曾国华
- 作品数：15 被引量：25H指数：4
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
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- 人α_1型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制被引量：4
- 1992年
- 应用杂交瘤技术建立了稳定分泌抗rHu-IFN-α1的单克隆抗体细胞系,体外连续传代8个月以上,在BALB/c鼠体内连续传代6个月以上,分泌抗体能力不变,特异性专一。11D2单抗为IgG2b,17D9单抗为IgG1。采用不同方法提纯抗体均得到90％纯度。11D2单抗中和效价为1024,17D9单抗为65534。制备亲和层析柱的最佳抗体浓度为5mg/ml,凝胶与抗体体积比为1:2,偶联率均达到95％～98％。11D2单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α1干扰素不易被洗脱,不适宜制备亲和层析柱。17D9单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α1结合的抗原容易被洗脱,适宜制备亲和层析柱。粗制rHu-IFN-α1经17D9单抗层析柱后,获得了电泳纯级制品,比原纯度增加15倍,平均收率93％,比活性平均值为6.5×106IU/mg。残余鼠IgG量符合规程要求。
- 曾国华韩亮赵丽欣崔云泽
- 抗人红细胞M型抗原单克隆抗体的研制及初步应用被引量：1
- 1992年
- 应用杂交瘤枝术,用人M型RBC免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞系NS-1融合,筛选出抗M血型抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株13H_2;经过8个多月连续传代培养增殖良好,仍能稳定分泌效价高、特异性强的单克隆抗体。细胞培养上清效价1∶512,亲和力11s。通过将此株单抗用于血型检测、标准红细胞谱细胞的鉴定和在法医上检测血痕,均证明此株单抗识别的只是红细胞上的M血型抗原,与其它血型抗原无关。较多克隆抗M型抗原血清特异性强,效价高,亲和力好,是检测MN血型的良好诊断试剂。
- 杨桂云刘淑玲曾国华朱建春张志李勇刘玉华李军
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体
- 应用CelliGen细胞罐高密度培养抗人B血型杂交瘤细胞条件的研究被引量：1
- 1991年
- 应用CelliGen细胞培养罐,培养抗人B血型杂交瘤细胞,获得了细胞密度超过10~7/ml,产物IgM 2g/L以上,特异性血凝效价达到2^(13)～2^(15)。培养条件50～80r/min、pH7.2、溶解氧(DO)30％～50％,高密度时维持DO2％～10％是必要的,4种气体混合流量为0.2LPM,高密度时要增加氧气供应,细胞密度达到1.6×10~6/ml时开始灌注,随细胞密度增加,灌注量亦增加,每天补充新培养液由800ml逐渐增加到3000ml。13B1杂交瘤细胞生长代谢与葡萄糖、乳酸有关,与氨代谢无关。
- 曾国华陈贻锴J.shevitz
- 关键词：单克隆抗体
- 用同系抗独特型单克隆抗体亲和层析法提纯小鼠单克隆抗体
- 1993年
- 1C_6McAb_2是抗7A_4McAb_1独特型的同系小鼠单克隆抗体。应用硫酸铵盐析,1C_6McAb_2—Sepharose 4B柱亲和层析法提纯了小鼠腹水7A_4McAb_1。获得的样品经二巯基乙醇还原,在SDS—PAGE上为两条带,分别是IgG的重链和轻链,免疫双扩散检查只与兔抗鼠IgG_1血清有沉淀反应,免疫电泳检查与兔抗鼠全血清反应只形成一条沉淀弧,纯化的McAb的PHA效价达125000/mg。本法提纯的McAb具有产量高,纯度好,特异性强等优点。
- 郭立君曾国华
- 关键词：抗独特型抗体单克隆抗体
- Hela细胞高密度悬浮培养的研究
- 1993年
- 应用1.5L Celligen细胞培养罐,通过加大培养基的更换量,实现了Hela细胞高密度悬浮培养,细胞浓度达1.1×10~7/ml,每周可收获10^(10)以上的活细胞。
- 陈贻锴曾国华
- 关键词：HELA细胞
- 抗基因工程干扰素单克隆抗体的纯化被引量：6
- 1993年
- 为获得纯化的单抗以制备高效的单抗亲和层析柱,采用盐析、DEAE-Sephacel离子交换层析和Sephacryl S-_(300)凝胶过滤层析方法,对IgG亚类不同的抗人α-1和α-2a型基因工程干扰素(rHu-IFN-α)单抗进行纯化。结果,11D_2(IgG_(20))的纯度为81.5％,活性回收率为58.3％;17D_9(IgG_1)的纯度为91.1％,活性回收率为73.1％;1A_5(IgG_1)的纯度为93.7％,活性回收率为96.0％;1B_5(IgG_1)的纯度为97.0％,活性回收率为73.7％;27A_7(IgG_(2a))的纯度为93.4％,活性回收率为79.0％。
- 韩亮刘淑玲赵丽欣张秀霞杨桂云张志曾国华
- 关键词：单克隆抗体层析干扰素提纯
- 应用McAb分析rHu-IFN-α_(2a)抗原表位与抗病毒作用的关系被引量：2
- 1996年
- 用自制的三系抗重组人α_(2a)型干扰素（rHu－IFN－α_(2a)）单克隆抗体，经中和试验，ELISA竞争试验和ELISA夹心试验，对α_(2a)型干扰素抗原表位与抗病毒作用之间的关系，以及干扰素激活靶细胞时与受体作用的方式等进行了研究，并提出了以下设想：（1）α_(2a)型干扰素分子只有一种抗病毒活性区。（2）活性区内至少有2个抗原表位。（3）干扰素抗病毒活性是其整个活性区与靶细胞上受体作用的结果，活性区内任何一个表位都不能单独完成抗病毒的作用。（4）活性区内每个表位对整个活性区的活性都非常重要，缺一不可。
- 韩亮曾国华赵丽欣杨桂云刘淑玲张秀霞张志
- 关键词：单克隆抗体干扰素抗原表位抗病毒活性
- 乙型肝炎表面抗体的抗独特型研究
- 1992年
- 用 HBsAg/a 决定簇的7A_4单克隆抗体(McAb_1)复合物,免疫同系 BALB/C 小鼠,制备了高效价抗独特型(Ab_2)血清和两株抗独特型 McAb(McAb_2).Ab_2血清和 McAb_2都能识别7A_4McAb_1的互补位独特型.Ab_2血清中有与异种(豚鼠、驴、兔和羊)抗—HBs 结合的抗体,两株 McAb 不能与异种抗-HBs结合的抗体,两株 McAb 不能与异种抗-HBs 结合,属非内影像 Ab_2γ.研究表明,HBsAg/a 决定簇的 McAb_1有不同的互补位,McAb_2可作为一种生物探针,用于区别 McAb_1的互补位.
- 郭立君曾国华张权一
- 关键词：乙型肝炎表面抗体单克隆抗体
- 抗人α2a型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制被引量：2
- 1998年
- 应用鼠－鼠杂交瘤细胞技术建立了三系稳定分泌抗重组人α２ａ型干扰素（ｒＨｕ－ＩＦＮ－α２ａ）单克隆抗体细胞系１Ａ５、１Ｂ５和２７Ａ７。细胞连续传代和在液氮中冻存后复苏，分泌抗体能力不变，并且维持在较高水平，细胞培养上清效价１∶２５６～１∶４０９６，腹水１∶２６×１０５～１∶２７×１０８。Ｉｇ亚类测定，１Ａ５和１Ｂ５ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，２７Ａ７为ＩｇＧ２ａ。三系ＭｃＡｂ均识别ｒＨｕ－ＩＦＮ－α２ａ和－α２ｂ，与ｒＨｕ－ＩＦＮ－α１和正常大肠菌体裂解液无反应。竞争ＥＬＩＳＡ试验，三系ＭｃＡｂ分别针对ｒＨｕ－ＩＦＮ－α２ａ上三个不同表位。同ＭｃＡｂ建立双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对ｒＨｕ－ＩＦＮ－α２ａ和－α２ｂ均可检测到１５０ｐｇ／ｍｌ，约１０ＩＵ／ｍｌ的敏感度。用提纯的单抗制备亲和层析柱，单抗偶联率９５％以上。三系单抗亲和层析柱均可将粗制ｒＨｕ－ＩＦＮ－α２ａ提纯到９７％以上纯度。平均回收率为：１Ａ５单抗柱９０２％，１Ｂ５单抗柱９５３％，２７Ａ７单抗柱９４７％。比活性平均值依次为１９４×１０８ＩＵ／ｍｇ，１９７×１０８ＩＵ／ｍｇ和１６４×１０８ＩＵ／ｍｇ，残余鼠ＩｇＧ量均符合规程要求。纯化ｒＨｕ－ＩＦＮ?
- 韩亮曾国华赵丽欣杨桂云刘淑玲张秀霞张志李金凤
- 关键词：重组人干扰素单克隆抗体纯化
- 人类ABO血型系统-B抗原单克隆抗体的研制
- 1989年
- 血库、临床医院、法医以及在血液免疫学，人类遗传学的基础理论研究方面，都迫切需要高特异性、高亲和性(avidity)．高亲和力(affinity)的血型McAb，从80年代初始，国内外研制ABO血型McAb的工作。目前，有些国家已经商品生产，取代了ABO系统标准血清。我们应用淋巴细胞杂交瘤技术获得了3株较理想的细胞株：3Ca、5Ca、13B1，有希望取代抗B标准血清.
- 曾国华李勇张权一山口英夫
- 关键词：血液免疫学人类遗传学血库
