彭震
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学交通运输工程建筑科学医药卫生更多>>
- 利用酵母双杂交技术筛选人PROKR2蛋白C端相互作用蛋白被引量：1
- 2018年
- 目的:利用酵母双杂交技术从人c DNA文库中筛选人前动力蛋白受体2(hPROKR2)C端相互作用蛋白。方法:复苏酵母菌Y2HGold-hPROKR2-C,与人c DNA文库杂交,计算杂交效率;筛选相互作用克隆并测序,寻找hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白;通过在DDO/X、QDO/A/X平皿上划线,对筛选到的人c DNA文库质粒的自活性进行验证;采用GST pull down进一步验证两者之间的相互作用。结果:酵母双杂交实验的杂交融合效率为1.375×10~8;在人cDNA文库中筛选出hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白SNAPIN,GST pull down实验证实两者之间存在相互作用。结论:SNAPIN可与hPROKR2蛋白C端结合。
- 周晓涛周文涛夏开德刘化蝶彭震赵云娟迪丽娜尔.波拉提李家大
- 关键词：相互作用蛋白酵母双杂交
- 双曲拱桥病害分析及加固处理研究
- 双曲拱桥结构作为一种施工简便，造价低廉的桥型曾在我国桥梁建设史上留下重要的一页。但是，随着经济的发展，交通流量和车辆载重的增加，此类桥梁结构整体性差，设计荷载标准偏低、钢筋用量偏少的缺点突出，已不适应当今交通发展的需要。...
- 彭震
- 关键词：双曲拱桥动静载试验有限元分析
- IRF4与MITF协同作用于络氨酸酶启动子的相关机制
- 2018年
- 目的:探索干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)与小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)协同作用激活络氨酸酶(tyrosinase,T YR)启动子的作用机制。方法:利用荧光素酶检测、细胞免疫荧光蛋白定位、GST融合蛋白沉降技术(GST-pull down)、免疫共沉淀等多种体外细胞实验学方法,观察IRF4与MITF的协同转录激活效应、亚细胞定位和蛋白-蛋白相互作用情况。结果:IRF4与MITF蛋白共同表达于细胞核;IRF4可以增强MITF在TYR启动子上的转录激活作用,产生协同效应,而在其他MITF目标启动子上不产生;IRF4不能单独激活TYR启动子,且与丧失功能的MITF突变蛋白在TYR启动子上不能产生协同作用;两个蛋白之间无直接相互作用。结论:IRF4与MITF在TYR启动子上产生协同作用,该效应主要依靠MITF进行调节;两个蛋白之间的相互作用可能需要DNA参与。
- 宋剑刘学铭李家大刘化蝶彭震陈红胜梅凌云梅凌云冯永
- 突变质粒CMV-3flag-hPROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)的构建及表达
- 2018年
- [目的]构建CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)真核表达质粒并观察其蛋白表达。[方法]将NotⅠ的酶切位点(GCGGCCGCC)引入第一次PCR的后引物,扩增并突变h PROKR2的1-1035 bp(343YFK/AAA345),再将NotⅠ的酶切位点和3个连续甘氨酸突变碱基GCCGCCGCA引入第二次PCR的前引物扩增并突变h PROKR2的1036-1152bp(351HWR/AAA353),通过NotⅠ酶切位点连接前后两个片段,即可构建pc DNA3.1-h PROKR2-myc-his(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353),最后通过测序鉴定突变是否成功。扩增h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353),连接入CMV-3flag。Western Blot检测相应蛋白的表达。[结果]成功构建CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)质粒,并验证到相应蛋白表达。[结论]利用NotⅠ酶的碱基序列特性(GCGGCCGCC)进行3个连续氨基酸突变的方法简单有效。质粒CMV-3flag-h PROKR2(343YFK/AAA345,351HWR/AAA353)的成功构建为后期进一步实验创造条件。
- 周晓涛周文涛彭震刘化蝶陈丹娜夏开德迪丽娜尔.波拉提赵云娟李家大
- 关键词：质粒构建
