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李剑: 作品数：27 被引量：62H指数：5; 供职机构：河北医科大学基础医学院更多>>; 发文基金：河北省科学技术研究与发展计划项目河北省自然科学基金河北省医学科学研究重点课题更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>

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长链非编码RNA在肿瘤中的研究进展被引量：9: 2018年; 长链非编码RNA(lncRNA)是指真核细胞中转录本长度超过200 nt的非编码RNA,几乎不具有编码蛋白质的功能。早年对lncRNA所知甚少,认为其不具有任何生物学功能,是转录过程的副产物。然而随着二代测序技术的发展,越来越多的lncRNA被识别。lncRNA作为人类基因组重要的调控分子,在生物体内起调节作用,其功能的紊乱与肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌等疾病的发生发展密不可分。本文结合国内外最新研究报道,对lncRNA在肿瘤中的研究进展作一综述。; 王馨悦李剑; 关键词：长链非编码RNA 肺癌肝癌胃癌乳腺癌

食管癌患者差异基因cDNA文库的建立及锌指蛋白14（ZNF14）在食管癌组织中的表达及临床意义: 食管癌是中国最常见恶性肿瘤之一，而河北省磁县更是我国食管癌高发地区之一。据调查，在我国食管癌高发区食管癌具有明显阳性家族史和家族聚集性，家族史阳性者可高达60％。在前期流行病调查中，70％的磁县食管癌患者具有明确癌性家族...; 李剑; 关键词：食管癌消减杂交锌指蛋白遗传基因; 文献传递

B细胞趋化因子对CVB3融合基因疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1免疫效果的影响: 2010年; 目的:探讨B细胞趋化因子(B-lymphocyte chemoattractant,BLC)对柯萨奇病毒B3融合基因疫苗pcDNA3/C3d3-sVP1免疫效果的影响。方法:将BALB/c小鼠随机分为4组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/BLC、pcDNA3/C3d3-sVP1和含pcDNA3/BLC与pcDNA3/C3d3-sVP1的混合质粒,于免疫后不同时间检测小鼠血清的中和抗体滴度、特异性CTL杀伤活性;以LD50的CVB3病毒液感染已免疫小鼠,检测小鼠血中病毒滴度,观察存活情况以评价各种疫苗的免疫保护作用。结果:小鼠的中和抗体滴度随免疫次数增加而提高,混合组中和抗体滴度(42.17±1.43)和特异性CTL杀伤率(41.3%±3.51%)均明显高于pcDNA3/C3d3-sVP1组(P<0.05),而血中病毒滴度低于pcDNA3/C3d3-sVP1组;经致死量CVB3感染后,pcDNA3/BLC和pcDNA3/C3d3-sVP1混合免疫的小鼠生存率达44%,生存率高于其他各组。结论:BLC可显著提高C3d3-sVP1基因诱导的特异性免疫应答,增强基因疫苗对机体的免疫保护作用。; 高志云揣侠蓝佳明刘贵霞李剑张永红王永祥; 关键词：柯萨奇病毒B3 基因疫苗

弹性蛋白、原纤维蛋白-1及胶原在腹股沟疝腹横筋膜中的表达与分布: 目的:比较弹性蛋白(Elastin)、原纤维蛋白-1(Fibrillin-1)与胶原在腹股沟直疝及斜疝患者腹横筋膜的表达与分布,以期获得对腹股沟疝尤其直疝病理生理的进一步认识。　　方法:30例腹横筋膜组织取自2008年...; 李剑; 文献传递

SARS-CoV-2 奥密克戎变异株的研究进展被引量：7: 2022年; 严重急性呼吸道综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的新变异株奥密克戎(Omicron,B.1.1.529)因其传染性强和对疫苗的逃逸突变在世界各地引起了广泛关注。SARS-CoV-2变异株的易感染性和抗体抗性主要由病毒刺突(S)蛋白受体结合域(RBD)上的突变决定。然而,对奥密克戎变异株的完整实验评估可能需要数周甚至数月才能完成。在此,研究人员将对奥密克戎株的传染性、疫苗策略以及血清抗体中和活性等方面进行分析,以期为尽快科学了解奥密克戎变异株的关键特性,提早制定长远对策提供思路。; 刘宏凌子旭张净李思雨白天科李剑; 关键词：变异株

柯萨奇病毒B3VP1重组腺病毒载体疫苗rAd/VP22-L-VP1的构建及表达: 2012年; 背景:VP22是单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type1,HSV-1)UL49基因编码的碱性蛋白质,具有蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD),能够把与之融合的蛋白或与之结合的DNA等大分子跨膜送递到邻近细胞,在基因靶向预防中表现出优势。目的:构建表达单纯疱疹病毒1型VP22与柯萨奇病毒B3主要中和抗原VP1融合蛋白的重组腺病毒载体疫苗,观察外源基因在HEK293细胞中的良好表达。方法:PCR法扩增目的基因HSV-1VP22和CVB3VP1,经Linker连接,将VP22-L-VP1插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,构建重组穿梭质粒AdTrack-CMV/VP22-L-VP1。再将此载体与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,生成重组腺病毒质粒pAd/VP22-L-VP1,脂质体介导pAd/VP22-L-VP1转染HEK293细胞包装重组腺病毒rAd/VP22-L-VP1。HEK293细胞上进行病毒扩增和滴定并检测外源基因的表达。结果与结论:构建的重组腺病毒载体pAd/VP22-L-VP1经过第4轮扩增,其滴度达到6.77×107pfu/mL,体外感染293细胞可见VP22和VP1融合蛋白的表达。说明实验成功构建并包装重组腺病毒rAd/VP22-L-VP1。; 李剑刘贵霞米立国蓝佳明张永红金玉怀; 关键词：柯萨奇病毒B3 基因疫苗

CVB3VP1核酸疫苗与重组腺病毒Ad/VP1联合应用的免疫效果: 2010年; 目的:观察柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus group B type 3,CVB3)VP1核酸疫苗pcDNA3/VP1与重组腺病毒Ad/VP1联合应用的免疫效果。方法:大量制备pcDNA3/VP1和Ad/VP1,肌肉注射免疫小鼠。4～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分为4组:质粒组,注射pcDNA3/VP1,共3次;腺病毒组,注射Ad/VP1,共2次;质粒/腺病毒组,第1、2次注射pcDNA3/VP1,第3次注射Ad/VP1;PBS对照组。各次注射间隔时间为3周。质粒每次接种100μg/只,腺病毒每次接种4×107pfu/只。用微量中和试验和ELISA法分别检测每次免疫后血清中和抗体和IgG抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性;用致死量病毒感染后检测血中病毒滴度,并观察小鼠的生存情况。结果:各实验组小鼠的中和抗体和IgG抗体水平均随免疫次数增加而提高,末次免疫后,质粒/腺病毒组血清中和抗体和特异性IgG抗体滴度(31.70±1.41,2425.15±1.86)明显高于质粒组(23.78±1.37,918.96±1.36)和腺病毒组(18.88±1.22,800.00±1.63)(P<0.05);各实验组淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性高于PBS对照组(P<0.05);以致死量病毒感染后,质粒/腺病毒组血清病毒滴度低于其他组(P<0.05),生存率高于其他组(P<0.05)。结论:核酸疫苗与重组腺病毒联合应用可以明显提高免疫效果。; 田新利李剑李嘉李伟闫立景温婵张永红王永祥; 关键词：柯萨奇病毒B组3型 VP1基因核酸疫苗重组腺病毒

RSV诱导Hep2细胞自噬在病毒复制中的作用及其机制研究: 李苗马翠卿宋小天张征征李剑魏林

CVB3腺病毒载体疫苗Ad／MDC—VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果被引量：6: 2009年; 目的构建重组腺病毒Ad／MDC—VP1，观察Ad／MDC-VPl与DNA疫苗联合应用的免疫效果。方法构建、包装重组腺病毒Ad／MDC—VP1并检测目的蛋白的表达。BALB／c小鼠随机分为Ad／MDC—VPl、pcDNA3／MDC—VP1、pcDNA3／MDC-VP1＋Ad／MDC—VP1和PBS4组，肌肉注射免疫小鼠。用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3（CVB3）VP1 IgG和中和抗体滴度；CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性；用致死量CVB3攻击小鼠后，检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率。结果成功构建并包装了重组腺病毒Ad／MDC-VPI，检测到目的蛋白的表达。pcDNA3／MDC．VP1＋Ad／MDC—VP1组血清CVB3VP1IgG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤酒生和对小鼠的保护率明显高于其他各组（P〈0．05），血清病毒滴度低于其他各组（P〈0．05）。结论Ad／MDC—VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答。; 闫立景李剑温婵李嘉蓝佳明揣侠高志云张永红金玉怀王永祥; 关键词：柯萨奇病毒B3 腺病毒载体疫苗 DNA疫苗

长链非编码RNA NRAV对RSV细胞内增殖的影响及机制研究: 在哺乳动物基因组中，存在着大量具有低蛋白表达能力的RNA长转录本—长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNAs），它的长度一般在200 nt以上，具有相对保守的二级结构、一定的亚细胞定位和剪接形...; 李剑; 关键词：呼吸道合胞病毒长链非编码RNA 病毒增殖蛋白表达动物模型

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