朱丹
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：沈阳农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：辽宁省烟草专卖局科技攻关项目中国烟草总公司科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 烟草突变株SN01、SN02抗PVY~N相关基因的克隆及表达分析
- 烟草抗病突变株SN01、SN02为本实验室筛选获得的高抗PVY~N(potato virus Y vein necrosis strain)的具有自主知识产权的烟草新种质。为了进一步明确其抗PVY~N的分子机制,本文研究...
- 朱丹安梦楠赵艳琴赵秀香吴元华
- 关键词：克隆
- 烟草抗PVY^N突变株SN01的SRAP-PCR反应体系的建立与优化
- 2013年
- 采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素(dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物和DNA)进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是:dNTPs(2.5 mmol/L)3.2μL、Mg2+(25 mmol/L)1.6μL、Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL)0.16μL、引物(10μmol/L)0.6μL、DNA模板120 ng。对该SRAP-PCR反应程序中的退火温度和循环次数筛选表明,最佳退火温度为57℃,循环次数为35次。该优化体系的建立,为进一步对烟草抗PVYN突变株SN01的抗病基因研究提供了可靠基础。
- 李杰朱丹李颖安梦楠赵秀香吴元华
- 关键词：烟草SRAP-PCR
- 烟草抗PVY^N突变株eIF4E基因的克隆及表达差异分析
- 2015年
- 为了明确抗马铃薯Y病毒病的相关基因、进一步揭示其抗病机制,以烟草高抗马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Y vein necrosis strain,PVYN)突变株SN01和SN02为试验材料,研究了突变株的抗病相关基因翻译起始因子4E(e IF4E)在寄主中的抗病作用。结果表明:从抗病突变株SN01和SN02中克隆到目的全长基因,分别命名为e IF4E01与e IF4E02,其开放阅读框ORF长度均为669 bp,编码222个氨基酸;利用MAGA4.1和CLUSTAL软件进行序列同源性比对分析表明,e IF4E01和e IF4E02与已报道的烟草e IF4E(Gen Bank:AY702653.1)基因序列相似度均达到99%,其开放阅读框序列完全一致。并与甜椒、番茄、拟南芥等物种的e IF4E家族基因也具有高度同源性;Real-time PCR结果表明,在PVYN侵染初期(接种后0~9 d),突变株SN01和SN02中的e IF4E基因表达量明显低于其感病亲本NC89和K326。说明这两个抗病突变株中的e IF4E基因的抑制表达与烟草对PVYN的抗性密切相关。
- 朱丹安梦楠赵艳琴赵秀香吴元华
- 关键词：烟草克隆
