李晓玲
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中山大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：中山市科技计划项目中国博士后科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 临床治疗用人骨髓间充质干细胞保存条件的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨不同输注液、保存时间及温度对临床治疗用人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)存活率、表型及增殖能力等状况的影响。方法采用密度梯度离心法从人骨髓分离培养hBMSCs,流式细胞术检测细胞表型,并进行成骨、成脂等多向分化能力鉴定。在4℃和25℃条件下,将培养的第3代hBMSCs保存在3种临床常用输注液(9g/L氯化钠注射液、5%人血清清蛋白氯化钠注射液、50g/L葡萄糖氯化钠注射液)中,检测hBMSCs在不同时间点(0.5、1.0、2.0、4.0、6.0h)的细胞存活率、细胞表型和存活细胞的增殖能力。结果 hBMSCs间充质干细胞形态为均一的长梭形,表达CD29、CD105,不表达CD34。成脂诱导2周,油红O染色,可见脂滴为红色。成骨诱导3周,茜素红S染色可见大量橘红色钙结节。4℃和25℃条件下,保存不同时间后,5%人血清清蛋白氯化钠注射液组细胞存活率和增殖能力均高于其余2组。同一组细胞4℃条件下保存不同时间后的增殖能力强于25℃条件下保存的细胞。不同输注液、保存温度及保存时间对细胞表型没有显著影响。结论 4℃条件下,将间充质干细胞保存在5%人血清清蛋白氯化钠注射液中0.5h内回输对细胞活力影响最小。
- 陈京季明芳李晓玲方慧云余元龙程伟民
- 关键词：间充质干细胞存活率增殖能力
- 肿瘤可溶性抗原联合超抗原致敏的DC诱导CIK对鼻咽癌细胞杀伤作用的研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨肿瘤可溶性抗原联合超抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)诱导细胞因子激活的杀伤细胞(cytokine-induced kill cells,CIK)对鼻咽癌细胞CNE-1的体外杀伤作用。方法分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),采用GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导培养DC,采用CD3Ab、IFN-γ、IL-2、IL-1等细胞因子诱导培养CIK细胞。鼻咽癌肿瘤可溶性抗原(tumor soluble antigen,TSA)联合超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素C(staphylococcal enterotoxin C,SEC)致敏DC;将未负载抗原的DC、单纯负载鼻咽癌抗原TSA的DC、单纯负载超抗原SEC的DC及负载TSA和SEC的DC分别与CIK细胞共同孵育,诱导产生特异性的细胞毒性T细胞(cyctotoxic T lymphocyte,CTL)(各组效应细胞分别简称为DC-CIK、TSA-DC-CIK、SEC-DC-CIK、TSA-SEC-DCCIK);采用CCK-8法检测各效应细胞对靶细胞CNE-1的杀伤作用。结果成功培养出高表达HLA-DR、CD1a、CD80的DC;效靶比为50∶1时,TSA-SEC-DC-CIK对靶细胞CNE-1的杀伤率为85.46±2.12%,明显高于DC-CIK(51.36±0.61%)、TSA-DC-CIK(63.15±2.25%)及SEC-DC-CIK(65.32±3.24%)。结论肿瘤可溶性抗原联合超抗原致敏的DC诱导CIK对鼻咽癌细胞有高效特异杀伤作用。
- 李付贵陈京李晓玲方慧云季明芳程伟民
- 关键词：超抗原鼻咽癌
- 人外周血树突状细胞的诱导培养及冻存被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨人外周血树突状细胞(DC)的诱导培养及冻存方法和意义。方法:通过树突状细胞的分离和培养、抗原标本前处理、抗原的装载、实验分组、细胞冻存等,摸索出树突状细胞诱导扩增以及促进成熟的优化实验方案。结果:外周血单个核细胞可作为DC的来源,GM-CSF和IL-4可诱导其前体细胞向DC分化,添加促成熟细胞因子可以让细胞维持细胞生物活性。结论:人外周血DC细胞的诱导培养及冻存具有重要意义。冷冻DC细胞保持了它的特性,但会因冻融过程生物特性有所减低,为此在应用冻存DC细胞时应考虑增加输入细胞量。
- 方慧云程伟民季明芳何洁冰李晓玲
- 关键词：树突状细胞冻存
- 人外周血DC细胞的冻存
- 2007年
- 目的:探讨人外周血DC细胞的冻存方法和意义。方法:通过树突状细胞的分离和培养,抗原标本前处理,抗原的装载,实验分组,细胞冻存等,研究树突状细胞冻存情况。结果:冷冻DC细胞保持了它的特性,但会因冻溶过程中生物特性有所减低。结论:我们在应用冻存DC细胞时应考虑增加输入细胞的量。
- 方慧云程伟民季明芳何洁冰李晓玲
- 关键词：外周血树突状细胞冻存
- CIK细胞治疗晚期大肠癌的临床研究被引量：4
- 2014年
- 目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)治疗晚期大肠癌的疗效。方法经确诊并采用标准治疗方案治疗的晚期大肠癌患者30例作为观察组,取外周血分离单个核细胞(PBMC),体外细胞因子诱导培养CIK细胞,流式细胞仪检测细胞表型,接受CIK细胞免疫治疗。以30例采用标准治疗方案治疗而未经CIK治疗的晚期大肠癌患者作为对照组。结果观察组经CIK细胞治疗后检测T淋巴细胞亚群,发现CD3+、CD3+CD4+、CD56+(NK)效应细胞的比例和CD4+/CD8+比值显著上升,CD3+CD56+效应细胞比例下降,无进展生存期为(50.9±10.8)个月,生存期为(62.5±13.8)个月;对照组无进展生存期为(26.2±8.3)个月,生存期为(35.6±10.2)个月,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论经CIK细胞治疗后晚期大肠癌患者免疫功能增强,无进展生存期及生存期延长。
- 方慧云程伟民李晓玲季明芳
- 关键词：晚期大肠癌免疫治疗
