曾华金
- 作品数:4 被引量:31H指数:3
- 供职机构:中国热带农业科学院热带生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 黄瓜花叶病毒CP基因原核表达及抗血清的制备被引量:14
- 2004年
- 把黄瓜花叶病毒 (CMV)西番莲分离物的外壳蛋白 (CP)基因 ,通过BamHI SacI位点定向插入pET 2 2b( + )载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)中 ,经IPTG诱导下 37℃培养 6h ,SDS PAGE电泳示表达蛋白分子质量为 31 8kDa ,表达量占菌体总蛋白的 2 8 9%,表明该蛋白得到了高效表达。用冰冷的氯化钾溶液显色 ,用表达的特异蛋白质条带制备抗原 ,免疫家兔制备出病毒特异抗血清。采用ID ELISA测定抗血清效价为 1 0 -6;抗血清和CMV几个分离物均有特异反应 ,和TMV、菌体蛋白不发生非特异性反应 ;检测病毒灵敏度达 30ng ml,能够从稀释 31 2
- 秦云霞曾华金刘志昕田娥
- 关键词:黄瓜花叶病毒外壳蛋白原核表达酶联免疫吸附试验抗血清
- 根癌农杆菌介导大果西番莲基因转化被引量:1
- 2003年
- 以大果西番莲种子无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,在添加不同质量浓度BA和IAA的MS系列培养基上进行不定芽的诱导,确定MS+BA2.0mg·L^(-1)+IAA0.1 mg·L^(-1)为最适的不定芽诱导培养基,下胚轴、子叶外植体诱导芽分化率分别为88.33%,90.00%。将诱导出的不定芽接种在添加不同质量浓度IBA和NAA的MS系列培养基上,进行不定根的诱导,确定MS+NAA0.5mg·L^(-1)+IBA0.2mg·L^(-1)为最适的不定根诱导培养基,生根率达92.86%。用三亲交配法将质粒pBICr先转移到E.coli DH_5α,然后转移到根癌农杆菌。利用含有NPT-Ⅱ基因和CaMV35S启动子控制下的黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV-CP)反义基因的表达载体,通过根癌农杆菌介导法将其导入西番莲受体细胞,在质量浓度为50mg·L^(-1)的Kan^+选择压力下培养,获得大果西番莲CP转基因再生植株。
- 余贤美刘志昕曾华金彭存智
- 关键词:基因转化农杆菌不定芽无菌苗培养基
- 非编码RNA及其研究进展被引量:9
- 2004年
- 目前 ,大致有 10类ncRNA的神秘面纱被揭开 ,这些分布广泛的ncRNA ,在多种生物体的重要生命过程中具有不可替代的作用。它们的长度变化很大 ,但都不编码蛋白质 ,直接在RNA水平上发挥着调控作用 ,如细胞的生长和分化 ,个体的发育时序调控 ,以及疾病的形成和抑制等。因而 ,对ncRNA的深入研究将对基因功能开发、人类疾病防治及生物进化的探索有重要意义。
- 秦云霞田娥刘志昕曾华金
- 关键词:非编码RNA人类疾病基因功能分化编码蛋白质生物进化
- 西番莲双受精过程的细胞学观察被引量:7
- 2003年
- 利用石蜡制片 ,观察了西番莲双受精的全过程 ,其主要结果如下 :人工授粉后 6.5小时 ,大量花粉管进入子房腔 ,并沿子房内壁生长 ,进行珠孔受精 ;7~ 7.5小时 ,花粉管由珠孔进入胚囊 ,破坏一个助细胞 ,释放出二个精子 ;7.5~ 9小时 ,大多数胚珠雌、雄性核发生融合。其受精作用属于有丝分裂前型的配子融合类型 ;精子与卵细胞、精子与极核融合几乎同时发生 ,两极核于受精后融合 ;合子与初生胚乳核无休眠期 ,受精后立即进行有丝分裂。
- 曾华金秦云霞刘志昕彭存智
- 关键词:西番莲双受精西番莲科西番莲属