质瘤干细胞SHG-139s,二次球体形成实验、免疫荧光及q RT-PCR检测SHG-139s的标志物A2B5、CD133、Nestin、PLAGL2、ALDH1及SOX2的表达变化;Transwell实验、q RT-PCR及免疫荧光检测SHG-139s基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的表达变化。结果显示,miR-218-5p在胶质瘤中低表达,上调miR-218-5p可显著降低SHG-139s成球率,同时明显降低SHG-139s中上述干细胞标志物的表达;Transwell实验显示,上调miR-218-5p能显著抑制SHG-139s的侵袭能力,使其MMP9表达受到明显抑制。因此,miR-218-5p可能作为抑癌基因在胶质瘤中发挥作用,高表达的miR-218-5p可抑制SHG-139s的干性维持及其侵袭能力。
- 吴至武王杭州李炎炎李学涛孙婷陈桂林谢学顺周幽心杜子威
- PTEN对胶质瘤细胞侵袭和凋亡的影响的实验机制研究
- 目的:探讨抑癌基因PTEN在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞侵袭及凋亡的影响.方法:收集胶质瘤组织标本,制作组织芯片后行免疫组化染色检测PTEN在不同胶质瘤级别中的表达;提取不同级别胶质瘤组织及正常脑组织的RNA,行R...
- 李学涛李炎炎谢学顺孙婷王杭州陈桂林黄煜伦周幽心杜子威
- 关键词：PTEN胶质瘤凋亡
- miR-16通过调控NF-κB1／MMP-9信号通路抑制胶质瘤侵袭的实验研究被引量：7
- 2014年
- 目的探讨miR-16、核转录因子-κBI（NF—κB1）在人脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤细胞株SHG44、U87和U373侵袭生长的相关性。方法（1）收集苏州大学第一附属医院神经外科自2000年1月至2011年1月手术切除的29例胶质瘤组织和同期行减压术切除的6例正常脑组织标本，qRT-PCR检测标本miR-16、NF—κB1的表达。（2）将体外培养的U87、U373和SHG44细胞分为空白组、无义序列转染组，miR。16模拟物转染组，分别转染miR-16无义序列和miR-16模拟物，48h后qRT-PCR检测细胞miR-16、NF—κB1的表达；Transwell实验检测细胞侵袭能力；72h后Western blotting检测细胞NF—κB1、基质金属蛋白酶（MMP）-9和MMP-2蛋白的表达。（3）荧光素酶实验检测miR-16对NF-κB1基因的靶向调控作用。（4）以U87细胞作为阴性对照组，构建稳定表达miR-16的U87细胞株并建立颅内肿瘤、皮下肿瘤裸鼠模型（U87-miR-16组），免疫荧光、免疫组化分别检测2组裸鼠颅内肿瘤MMP9和Ki-67、NF-κB1、MMP9蛋白的表达；测量2组裸鼠皮下肿瘤的体积并绘制其生长曲线。结果（1）qRT—PCR显示miR-16在人脑胶质瘤中表达低于正常脑组织，且miR-16在Ⅰ级、Ⅱ和Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤中的表达量逐渐降低；NF-κB1胶质瘤中的表达高于正常脑组织，且NF—κB1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的表达量逐渐增高，差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）与空白组和无义序列转染组比较，miR-16模拟物转染组细胞miR-16表达增加，Ⅳ-KBl基因表达下降，侵袭能力下降，NF—κB1和MMP-9蛋白的表达下降，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（3）荧光素酶实验显示pMIR-NF-κB1的荧光标准化比值明显高于pMIR-NF—κB1＋pre-miR-16组，差异有统计学意义（P〈0.05）。（4）与U87阴性对照组比较，U87-miR-16组模型后第24-42天裸鼠皮下肿瘤的体积较小，差异有统计学意义（P〈0.05）。与U87阴性
- 杨天权吴庭枫李炎炎赵朝辉黄煜伦周幽心杜子威
- 关键词：神经胶质瘤侵袭性
- 人脑胶质母细胞瘤中核因子-κB抑制因子α多态性的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人脑胶质母细胞瘤中核因子-κB抑制因子d（NFKBIA）蛋白水平及其与NFKBIA mRNA表达水平、变异、拷贝数变异的关系。方法收集24例胶质母细胞瘤组织标本，应用聚合酶链反应（PCR）扩增及直接测序检测NFKBIA变异，Western blot检测NFKBIA蛋白表达，实时定量PCR检测NFKBIA拷贝数变异及mRNA表达。结果胶质母细胞瘤中存在NFKIBA单核苷酸多态性rs1957106（CC／CT／TT）；胶质母细胞瘤中NFKBIA蛋白表达量在CT基因型和TT基因型显著低于CC基因型：CT和TT：（10．1±1．2）％、CC：（40．1±2．8）％；胶质母细胞瘤中NFKBIA蛋白表达量和NFKBIA mRNA表达水平均显著低于非瘤组织：肿瘤组织中NFKBIA的相对表达分别为：（28．2±12．5）％、（0．44±0．19），非瘤组织中NFKBIA的相对表达分别为：（64．3±1．7）％、（0．78±0．12）；而且含有CT基因型和TT基因型的胶质母细胞瘤NFKBIA mRNA表达水平明显低于含有CC基因型的胶质母细胞瘤：CT和TT：0．31±0．11，CC：0．54±0．18；P〈0．01；含有CT基因型或TT基因型的10个胶质母细胞瘤中有7个的拷贝数显著低于含有CC基因型的肿瘤，而这些胶质母细胞瘤同时有低NFKBIA蛋白及低NFKBIA mRNA表达水平。结论NFKBIA单核苷酸多态性rs1957106与NFKRTA低蛋表达、低拷贝数密切相关。
- 赵朝辉李炎炎吴庭枫杨天权陈桂林谢学顺周幽心杜子威
- 关键词：胶质母细胞瘤核因子-ΚB
- 下调RNF138基因可促进胶质母细胞瘤细胞凋亡的研究
- 目的:RNF138是环指结构蛋白家族中的一员,参与到诸多细胞生理功能中.我们课题组前期研究结果表明,临床上一定比例的胶质瘤患者的肿瘤组织中,RNF138基因异常高表达,但是此基因异常高表达的作用,尚不清楚.为进一步探明这...
- 申海涛许威陈三送李学涛李炎炎谢学顺王杭州陈桂林周幽心杜子威
- 关键词：胶质瘤原位移植凋亡
- 上调LNC-ZNF281影响胶质瘤干细胞侵袭、凋亡和干性维持的研究
- 周幽心胡园李炎炎孙婷
- 建立人源A2B5+/CD133–的胶质瘤亚群干细胞样细胞株的实验研究
- 2018年
- 胶质细胞瘤(GBM)是人类最常见的原发性脑肿瘤,并且是人类癌症中最致命的肿瘤之一。目前学术界普遍认为,胶质瘤细胞的异质性和耐药性一定程度上归因于胶质瘤干细胞样细胞的存在。该研究通过对胶质瘤组织进行原代培养、分选纯化、单克隆法成功建立A2B5+/CD133–胶质瘤细胞株SHG-ZW,再干细胞逆转培养成胶质瘤干细胞样细胞株SHG-ZWs。细胞免疫荧光检测SHG-ZWs显示,其高表达干性标记物A2B5、nestin、Sox2等,不表达CD133;体外二次球体形成表明,SHG-ZWs可以在体外进行自我更新,不断增殖;诱导分化后行免疫荧光,检测到SHG-ZWs可向神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化;裸鼠体内移植瘤实验显示,SHG-ZWs具有成瘤性。该研究表明,可通过分选纯化、单克隆法从实体肿瘤中建立稳定传代的A2B5+/CD133–胶质瘤干细胞样细胞株,为胶质瘤干细胞样细胞的研究、人源GBM肿瘤组织原代培养以及胶质瘤干细胞样细胞的靶向性治疗提供细胞工具。
- 汪庆李炎炎韩笑笑姚林孙婷谢学顺陈桂林冯鸣周幽心
- 关键词：胶质瘤胶质瘤干细胞
- 人源胶质瘤细胞株的建立及其生物学特性分析被引量：1
- 2015年
- 目的：建立新的胶质瘤细胞株,为肿瘤研究提供具备新特性的细胞工具。方法临床手术来源的胶质瘤组织进行培养传代,第10代后克隆建立细胞株（ SHG139）。经免疫荧光细胞化学技术检测蛋白表达,流式细胞术（ FCM）分析细胞增殖和细胞周期,染色体核型分析SHG139细胞的生物学特性。应用神经干细胞培养液（ NSCM ）培养 SHG139细胞,使其转化成胶质瘤干细胞球（SHG139s）,并检测SHG139s细胞的干性标志物。诱导分化SHG139s细胞后,检测分化细胞的胶质前体神经节苷脂（A2B5）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、β-Ⅲ tubulin和半乳糖神经酰胺（GalC）的表达情况,进一步比较SHG139和SHG139s细胞颅内原位移植瘤的病理特征。结果成功建立的SHG139第20代和第60代细胞A2B5、GalC、GFAP、酸性钙结合蛋白（S-100）和vimentin表达均为阳性,与肿瘤组织的免疫组化结果及病理特征一致。 SHG139细胞传代后24 h内增殖显著,染色体总数为68条,多倍体较多。 SHG139s细胞中A2B5、巢蛋白（nestin）和神经元-神经胶质2型抗原（NG2）阳性比例分别为（84.12±9.96）%、（73.86±5.01）%和（73.37±2.09）%。 SHG139s细胞诱导分化后,贴壁细胞中GFAP、β-Ⅲ tubulin 和 GalC 的阳性比例分别为（92.89±2.24）%、（64.85±4.09）%和（33.57±4.14）%。 SHG139s细胞颅内移植瘤呈胶质肉瘤和星形-少枝胶质细胞瘤的多种形态,肿瘤血管和瘤周血管以鼠源性为主。结论 SHG139为星形胶质瘤细胞株, NSCM 培养可成功获得 SHG139s。SHG139s为A2B5＋ CD133-亚群细胞,具有自我更新和多向分化潜能。与SHG139细胞颅内移植瘤比较,SHG139s细胞颅内移植瘤具有更强的恶性度和侵袭性。
- 陈桂林李炎炎谢学顺陈金明吴庭枫李学涛王杭州周幽心杜子威
- 关键词：神经胶质瘤细胞移植CD133
- NOD/SCID小鼠饲养繁殖及其在脑胶质瘤研究中初步应用
- 目的:利用NOD/SCID小鼠具有T、B淋巴细胞联合免疫缺陷,NK细胞活性低下,无循环补体以及存在巨噬细胞和抗原提呈细胞功能损害等特性,建立人脑胶质母细胞瘤原代细胞移植瘤模型.方法:本实验室从JACKSONLAB引进的N...
- 谢学顺黄煜伦陈桂林李炎炎孙婷申海涛周幽心杜子威
- 关键词：NOD/SCID小鼠胶质母细胞瘤原位移植
