李志中
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪γ-干扰素在重组杆状病毒中的表达及其抗病毒活性的测定被引量：8
- 2007年
- 研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有猪γ-干扰素(porcine interferon-γ,PoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-PoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-PoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达PoIFN-γ的重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ。以抗PoIFN-γ单克隆抗体为一抗进行Western blot、间接免疫荧光(IFA)及间接ELISA检测,结果表明PoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ感染的昆虫细胞中获得正确表达。抗病毒活性试验显示,重组杆状病毒表达rPoIFN-γ能有效抑制水疱性口炎病毒(VSV)在猪肾细胞系(PK-15)的复制,rBac-PoIFN-γ感染昆虫细胞培养上清抗病毒活性为2×104抑制单位(IU)/mL,其抗病毒活性可以被鼠抗原核表达重组PoIFN-γ免疫血清有效阻断。结果表明rPoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ在感染昆虫细胞获得有效表达,并具有高效抗病毒活性。
- 秦立廷王喜军胡森李志中陈伟业葛金英刘思当步志高
- 关键词：Γ-干扰素重组杆状病毒抗病毒活性
- 牛γ-干扰素在重组杆状病毒中的表达及其抗病毒活性的测定被引量：8
- 2007年
- 研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有牛γ-干扰素(Bovine interferon-γ,BoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-BoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-BoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达BoIFN-γ的重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ。采用抗BoIFN-γ单克隆抗体作为一抗进行间接免疫荧光(IFA)及间接ELISA检测,表明BoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。利用VSV*GFP-MDBK细胞系统测定rBoIFN-γ抗病毒活性,重组杆状病毒表达重组BoIFN-γ(rBoIFN-γ)能有效抑制水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上的复制,rBac-BoIFN-γ感染sf9昆虫细胞上清抗病毒活性为2×105IU/mL,而且其抗病毒活性可以被鼠抗原核表达重组BoIFN-γ免疫血清阻断。结果表明:rBoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ感染的sf9昆虫细胞中获得良好表达,并具有高效抗病毒活性。
- 秦立廷王喜军胡森刘思当步志高李志中陈伟业葛金英
- 关键词：Γ-干扰素重组杆状病毒抗病毒活性
- 抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量抗原ELISA检测方法的建立
- 本文对抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量抗原ELISA检测方法的建立进行了研究。结果表明：本实验制备的抗鸡γ-干扰素单克隆抗体性质稳定，腹水单抗效价高，利用HRP，FITC及生物素标记的单抗IgG的效价均达到有效的使用...
- 李志中
- 关键词：单克隆抗体抗体检测
- 文献传递
- 抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立被引量：5
- 2007年
- 将原核表达重组鸡γ-干扰素（rChIFN-γ）以100μg/只剂量免疫8周龄BALB／c小鼠，4次免疫后进行细胞融合，以昆虫细胞表达重组鸡γ-干扰素为检测抗原，筛选出阳性克隆株，经有限稀释，获得1株稳定分泌抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分泌抗体亚型为IgG1型，轻链为K链，命名为G1株。Western blot检测显示，该单克隆抗体与原核表达和昆虫细胞表达的rCbIFN-γ均具有良好的免疫反应原性。昆虫细胞表达rChIFN-γ经该G1单克隆抗体作用后，失去抑制水疱性口炎病毒（VSV）在鸡胚成纤维细胞（CEF）复制的能力？利用纯化的单克隆抗体和昆虫细胞表达rChIFN-γ建立相对定量ELISA检测方法，取吸光度值（Y）对昆虫细胞表达rChIFN-γ的抗病毒活性单位对数（X）作回归曲线，回归方程为Y=0．1164^＊X-0．1281，回归系数R=0.9539，具有良好的线性关系.
- 李志中秦立廷王喜军陈伟业范蕾李培锋步志高
- 关键词：单克隆抗体
