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彭博: 作品数：47 被引量：155H指数：8; 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学自动化与计算机技术更多>>

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H7N9流感病毒感染神经系统相关细胞特征分析被引量：2: 2020年; H7N9流感病毒感染人类不仅可以侵犯呼吸系统,偶尔还会侵犯中枢神经系统引发流感病毒性脑病(Influenza-associated encephalopathy,IAE)。IAE是引起H7N9感染者死亡的重要因素,但其致病机制尚未阐明。为研究H7N9流感病毒引发IAE的致病机制,本研究以小鼠小胶质细胞(Bv2)以及小鼠神经瘤母细胞(N2a)为研究对象,细胞免疫荧光激光共聚焦显微镜观察Bv2、N2a细胞上流感病毒相关受体SA-α2,6-Gal、SA-α2,3-Gal分布;微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测H7N9感染Bv2、N2a细胞扩增情况;液相芯片法检测H7N9感染Bv2、N2a细胞后细胞因子分泌情况。结果显示,Bv2、N2a细胞上都有流感病毒感染相关受体SA-α2,6-Gal、SA-α2,3-Gal的分布。H7N9流感病毒可以成功感染Bv2、N2a细胞,且病毒在Bv2细胞内的扩增效率明显高于N2a细胞。H7N9感染Bv2细胞后出现部分细胞因子分泌量升高现象,而感染N2a细胞后未出现。本研究成功建立了H7N9流感病毒感染Bv2以及N2a细胞模型,为探讨H7N9引发IAE致病机制研究奠定了基础。; 丁小满雷雨璇杨国樑王昕武伟华吕燕刘慧孙颖彭博刘岚铮房师松; 关键词：小鼠小胶质细胞

H7N9流感病毒感染A549细胞蛋白质组学的初步研究被引量：1: 2016年; 通过建立H7N9和H1N1流感病毒(H1N1pdm09)感染人肺癌上皮细胞(A549)模型,研究病毒感染细胞后细胞蛋白质组学差异变化,探讨H7N9流感病毒感染人类致病机制。将感染复数(MOI)为0.001的H7N9、H1N1pdm09流感病毒感染A549细胞24h、48h、72h后提取细胞总蛋白进行荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)和基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析鉴定差异蛋白。质谱共鉴定出H7N9和H1N1pdm09流感病毒感染A549细胞24h、48h、72h上调或下调的差异蛋白分别为11、12、33个。对差异蛋白进行功能分析发现与H1N1pdm09感染组相比,(纤)丝状肌动蛋白成帽蛋白α1(F-actin-capping protein subunit alpha-1,CapZ-α1)、鸟氨酸氨基转移酶(Ornithine aminotransferase,OAT)、Poly(rC)-binding protein 1(PCBP1)、真核翻译起始因子5A-1(Eukaryotic translation initiation factor 5A-1,eIF5A)在H7N9感染A549细胞后表达量的下调加速了致细胞病变效应。血小板活化因子乙酰水解酶Ⅰb亚基β(Platelet-activating factor acetylhydrolaseIb subunit beta,PAFAH1B2)在H7N9感染A549细胞后期表达量显著降低可能与该病毒感染患者的临床症状相关。; 丁小满俞若曦王昕武伟华彭博刘慧耿一介董方圆陆家海俞慕华房师松; 关键词：A549细胞蛋白质组学

H7N9流感病毒NA基因5'UTR可变区A27G突变可增强NA基因转录与翻译: 2019年; 目的探讨H7N9流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因非翻译区(untranslated region,UTR)可变区碱基多态性对NA基因转录与翻译的影响.方法通过生物信息学方法分析H7N9流感病毒NA基因UTR的可变区碱基多态性位点,人工合成N9-UTR可变区随机突变文库.利用自主构建的RNA聚合酶I eGFP报告系统,构建N9-3'UTR-eGFP-5'UTR RNA聚合酶I随机突变荧光报告文库.从N9-UTR突变荧光报告文库中随机挑选克隆转染H1N1流感病毒辅助感染的MDCK细胞,荧光显微镜观察eGFP的荧光表达,同时用多功能酶标仪定量检测eGFP的相对荧光强度;利用β-actin作为内参,采用实时荧光RT-PCR定量检测eGFP基因的转录变化.测序鉴定eGFP上调或下调的N9-UTR克隆并分析导致eGFP表达变化的UTR可变区SNP特征.结果随机筛选了6个N9-UTR可变区随机突变荧光报告克隆,发现N9-2克隆的eGFP下调,而N9-7克隆eGFP上调.测序分析发现突变核苷酸位点位于5'UTR的27位,eGFP上调表现为A27G.结论H7N9流感病毒NA基因的5'UTR可变区A27G突变可增强NA基因转录与翻译.; 唐秀娟王昕彭博武伟华刘慧孙颖房师松; 关键词：EGFP

深圳市一起人类冠状病毒NL63聚集性疫情的病原学特征研究: 2022年; 2020年8月,广东省深圳市发生一起上呼吸道感染聚集性疫情,经对咽拭子样本进行病毒RNA的提取、逆转录和荧光定量PCR检测,确认为人类冠状病毒(Human coronavirus,HCoV)NL63感染所致,然后利用二代测序技术对阳性标本进行病毒全基因组测序,最终获取7条HCoV-NL63序列全长。在对毒株的棘突蛋白(Spike glycoprotein,S)基因及其S1 domain进行PCR扩增和序列测定分析中发现,S基因的160个碱基变异导致41个氨基酸突变和1个氨基酸缺失,其中39个位于S1 domain中,含1个位于受体结合结构域的突变(E572A)。在N端结构域内,三个氨基酸变异(N24S、S100P和N178S)造成三处潜在N-糖基化位点缺失,而四个氨基酸变异(N24S、E94N、G96S和L131S)却造成另三处潜在N-糖基化位点增加,使得潜在N-糖基化位点的总数保持不变。同时,结合GenBank数据库下载的45条多国的HCoV-NL63流行代表株序列,构建基于S基因中S1 domain的基因亲缘性关系树。进化分析发现,HCoV-NL63代表株主要被划分为A和B两大基因型,本次疫情中检测出的7株毒株和2株中国广东省流行的HCoV-NL63毒株进化距离最近,同属一个新的单独进化树分支,暂被划分为新基因亚型B3。本研究通过对毒株中S基因序列的比对、功能区域特征的分析以及基因型鉴定,从分子流行病学上初步阐明了深圳本次聚集性疫情中HCoV-NL63的基因特征及基因型/基因亚型,丰富和完善了我国流行的HCoV-NL63基因数据库,为今后对HCoV-NL63的分子检测、疫苗研发及致病机制研究提供了科学依据。; 陈建成张晓敏黄亚兰阳帆黄达娜何雅青张仁利彭博冯铁建; 关键词：S基因基因特征分子流行病学

深圳市H5N6、H7N9流感病毒HA-UTR基因分子特征分析: 2017年; 目的了解深圳市H5N6、H7 N9流感病毒HA基因非翻译区（Untranslated region,UTR）的分子特征.方法使用MEGA7.0、DNAStar7.1.0等生物信息学分析软件对全球及深圳H5N6、H7N9流感病毒HA基因的UTR进行核苷酸序列同源性分析及基因多态性分析.结果 3株2014-2015年深圳市H5N6病毒与其他H5NX病毒株比较,HA-3＇UTR核苷酸同源性为77.4％-100％,H5N6-HA-3＇UTR未见明显突变位点;HA-5＇UTR核苷酸同源性为91.7％ - 100％,H5N6-HA-5＇UTR第24、31位发生突变.11株2013-2014年深圳市H7N9病毒与其他H7NX病毒株比较,HA-5＇UTR核苷酸同源性为81.2％ -100％,H7N9-HA-5＇UTR在第2-6、9、10、12及15 - 17位发生多位点突变.结论深圳市人感染H5N6及H7N9病毒HA的UTR保守区高度同源性及其可变区具有基因多态性.; 陈燕慈王昕彭博武伟华刘慧耿艺介郑青房师松; 关键词：血凝素非翻译区同源性

两种不同水域中藁杆双脐螺的生长状况及生态学研究: 2018年; 目的研究对比两种不同水域中,藁杆双脐螺的生长状况及其生态学特征。方法选择代表水域,采集螺体进行形态学鉴定;同时采集水样标本,进行实验室检测,分析氨氮、硝氮,以及几种重金属含量。结果水质较差处的螺体平均直径和壳高均大于水质较好处,且水质较差处发现两种形态的螺体;两处水样检测结果表明,水质差组中的氮含量及Mn、Fe元素均高于水质良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论藁杆双脐螺生存适应能力强,在两种不同水域均能生长,且在水质较差处生长更优。; 武伟华张仁利高世同彭博黄达娜房师松刘慧; 关键词：生态学研究

常见流感病毒亚型的多重Real-time PCR应急检测方法建立: 目的构建一种可同时检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2亚型流感病毒的多重Real-time PCR方法。方法根据不同流感亚型HA与NA的差异,设计五对引物及五种探针,构建合适的检测体系,分析特异性、灵敏度、可重复性...; 彭博王昕房师松武伟华张仁利; 关键词：流感 H1N1 H3N2; 文献传递

新型冠状病毒肺炎患者住院时间和病程的影响因素分析被引量：15: 2020年; 目的分析影响新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者病毒清除的相关因素,为COVID-19的防治提供科学依据。方法选择2020年1月14日至3月9日深圳市出院的381例COVID-19患者。收集患者年龄、性别以及感染新型冠状病毒的时间、地点等基本情况,同时利用实时荧光定量PCR和化学发光法分别检测SARS-Co V-2核酸Ct值以及患者血清中SARS-Co V-2 Ig G抗体水平。分析患者基本情况、确诊时Ct值和血清抗体水平高低对患者住院时间和病程的影响。结果COVID-19患者年龄、发病时间与住院时间及病程呈正相关(P<0.05);60岁以上男性患者的住院时间显著长于60岁以上女性患者(P<0.05);1月份发病患者的住院时间、发病到入院的时间和病程均显著长于2月份发病患者(P<0.05)。不同感染地点和患者确诊时Ct值与住院时间和病程之间不存在相关性(P>0.05);发病第2周核酸已转阴患者的抗体水平显著高于核酸阳性患者的抗体水平(P<0.05)。结论COVID-19患者的年龄、性别、感染的时间段以及Ig G抗体出现的早晚与病程有密切的关系,年龄越大、男性患者、感染时间越早以及早期抗体水平低都会使病程延长。; 黄亚兰孟君孙颖熊玲红彭博房师松冯铁建张仁利; 关键词：新型冠状病毒病毒清除

人工合成抗菌肽的常用方法及应用前景被引量：19: 2012年; 抗菌肽是来自生物体内经诱导产生的一种具有抗菌活性的小分子多肽,能够高效杀灭多种革兰阴性、阳性菌,其作为抗生素的替代品,能有效解决耐药性等问题。由于天然产生的抗菌肽数量较少,往往很难大量获得,而通过人工合成方法,可解决表达量和所需成本等问题,也可在一定程度上进行抗菌肽抑菌功能上的改进。本文综述了人工合成抗菌肽的常用方法与研究进展,探讨了人工合成抗菌肽在未来的应用前景。; 彭博郭中敏陆家海; 关键词：抗菌肽化学合成基因工程 NDM-1

H7N9禽流感病毒感染A549细胞生物标志物研究: 2018年; 目的通过建立H7N9禽流感病毒和H1N1pdm09流感病毒(对照病毒)感染A549细胞模型,分析H7N9禽流感病毒感染A549细胞的特征蛋白,筛选其生物标志物,初步揭示H7N9禽流感病毒致细胞病变的蛋白分子机制。方法感染复数为0.001的H7N9和对照病毒分别感染A549细胞24、48、72 h后提取细胞总蛋白进行荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),筛选H7N9禽流感病毒感染A549细胞的可能生物标志物并进行蛋白印迹(WB)验证。结果血小板活化因子乙酰水解酶Ⅰb亚基β(PAFAH1B2)蛋白在H7N9感染A549细胞72 h后表达量急剧下降,而在空白对照组和H1N1pdm09感染A549细胞组的表达量未出现明显变化。结论 PAFAH1B2可作为H7N9感染A549细胞后期的生物标志物,其表达量的变化可能与H7N9感染患者的症状相关。; 丁小满王婷彭博胡鹏威段永翔房师松俞慕华; 关键词：血小板活化因子乙酰水解酶生物标志物

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