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人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo胰岛素抵抗模型的建立被引量：3: 2016年; 目的采用胰岛素体外诱导法建立胎盘滋养层细胞胰岛素抵抗模型为研究妊娠期糖尿病中的胰岛素抵抗提供一种可靠的细胞模型。方法采用含不同浓度的胰岛素的RPMI1640培养基作用于胎盘滋养层细胞,用葡萄糖-己糖激酶法检测上清中葡萄糖含量,并用CCK8检测不同时间、不同胰岛素浓度细胞生存率,结合葡萄糖消耗量及细胞生存率确定产生胰岛素抵抗最佳胰岛素作用浓度及作用时间;并以油红及HE染色观察细胞形态变化;模型建立后再次用用葡萄糖-己糖激酶法检测不同作用时间上清中葡萄糖含量,以确定胰岛素抵抗模型持续时间。结果细胞在胰岛素浓度为10^(-7)mol/L,作用时间为48h,葡萄糖消耗量最小;模型细胞与正常细胞相比增殖减少,脂滴明显增多;模型建立后在60h内,胰岛素抵抗仍然存在。结论细胞产生胰岛素抵抗的最佳作用浓度为10^(-7)mol/L,最佳作用时间为48h,此模型于60h内稳定。; 冯冲金镇范洁慧孙倩张璇息小雪; 关键词：胎盘滋养层细胞胰岛素抵抗胰岛素

SHBG基因在人滋养细胞凋亡中的作用: 2016年; 目的研究性激素结合球蛋白(SHBG)基因在人滋养细胞凋亡中的作用。方法用不同siRNA干扰沉默人滋养细胞SHBG基因的表达并分为6组,即正常对照组未经转染(Ⅰ组)、空白对照组仅转染脂质体(Ⅱ组)、阴性对照组转染Nonspecific siRNA(Ⅲ组)、转染组分别转染SHBGsiRNA-Ⅰ、SHBGsiRNA-Ⅱ、SHBGsiRNA-Ⅲ(Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组),然后通过Hoechst 33258染色检测人滋养细胞凋亡情况,Real-time PCR和Western blot测定SHBG mRNA及蛋白和凋亡相关抗体Caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组SHBG和Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组SHBG和Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组比较,Ⅳ组、Ⅴ组、Ⅵ组SHBG mRNA和蛋白表达量明显下调,Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高,滋养层细胞凋亡增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论采用siRNA干扰技术能够降低人滋养细胞中SHBG基因表达量,导致人滋养细胞凋亡。; 息小雪练思宇金镇孙磊孙倩冯冲王越张宝; 关键词：SIRNA干扰凋亡

Kartagener综合征1例诊治体会: 2013年; 本文报道了1例就诊20余年患者，历经3次住院，医生只考虑自己专业相关问题，而没有认真综合分析发生各种临床表现的根源，导致“脚痛医脚、头痛医头”的状况，甚至造成患者终生未孕的遗憾。提示接诊医生应该严格遵从“三基三严”的要求，从最基本的“望触叩听”入手，以整体的观点进行诊断分析。; 范杰慧孙倩息小雪金镇; 关键词：KARTAGENER综合征不孕症误诊误治

SHBG与胰岛素传导通路蛋白在GDM孕妇胎盘组织中的表达分析被引量：4: 2016年; 目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织中的性激素结合球蛋白(SHBG)与胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)p85的表达及相关性。方法选取2013年6月至2014年6月在中国医科大学附属盛京医院住院的妊娠37~42周行择期剖宫产的30例GDM孕妇(GDM组)和30例同期行剖宫产分娩的正常孕妇(对照组)。采用免疫组织化学染色的方法检测SHBG、IRS-1、IRS-2、PI3Kp85在两组胎盘组织中的表达情况。应用Pearson相关分析SHBG与IRS-1、IRS-2、PI3Kp85的相关性。结果在GDM组与对照组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、PI3Kp85表达量比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),而IRS-2表达量两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析显示,SHBG和IRS-1在胎盘组织中的表达呈正相关(P<0.01,R^2=0.542)。SHBG和PI3Kp85在胎盘组织中的表达呈正相关(P<0.05,R^2=0.520)。结论 SHBG在孕妇胎盘中表达量减少能够通过影响IRS-1/PI3Kp85信号传导通路而在GDM发病中发挥一定的作用。; 息小雪郑阳金镇孙磊孙倩练思宇冯冲王越张宝; 关键词：性激素结合球蛋白胰岛素受体底物磷脂酰肌醇3激酶

RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对滋养细胞凋亡的影响被引量：3: 2013年; 目的探讨RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对滋养细胞凋亡的影响。方法在体外通过RNA干扰技术,将SHBGsiRNA转染至原代培养的人绒毛滋养层细胞中,双染流式细胞术检测绒毛滋养层细胞凋亡情况。结果成功原代培养人绒毛滋养层细胞。滋养细胞转染时分成6组:Ⅰ组为正常对照组(未经转染的细胞);Ⅱ组为空白对照组(只转染脂质体,无特异性siRNA);Ⅲ组为阴性对照组(转染Nonspecific siRNA);Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组为转染组(分别转染SHBGsiRNA-Ⅰ、SHBGsiRNA-Ⅱ、SHBGsiRNA-Ⅲ)。成功将SHBGsiRNA转染人绒毛滋养层细胞,结果显示与正常对照Ⅰ组、空白对照Ⅱ组和阴性对照Ⅲ组相比,各转染Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组的滋养层细胞凋亡率明显增加(分别为14.61±3.05、14.37±2.47、16.91±2.61、8.89±0.36、8.64±0.87和9.24±0.60,P<0.05)差异均有统计学意义。结论 siRNA可以有效干扰滋养层细胞SHBG基因的表达,可导致滋养层细胞过度凋亡。; 孙倩孙磊金镇范杰慧息小雪; 关键词：性激素结合球蛋白滋养层细胞 RNA干扰细胞凋亡

RNA干扰SHBG基因表达对滋养细胞增殖的影响被引量：2: 2015年; 目的探讨RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对滋养细胞增殖的影响。方法在体外通过RNA干扰技术,将SHBG si RNA转染至原代培养的人绒毛滋养细胞中,MTT法检测滋养细胞增殖情况。结果成功将SHBG si RNA转染人绒毛滋养细胞;转染后24、48、72h,SHBG si RNA转染组的细胞生长速度显著减缓,正常对照组(未经转染的细胞)、空白对照组(只转染脂质体,无si RNA)和阴性对照组(转染非特异性si RNA)的组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);转染组(SHBG si RNA-I,SHBG si RNA-II,SHBG si RNA-III)之间差异均无统计学意义(P>0.05),各转染组分别与各对照组的组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 si RNA可以有效干扰人绒毛滋养细胞SHBG基因的表达,抑制滋养细胞增殖的增殖活性。; 范杰慧金镇孙倩息小雪; 关键词：性激素结合球蛋白滋养细胞 RNA干扰细胞增殖

胎盘性激素结合球蛋白基因启动子n重复多态与妊娠期糖尿病关系研究被引量：3: 2015年; 目的探讨胎盘性激素结合球蛋白（sex hormone-binding globulin，SHBG）基因启动子（TAAAA）n重复多态与妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）的关系。方法选择2011年1月至2013年2月在中国医科大学附属盛京医院单胎分娩女婴GDM孕妇129例（GDM组）和健康孕妇119倒（对照组），采用基因片段分析加测序法检测胎盘SHBG基因启动子（TAAAA）n重复多态长度和重复次数，两组间进行比较。结果两组孕妇胎盘均检测到（TAAAA）n重复次数为6、7、8、9、10次重复5个等位基因，6／6、6／7、6／8、6／9、6／10、7／7、7／8、7／9、7／10、8／8、8／9、8／10、9／9、9／10共14种基因型。两组间5种等位基因构成比及各等位基因频率差异均无统计学意义（P〉0．05）。GDM组胎盘长链重复基因型频率虽然高于短链，但差异无统计学意义（x2=2．149，P=0．143）。结论胎盘SHBG基因启动子（TAAAA）n重复多态与妊娠期糖尿病无关。; 息小雪练思宇张璇郑阳张宝孙磊金镇; 关键词：妊娠期糖尿病性激素结合球蛋白胎盘

性激素结合球蛋白和葡萄糖转运蛋白在妊娠期糖尿病胎盘组织中的表达及相关性被引量：22: 2015年; 目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)胎盘组织细胞中性激素结合球蛋白(SHBG)和葡萄糖转运蛋白(GLUT1、GLUT3、GLUT4)的表达及相关性。方法应用免疫细胞化学染色法检测SHBG与GLUT1、GLUT3、GLUT4在30例GDM孕妇和30例正常孕妇胎盘组织中的表达情况。结果在GDM孕妇胎盘组织中,SHBG、GLUT1、GLUT3、GLUT4阳性细胞的平均光密度值分别为0.401 6±0.014 8,0.405 8±0.012 3,0.402 0±0.012 1,0.391 3±0.008 4。在正常孕妇胎盘组织中,阳性细胞的平均光密度值分别为0.414 2±0.011 5,0.427 0±0.029 4,0.418 0±0.008 7,0.402 9±0.095 9。比较SHBG与GLUT1、GLUT3、GLUT4在GDM孕妇和正常孕妇胎盘组织中的表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示:SHBG和GLUT4在胎盘组织中的表达量呈正相关(R2=0.410 4,P<0.05)。结论 GLUT1是胎盘中最主要的葡萄糖转运载体,可能在母婴间葡萄糖转运中发挥主要的作用。GLUT4在胎盘组织表达较少,却受SHBG表达的影响。; 姜洁璇孙磊金镇息小雪郑阳张璇冯冲; 关键词：性激素结合球蛋白胎盘妊娠期糖尿病

RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对人滋养细胞凋亡的影响: 目的：培养人滋养细胞(HTR8-SVneo),通过RNA干扰技术抑制性激素结合球蛋白(Sex hormone binding globulin,SHBG)基因表达,从而研究SHBG的生物学行为。方法：将人滋养细胞分成6组...; 息小雪金镇

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