李俊琳
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：武汉大学基础医学院人体寄生虫学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响
- 2011年
- 目的观察日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌、雄虫体。取雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,将细胞接种于培养瓶中,随机分为对照组和实验组。对照组以常规培养基培养,实验组以常规培养基含100μg/ml雄虫抽提物培养。培养第7天,取实验组与对照组细胞制备标本并观察。结果实验组成熟卵黄细胞出现概率较对照组高,核和胞质染色均匀;卵黄滴内的卵黄球之间界限清晰,数目可数;线粒体数目较少,电子密度较低。未成熟卵黄细胞胞质中粗面内质网较丰富。对照组中卵黄细胞的核和胞质电子密度降低,脂滴数目增多,空泡化程度严重,未见线粒体;成熟卵黄细胞中卵黄滴内的卵黄球之间已发生融合,有卵黄球从中释放出来,成为裸露体;未成熟卵黄细胞中卵黄球与外面包绕的膜之间空隙增大,粗面内质网扩大和囊泡变,核糖体脱颗粒。结论日本血吸虫雄虫抽提物对雌虫卵黄细胞在体外的发育与存活具有促进作用。
- 钟沁萍李俊琳明珍平蒋明森董惠芬
- 关键词：日本血吸虫超微结构
- 鼠胚胎成纤维细胞饲养层及其与肝基质联合对日本血吸虫童虫培养细胞LDH、ACP影响的研究被引量：3
- 2006年
- 目的以乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)为评价指标,研究鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层及其与肝基质联合对日本血吸虫童虫培养细胞代谢的影响。方法实验分MEF与肝基质联合组(后简称联合组)、MEF组、肝基质组和对照组4组。联合组与肝基质组预先铺敷肝基质,MEF组和对照组未铺敷肝基质,将虫龄21d的日本血吸虫童虫细胞分别接种于预先铺敷或未铺敷肝基质的小盖玻片上。肝基质组和对照组细胞培养于RPMI1640含20%小牛血清附加常量抗生素的常规培养基中,联合组与MEF组的细胞培养于有MEF饲养层的常规培养基中。培养第7d,运用酶细胞化学方法对日本血吸虫童虫培养细胞进行LDH、ACP染色,OlympusBX51显微镜下观察并拍照,HIPAS2000图像分析仪测定其含量,并作统计分析。结果4组童虫培养细胞其LDH、ACP活性不同。LDH、ACP着色按联合组、MEF组、肝基质组、对照组依次变浅。定量分析显示,培养细胞的LDH含量,各组之间两两比较差异具显著性(P<0.01);联合组、MEF组、肝基质组培养细胞的ACP含量两两比较存在显著差异(p<0.01),联合组、MEF组与对照组之间比较差异具统计学意义(P<0.01),而肝基质组与对照组之间差异无显著性(P>0.05)。结论MEF饲养层能促进日本血吸虫童虫培养细胞的代谢,并能与肝基质协同促进培养细胞代谢。
- 熊飞李俊琳明珍平钟沁萍董惠芬蒋明森
- 关键词：肝基质酸性磷酸酶
- 雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞最适浓度的筛选被引量：4
- 2006年
- 目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体，无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆，反复冻融3次，离心取上清液，考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌虫卵黄腺段虫体，冷消化法制备细胞悬液，调整细胞数为1×10^9／L后，将卵黄细胞接种于小盖玻片上，RPMI-1640含20％小牛血清培养，根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组（0、10、50、100、150、200mg／L组）。培养第7天，以核仁组织区相关嗜银蛋白（argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins，AgNORs）及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）为评价指标，对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色，Olympus-BH2显微镜观察，输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值。结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加，培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深，至100mg／L时最深,随后又逐渐变浅。图像分析显示，雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组（q10=14．2189、q50=18．3358、q100=35．6491、q150=13．1849、q200=13．8604，P＜0．01；g10=10．3377、q50=11．7532、q100=23．1883、q150=10．2792、q200=9．3052，P＜0．01）。雄虫抽提物100mg／L组与其他各组比较，AgNORs及LDH明显升高（q100=21．4302、q50=17．3132、q150=22．4642、q200=21．7887，P＜0．01；g10=12．8506、q50=11．4351、q150=12．8896、q200=13．8831，P＜0．01）。结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性，其作用的最适质量浓度为100mg/L。
- 李俊琳蒋明森钟沁萍明珍平董惠芬
- 关键词：乳酸脱氢酶
- 鼠胚胎成纤维细胞饲养层及与鼠尾胶联合促日本血吸虫培养细胞贴壁作用的研究被引量：1
- 2006年
- 目的观察鼠胚胎成纤维细胞(MEF)与鼠尾胶及联合对日本血吸虫培养细胞的促贴壁作用。方法灌注法获取21 d虫龄的日本血吸虫虫体,冷消化法制备细胞悬液,调细胞数为1×109／L,并将细胞分别接种于预先铺敷鼠尾胶(鼠尾胶组)、MEF(MEF组)、铺敷鼠尾胶后接种MEF(联合组)和既不铺敷鼠尾胶也不接种MEF(对照组) 的4组培养瓶中培养,培养基为RPMI-1640含20％小牛血清附加常量抗生素。定时计数贴壁细胞数,计算贴壁率。结果随着培养时间从24-48 h,各组日本血吸虫细胞的贴壁率逐渐增高,48 h以后贴壁率开始下降;方差分析显示,同组内不同培养时间细胞贴壁率比较,差异有统计学意义(F=149．22、81．97、232．86、63．05,P<0．01);q检验发现,同组内不同培养时间两两比较差异有统计学意义(P<0．01)。相同培养时间,各组间培养细胞的贴壁率不都相同 (F24=44．65,P<0．01;F48=1 071．489,P<0．01;F72=4 208．35,P<0．01);q检验分析显示,除培养24 h的MEF组与鼠尾胶组细胞的贴壁率差异无统计学意义外(q=0．792,P>0．05),其余两两比较均有统计学意义(P<0．01)。结论 MEF对日本血吸虫培养细胞的贴壁具有促进作用,MEF与鼠尾胶联合对培养细胞的贴壁具有协同作用。
- 李俊琳熊飞钟沁萍明珍平董惠芬蒋明森
