方茅
- 作品数：21 被引量：64H指数：4
- 供职机构：广州医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学化学工程更多>>
- Stat3、CyclinD1及Bcl-2在食管鳞癌组织芯片中的表达及意义被引量：15
- 2009年
- 目的:检测食管鳞癌组织芯片中stat3、cyclinD1和bcl-2的表达,探讨它们在食管鳞癌发生发展中的作用,为食管鳞癌的早期诊断提供有意义标志物。方法:利用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测食管鳞癌及癌旁组织中stat3、cyclinD1及bcl-2的表达情况,并分析与各临床病理参数之间的关系。结果:食管鳞癌中stat3、cyclinD1和bcl-2的表达阳性率分别为92.2%、79.7%和65.1%,均显著高于癌旁正常鳞状上皮(P<0.05)。stat3、cyclinD1和bcl-2的表达阳性率与食管鳞癌的组织学分级有关(P<0.05),而与年龄、性别、发生部位及大体分型无关(P>0.05);食管鳞癌中stat3与cyclinD1、bcl-2的表达呈明显正相关(分别P=0.035和P=0.012)。结论:stat3在食管鳞癌中的高表达及与cyclinD1、bcl-2的相关性表明stat3信号转导通路可能在食管鳞癌的发生发展中起重要的作用。
- 李素梅钟雪云林琛莅刘坤平彭辉方茅
- 关键词：食管鳞癌STAT3BCL-2CYCLIND1组织芯片
- 人miR-29b过表达慢病毒载体的构建及其对A549细胞迁移的影响
- 2015年
- [目的]构建能高效表达人mi R-29b的慢病毒载体,研究其对人肺腺癌A549细胞迁移的影响。[方法]PCR扩增mi R-29b前体序列,克隆入慢病毒表达载体,测序鉴定。包装好的慢病毒感染A549细胞,流式细胞仪分选后用荧光定量PCR检测mi R-29b表达水平,划痕实验观察过表达mi R-29b对A549细胞迁移的影响。[结果]测序结果证明成功构建人mi R-29b过表达慢病毒载体。mi R-29b过表达慢病毒感染效率为88.56%,使A549细胞中mi R-29b表达升高2.78倍。与A549细胞相比,稳定过表达mi R-29b的A549-mi R-29b细胞的迁移能力显著性降低。[结论]成功构建mi R-29b过表达慢病毒载体,过表达mi R-29b可抑制A549细胞的迁移,为进一步研究mi RNA对肿瘤转移的调控作用奠定了基础。
- 王红艳涂永生方茅张雅洁
- 关键词：MI慢病毒载体细胞迁移
- Nestin在CDA-2诱导人胶质瘤细胞分化中的变化
- 2009年
- 目的:研究nestin(巢蛋白)在人尿萃取物细胞分化剂CDA-2(又名尿多酸肽)诱导SWO-38人胶质瘤细胞分化中表达的变化及其意义。方法:采用光镜观察和鉴定CDA-2对SWO-38细胞的分化作用;RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blotting分析CDA-2诱导前后SWO-38细胞nestin表达的变化。结果:光镜观察发现经CDA-2诱导后SWO-38细胞胞体变大、核浆比减小、突起增多,表现出向成熟的星形细胞分化的现象;Nestin表达在细胞浆,呈丝状着色;Nestin在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中表达下调。结论:Nestin在CDA-2诱导SWO-38细胞分化中表达下调,进一步验证nestin与细胞分化的关系,nestin有可能成为胶质瘤诱导分化治疗领域新的标志物。
- 林琛莅钟雪云方茅贾晋萍谢彬彬李素梅甘思远谢有科
- 关键词：细胞分化剂神经胶质瘤巢蛋白细胞分化
- 骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞影响博莱霉素诱导肺纤维化的比较被引量：3
- 2010年
- 背景:有报道指出,骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞在多种疾病中被证明有疗效,骨髓间充质样干细胞在肺纤维化模型中也有应用。目的:比较骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞对博莱霉素A5所致大鼠肺泡炎和早期纤维化的治疗作用。方法:收集Wistar雄性幼鼠的骨髓间充质样干细胞、骨髓单个核细胞并分别进行DAPI标记。21只Wistar雌性大鼠气管内注入博莱霉素A5制作肺损伤模型,随机均分为骨髓间充质样干细胞治疗组、骨髓单个核细胞治疗组和模型组。造模后第7天处死大鼠,取肺组织病理切片观察炎症和纤维化情况;荧光显微镜下检测DAPI标记细胞;ELISA法检测肺组织匀浆羟脯氨酸和肿瘤坏死因子的含量。结果与结论:①在骨髓间充质样干细胞治疗组、骨髓单个核细胞治疗组肺组织冰冻切片中均见到DAPI标记的外源细胞。②模型组肺泡炎最严重,骨髓间充质样干细胞治疗组肺泡炎最轻,各组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。③模型组肺组织匀浆中羟脯氨酸和肿瘤坏死因子α含量最多,骨髓间充质样干细胞治疗最少,各组比较差异有显著性意义(P<0.05)。提示骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞均可定植于损伤肺组织,并能有效阻止博莱霉素A5诱导的大鼠肺泡炎和早期纤维化,前者作用更为显著。
- 陈娟刘薇薇刘移民李素梅余卫陈嘉榆张成林琛莅唐丽娟方茅钟雪云
- 关键词：骨髓单个核细胞细胞移植肺纤维化肿瘤坏死因子Α
- EGCG通过下调COX-2和MMP-2表达抑制人脑胶质瘤细胞的迁移和侵袭
- 2010年
- 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)下调COX-2及MMP-2的表达、抑制人脑胶质瘤细胞迁移及侵袭的作用机制。方法:MTT法检测EGCG处理24h后SWO-38细胞的活性,确定药物作用浓度;细胞侵袭与迁移实验检测EGCG处理24h后SWO-38细胞的迁移与侵袭能力;Western blotting对比分析EGCG处理24h后SWO-38细胞COX-2和MMP-2的表达。通过肿瘤坏死因子α(TNF-α)促进COX-2的表达,观察EGCG是否通过COX-2/MMP-2通路抑制肿瘤的迁移侵袭。结果:细胞侵袭与迁移实验发现,EGCG对SWO-38细胞的迁移和侵袭能力有抑制作用,与对照组SWO-38细胞相比较,有显著差异(P<0.01)。Western blotting发现经过EGCG处理24h后,SWO-38细胞COX-2和MMP-2蛋白的表达水平降低,提示EGCG抑制SWO-38迁移的机制可能与该药物抑制COX-2的表达而降低SWO-38细胞酶解细胞外基质的能力相关。结论:EGCG抑制了人脑胶质瘤SWO-38细胞的迁移与侵袭,其机制与EGCG抑制COX-2表达后,调节了MMP-2诱导的酶解细胞外基质的能力相关。
- 方茅杜彬钟雪云林琛莅谢彬彬谢思明李素梅
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯肿瘤侵润环氧化酶2基质金属蛋白酶2
- 沉默eIF3b基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和迁移能力的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探讨沉默eIF3b基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和迁移能力的影响及其作用机制.方法合成eIF3b基因的小分子干扰RNA(siRNA),转染入乳腺癌细胞株MCF-7,转染分3个组:Con-trol组(空白对照组)、Scramble组(转染非特异性对照组)和eIF3b-siRNA组(转染eIF3b-siRNA组).转染实验过程严格按操作说明书进行转染,其中eIF3b-siRNA组加入20 nmol/L转染eIF3b-siRNA,而Scramble组加入20 nmol/L Scramble RNA,Control组不作任何处理,转染24 h后收集细胞.应用qRT-PCR和Western blot免疫印迹法检测转染前后eIF3b基因mRNA和蛋白以及钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平;CCK-8法检测转染前后细胞增殖抑制率;运用Matri-gel胶模型细胞迁移和侵袭实验检测转染前后MCF-7细胞迁移和侵袭能力的变化.结果RT-PCR结果显示eIF3b-siRNA组eIF3b mRNA相对表达水平为0.54±0.08,明显低于Control组(1.08±0.18)和Scramble组(1.12±0.16),差异有统计学意义(P<0.05).Western印迹法结果显示:与Control组(1.09±0.19)、Scram-ble组(1.05±0.17)相比,eIF3b-siRNA组eIF3b蛋白表达水平(0.45±0.06)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).在不同培养时间点上比较,eIF3b-siRNA组细胞增殖抑制率均明显高于Control组和Scramble组,差异有统计学意义(P<0.05).细胞迁移和侵袭实验中,eIF3b-siRNA组迁移和侵袭的细胞数均明显少于Control组和Scramble组,差异有统计学意义(P<0.05),而Control组与Scramble组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05).与Control组和Scramble组比较,eIF3b-siRNA组vimentin(0.26±0.02)、MMP-2(0.23±0.02)和MMP-9(0.46±0.03)表达水平明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05),而E-cadherin(1.32±0.19)表达水平明显增强.结论下调eIF3b表达可有效地减弱乳腺癌细胞MCF-7增殖、侵袭和迁移能力,可能与阻碍乳腺癌细胞的上皮-间质转化过程和促进MMP-2和MMP-9的分泌有关.
- 李延辉方茅谢敏如夏明汗
- 关键词：乳腺癌增殖RNA干扰技术
- DJ-1对人脑胶质瘤去分化与迁移侵袭的调控
- 1.研究背景： 人脑胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤,约占全部颅内肿瘤的40%-50%。胶质瘤分化和侵袭程度直接与WHO的分级密切相关。因此,研究胶质瘤细胞分化及其迁移侵袭的分子机制,不仅有助于阐明胶质瘤的发生机制,还有...
- 方茅
- 关键词：DJ-1胶质瘤去分化迁移
- 文献传递
- 慢病毒介导eIF3b-shRNA对裸鼠MCF-7乳腺癌移植瘤的抑制作用
- 2022年
- 目的:探讨慢病毒介导eIF3b-shRNA对裸鼠乳腺癌移植瘤生长、增殖及转移的影响。方法:利用慢病毒介导eIF3b-shRNA转染MCF-7乳腺癌细胞,建立裸鼠乳腺癌模型,裸鼠分成三组,每组5只:I组(接种转染eIF3b-shRNA的MCF-7乳腺癌细胞)、Ⅱ组(接种转染空载体的MCF-7乳腺癌细胞)和Ⅲ组(接种正常MCF-7乳腺癌细胞)。观察制瘤成功后裸鼠肿瘤体积生长、HE染色镜下观察移植瘤组织和肺组织,并应用实时荧光定量PCR法检测eIF3b mRNA表达,Western blot印迹法检测eIF3b、增殖标记蛋白Ki-67及迁移标记蛋白MMP-9的表达。结果:三组裸鼠成瘤后,不同时间点对三组裸鼠进行观察,Ⅰ组肿瘤体积均明显小于Ⅱ组与Ⅲ组(P<0.05),而Ⅱ组与Ⅲ组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量PCR法检测结果显示:I组裸鼠移植瘤组织中eIF3b mRNA相对表达量明显下降,明显低于Ⅱ组和Ⅲ组,差异具有统计学意义(P<0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组之间eIF3b mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot印迹法检测结果显示:Ⅰ组裸鼠移植瘤组织中eIF3b、增殖标记蛋白Ki-67和迁移标记蛋白MMP-9相对表达量较Ⅱ组和Ⅲ组显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组之间各蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。解剖三组裸鼠,大体肉眼观察发现Ⅱ组和Ⅲ组的肺组织切开可见多灶灰白小结节,而Ⅰ组裸鼠肺组织中未找到明显结节。镜下观察发现,Ⅱ组和Ⅲ组裸鼠肺泡组织中灰白小结节为腺管样异型细胞呈结节样生长,而Ⅰ组镜下见肺泡组织结构正常,未找到转移灶。结论:慢病毒介导下调eIF3b表达对乳腺癌细胞在裸鼠体内的移植瘤生长、增殖及肺转移有明显抑制作用。
- 李延辉方茅谢敏如夏明汗
- 关键词：乳腺癌移植瘤
- 木霉活孢滴丸剂的最佳制备工艺筛选被引量：1
- 2012年
- [目的]通过正交试验筛选木霉菌孢子滴丸的最佳制备工艺。[方法]以基质类型与其质量比、孢子悬液体积与基质质量比和药液温度为3个分析因素,设计3个不同配比水平的正交试验,以成型效果和生物活性等6项指标为评判标准检验制备效果。[结果]不同组合的制备工艺效果不同。[结论]以PEG2000+PEG4000(质量比1∶1)为基质,药液温度为55℃,冷凝剂温度为0℃,木霉孢子悬液与滴丸成型基质比例为2∶10(mL/g),制备的滴丸在外观成型上具有最好的效果;木霉孢子悬液与滴丸成型基质比例为1∶10(mL/g)时,生物活性达到最优。
- 高永峰周俐钟平生方羽生方茅
- 关键词：滴丸剂正交设计木霉生物防治
- Nestin差异表达对脑胶质瘤细胞迁移与侵袭的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨nestin差异表达对脑胶质瘤细胞迁移与侵袭能力的影响。方法:Transwell实验检测细胞的迁移与侵袭能力;细胞免疫荧光观察细胞nestin的表达;Western blotting对比分析细胞nestin和MMP-2的表达。结果:SWO-38细胞的迁移能力大大低于U251细胞,差异显著(P<0.05),而两者侵袭能力无明显差别。细胞免疫荧光结果显示,SWO-38细胞的nestin均匀分布在细胞浆,呈丝状着色;而U251细胞的nestin强表达于核周,并向胞浆放射状分布。Western blotting结果显示两株细胞nestin的分子量存在差异。而SWO-38细胞的MMP-2表达水平则高于U251细胞,显示SWO-38细胞有更强的酶解细胞外基质的能力。结论:脑胶质瘤细胞的迁移能力与nestin的差异表达存在相关性,而侵袭能力与MMP-2相关。迁移能力与酶解细胞外基质能力的结合决定了肿瘤的侵袭能力。
- 林琛莅钟雪云秦艳芳方茅谢彬彬李平贾晋萍
- 关键词：神经胶质瘤巢蛋白基质金属蛋白酶-2
