彭长凌
- 作品数：17 被引量：92H指数：6
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家科技重大专项江苏省农业三项工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学建筑科学更多>>
- PRRSV血清抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2006年
- 用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0．43D_(po■)+0．57D_(neg)判为阳性,反之判为阴性。对采自14个猪场的364份猪血清样品进行检测,PRRS阳性率为51．4%,略高于HerdChek ELISA的阳性检出率49．7%。与HerdChek ELISA相比,间接ELISA的敏感性为94．5%,特异性为91．3%,总符合率为92．9%,Youden指数为0．86。同时还证明该方法具有良好的批间和批内重复性,并且不与猪瘟、猪伪狂犬病等阳性血清发生反应。该方法的成功建立将为我国PRRS的防制工作作出贡献。
- 陈义平邓珣彭长凌刘文博吴晓东李林王志亮刘秀梵
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA
- 公共服务动物实验中心的管理被引量：5
- 2006年
- 作为江苏省3个开放性动物实验中心之一,我中心在近3年的工作中取得一定成绩,在管理上积累了一些经验。本文报告中心3年来硬件与软件建设和具体管理工作的成绩和存在的问题。
- 朱裕华刘学彭长凌朱孝荣
- 关键词：开放性动物实验
- 大鼠SNL神经性疼痛模型的建立被引量：8
- 2014年
- 目的建立大鼠L5和L6脊神经结扎(Spinal nerve ligation,SNL)疼痛模型并进行评价。方法根据大鼠痛阈值测定结果,选择90只符合要求的SD雄性大鼠进行手术操作,术后每隔1 d测定大鼠后足的机械痛阈值,比较术前和术后大鼠对疼痛刺激的反应变化。结果术后大鼠左足的痛阈值逐渐降低,至10 d后趋于稳定,与术前有明显差异(P≤0.01);右足的痛阈值微有升高,保持在稳定的水平内。结论本研究建立的大鼠SNL模型机械痛阈变化明显,稳定性好,可靠性高,可以作为大鼠一种神经病理性疼痛的模型。
- 任士飞张林吉汪鹏旭彭长凌胡安康
- 关键词：神经病理性疼痛脊神经结扎痛阈值
- 小鼠胰岛素样生长因子-1基因体外克隆及表达的研究
- 2012年
- 目的探讨小鼠胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因提取、鉴定及重组质粒转染COS-7细胞表达。方法通过RT—PCR获取小鼠骨骼肌IGF-1的eDNA，将该基因亚克隆入重组质粒p1（peDNA3．1-Nestin—EGFP）中，构建重组质粒p2（peDNA3．1-Nestin—EGFP—IGF-1），脂质体转染COS-7细胞，ELISA检测细胞培养基中IGF-1蛋白量。结果克隆IGF-1基因eDNA与GenBank中该基因序列-致，重组质粒转染COS-7细胞培养基中均含有IGF-1蛋白。结论IGF-1基因成功构建到重组质粒p2中，且能在COS-7细胞中过表达。
- 彭长凌朱裕华张丽袁红花朱孝荣
- 关键词：胰岛素样生长因子-1小鼠克隆转染
- PRRSV间接免疫荧光检测法的建立和应用被引量：20
- 2005年
- 以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ATCC VR 2332 株人工单独感染3 头3 周龄仔猪,并用PRRSV ATCC VR 2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染2 头3 周龄仔猪,每日检查试验猪体温、采食情况及临床表现,并用HerdChek IDEXX 试剂盒测其血清抗体。PRRSV+PCV2联合感染猪分别在感染后1、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1、2和3周剖杀,对全部试验猪的肺组织进行灌洗处理以获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM进行抹片,同时用肺组织直接进行触片做间接免疫荧光(IIF)检测。结果表明,用所获得的3 株单克隆抗体均检测到人工感染猪肺组织中的PRRSV抗原。另外,用IIF检测7 头临床疑似PRRS病猪的PAM抹片,其中沭阳县的2头猪呈现阳性反应;对这2头猪的肺组织进行病毒分离,在盲传到第4代时Marc 145细胞上产生明显的细胞病变,进一步证实用所获得的3株单克隆抗体检测临床样品的结果准确而可靠,且获得的3株单克隆抗体均可通过IIF用于检测猪肺组织中的PRRSV抗原。
- 彭长凌高崧刘秀梵
- 关键词：PRRSV荧光检测法猪生殖与呼吸综合征病毒ATCC采食情况阳性反应
- PRRSV人工单独感染及其与PCV2人工联合感染的病理学比较被引量：16
- 2006年
- 目的比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和断奶仔猪多系统萎缩综合征(PMWS)的病理学变化。方法用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪。在攻毒前后分别于耳缘静脉采血,用HerdChek IDEXX Kit测其血清抗体。PRRSV和PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀。剖杀后采集肺、脾、扁桃体和腹股沟淋巴结,用甲醛溶液固定,组织石蜡切片以观察显微病理变化。结果剖检结果和石蜡切片结果均显示了试验猪在攻毒后发生程度不一的间质性肺炎及相应的显微病变。结论PRRSV和PCV2联合感染引起的病变比PRRSV单独感染要严重。
- 彭长凌高崧刘秀梵
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒病理变化
- 医学院校动物屏障系统开放性实验室的综合管理
- 文中探讨医学院实验动物中心屏障系统作为开放性实验室的特殊性和难题.通过加强实验室工作人员和实验人员的管理、规章制度的建立以及规范实验室标准化操作规程(SOP),提高了动物实验室的管理效率,合理地利用了平台的资源,更好地满...
- 朱裕华朱孝荣庄明胡安康彭长凌
- 关键词：高等医学院校
- 文献传递
- 戊巴比妥钠在实验动物兔麻醉中的应用分析被引量：7
- 2006年
- 目的 比较分析各麻醉方式的麻醉效果。方法 采用静脉、肌肉、腹腔和皮下四种方式注射3％戊巴比妥钠，分别以30mg／kg、30mg／kg、30mg／kg、40mg／kg的剂量对兔施行麻醉，记录实验中每只动物的麻醉时间、睡眠时间、麻醉后睫毛反射、刺痛反应、体温、呼吸频率及苏醒后恢复时间等，统计所得数据。结果 用确定剂量，各麻醉方式的麻醉时间为0～17min，睡眠时间范围为46～89min，恢复时间范围为26～41min。结论 实验者在实验时可根据需要用所确定剂量选择不同麻醉方式对实验动物兔施行麻醉。
- 彭长凌朱裕华朱孝荣
- 关键词：麻醉戊巴比妥钠
- 戊巴比妥钠对兔和大鼠麻醉方法的研究被引量：8
- 2005年
- 目的比较分析各麻醉方式的麻醉效果。方法将戊巴比妥钠配制成3％的浓度，并分别以静脉（30mg／k西、肌肉（30mg／kg）、腹腔（30mg／kg）、皮下（40mg／kg）的剂量对兔和大鼠施行麻醉。记录实验中每只动物的麻醉时间、睡眠时间、麻醉后睫毛反射、刺痛反应、体温、呼吸频率及苏醒后恢复时间等，统计平均数据。结果兔进人麻醉状态时间（min）为静脉（0）、肌肉（16）、腹腔（6）、皮下（17），睡眠维持时间（min）为静脉（72）、肌肉（46）、腹腔（58）、皮下（89），恢复时间（min）为静脉（41）、肌肉（26）、腹腔（28）、皮下（41）。大鼠进人麻醉状态时间（min）为静脉（3）、肌肉（13）、腹腔（5）、皮下（12），睡眠时间（min）为静脉（44）、肌肉（39）、腹腔（72）、皮下（82），恢复时间（min）为静脉（16）、肌肉（18）、腹腔（25）、皮下（28）。结论实验者在实验时，可通过本文所给数据，根据手术过程的长短的需要和理想的恢复期选择上述不同的麻醉方式对实验动物施行麻醉。
- 彭长凌朱裕华朱孝荣
- 关键词：戊巴比妥钠麻醉
- PRRS病毒核衣壳蛋白基因的原核表达被引量：4
- 2003年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒 ( PRRSV)核酸序列设计 1对引物 ,用 RT-PCR扩增出美洲型 PRRSV的核衣壳蛋白 ( N)基因 ,克隆到 p GEM-T easy载体中 ,再亚克隆到表达载体 p GEX-6p-1谷胱甘肽 S转移酶 ( GST)基因的下游。重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 ,用 IPTG于 3 7℃条件下诱导 ,经 SDS-PAGE和 Western blotting分析 ,GST-N融合蛋白的分子质量约为 3 9.5 ku,另 3种不同大小的 GST-N降解产物 ,分子质量分别为 3 3 .0、3 0 .5和 2 7.5 ku,其中 3 9.5和3 0 .5 ku的降解产物分别占菌体蛋白的 3 0 .9%和 1 5 .3 %。结果表明 :PRRSV核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中以 GST融合蛋白的形式得到高效表达 ,且表达产物能与 PRRSV抗体阳性的猪血清发生特异性反应 ,可作为
- 陈义平彭长凌刘文博刘秀梵
- 关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒PRRS病毒核衣壳蛋白基因表达原核表达
