李剑
- 作品数：13 被引量：79H指数：6
- 供职机构：兰州大学草地农业科技学院草地农业生态系统国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金兰州市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小花碱茅HKT2;1基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析被引量：15
- 2013年
- Na+是盐渍化土壤中主要的毒害离子,对植物生长发育和农业生产构成严重威胁。高亲和性K+转运蛋白HKT2;1在控制高等植物Na+吸收,增强K+的选择性,进而提高耐盐性方面发挥着重要作用。本研究以拒盐型牧草小花碱茅为材料,采用RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)方法克隆到HKT2;1基因,并命名为PutHKT2;1。该基因全长1 919bp,包含1个长1 638bp的开放阅读框(ORF),编码546个氨基酸,推测分子量为60.5kDa,等电点PI为9.07。与其他植物HKT2;1氨基酸序列同源性多在66%以上,核苷酸序列同源性都在75%以上。PutHKT2;1可能跨膜11次,二级结构分析表明,PutHKT2;1蛋白含有47.99%α-螺旋、5.13%β-转角、31.87%无规则卷曲和15.01%延伸链。PutHKT2;1基因全长cDNA的克隆及其生物信息学分析为进一步揭示小花碱茅拒盐的分子机制奠定了基础。
- 李剑张金林王锁民郭强
- 关键词：小花碱茅克隆生物信息学分析耐盐性
- 当归肌动蛋白基因片段的克隆及序列分析被引量：14
- 2012年
- 目的对当归肌动蛋白(Actin)基因进行克隆及序列分析。方法根据已经克隆的植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以当归根部总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增Actin基因片段并连接到pMD19-T载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果得到一段598 bp的序列,序列分析表明,该片段编码198个氨基酸,与高等植物Actin基因核苷酸序列同源性在83%以上,与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达94%以上。结论首次从当归中克隆出了Actin基因,为有效利用该基因奠定了基础。
- 吴永娜胡静王引权李剑张金林
- 关键词：当归肌动蛋白基因克隆RT-PCR
- 小花碱茅HKT1;4基因片段的克隆与序列分析被引量：2
- 2011年
- 为研究小花碱茅(Puccinellia tenuiflora)拒Na+的分子机制,根据GenBank中已登录的植物HKT1;4基因保守序列设计一对简并引物,从小花碱茅幼根中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增出HKT1;4基因片段并连接到pMD19-T Simple载体上,经亚克隆,PCR阳性检测后测序,得到一段长629 bp的序列。序列分析表明,该片段编码209个氨基酸,与GenBank中注册的高等植物HKT1;4基因核苷酸序列同源性在74%以上,与HKT1;4蛋白氨基酸序列同源性在60%以上,最后将其命名为PutHKT1;4。
- 李剑赵常玉吴永娜包爱科马清郭强王锁民张金林
- 关键词：小花碱茅克隆
- 拒盐型牧草小花碱茅PutHKT2;1基因表达模式分析被引量：2
- 2012年
- 本研究以拒盐型盐生牧草小花碱茅(Puccinellia tenuiflora)为材料,采用RT-PCR方法对小花碱茅PutH-KT2;1基因表达模式进行研究,以期阐明其在盐胁迫下拒Na+的分子机制。结果表明,PutHKT2;1基因表达存在组织特异性,主要在根中表达,地上部表达量相对较低;K+饥饿处理条件下,在根中的表达量最高;在1mmol.L-1 K+或无K+条件下,根中PutHKT2;1表达量随着盐浓度的增大而减少。由此推断,PutHKT2;1蛋白主要在根部发挥作用,主要用于控制Na+吸收,增强K+选择性吸收能力,从而维持地上部较高的K+/Na+,提高其耐盐性。
- 李剑张金林
- 关键词：小花碱茅耐盐性
- 小花碱茅HKT1;4基因片段的克隆与序列分析
- 为研究小花碱茅拒Na+的分子机制,根据GenBank中已登录的植物HKT1;4基因保守序列设计一对简并引物,从小花碱茅幼根中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增出HKT1;4基因片段并连接到pMD19-T Simple...
- 李剑赵常玉吴永娜包爱科马清郭强王锁民张金林
- 关键词：分子机制基因片段基因克隆
- LEA蛋白与植物抗逆性被引量：17
- 2010年
- 植物受到逆境胁迫后,LEA蛋白大量表达,可以减轻逆境引起的伤害。本文对LEA蛋白的种类、特性和功能,LEA蛋白基因结构及其表达调控,以及LEA基因表达和LEA蛋白积累与植物抗逆性的关系等方面的研究进展作了简要综述。
- 李剑赵常玉张富生王锁民包爱科张金林
- 关键词：LEA蛋白基因表达逆境胁迫抗逆性
- 党参肌动蛋白基因片段的克隆及序列分析被引量：11
- 2011年
- 目的对党参肌动蛋白(actin)基因进行克隆及序列分析。方法根据已经克隆的植物actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以党参根部总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增actin基因片段并连接到pMD19-T Simple载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果得到一段603 bp的序列,序列分析表明,该片段编码200个氨基酸,与高等植物actin基因核苷酸序列同源性在78%以上,与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达90%以上。结论首次从党参中克隆出了actin基因,为有效利用该基因奠定了基础。
- 吴永娜李剑许瑞王引权张延红王惠珍张金林
- 关键词：党参肌动蛋白基因克隆RT-PCR
- HKT蛋白与植物耐盐性研究进展被引量：5
- 2012年
- 盐胁迫是一种严重影响植物生长的非生物胁迫,植物在长期进化过程中形成了各种机制来抵御和适应盐胁迫。高亲和性钾离子转运蛋白(HKT)是植物中普遍存在的一类蛋白,对高等植物体内Na+再循环,维持植株地上部特别是叶片中的低Na+浓度和高K+/Na+具有重要作用。本研究对HKT蛋白的分子特性、结构与功能及其与植物耐盐性的关系进行了综述。
- 赵常玉李剑张金林王锁民
- 关键词：盐胁迫耐盐性
- 小花碱茅HKT1;4基因片段的克隆与序列分析
- 为研究小花碱茅(Puccinellia tenuiflora)拒Na+的分子机制，根据GenBank中已登录的植物HKT1;4基因保守序列设计一对简并引物，从小花碱茅幼根中提取总RNA，采用RT-PCR方法扩增出HKT1...
- 李剑赵常玉吴永娜包爱科马清郭强王锁民张金林
- 关键词：小花碱茅钠离子分子机制
- 文献传递
- 沙枣中几种金属元素含量分析
- 采用灰化、消化方法对沙枣(Elaeagnus angustifolia)进行处理,应用火焰原子吸收光谱法对沙枣果实消化液中的Na、Ca、Mg、Zn、Fe、Cu、Ni、Mn、Cd 9种金属元素的含量进行分析测定.研究确定了...
- 付如刚孟嫣李剑雷玉明徐新健刘维涛
- 关键词：沙枣金属元素原子吸收光谱法
