张山
- 作品数:19 被引量:15H指数:2
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 产N-乙酰-5-羟色胺的重组大肠杆菌及其构建方法和应用
- 本发明公开了产N‑乙酰‑5‑羟色胺的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。本发明首先公开了重组大肠杆菌,与受体大肠杆菌相比,其色氨酸衍生物合成相关蛋白的基因的表达量增加和/或所述色氨酸衍生物合成相关蛋白的含量增加和/或所述色氨...
- 董志扬张岩峰张山何永志张楠
- 文献传递
- 产褪黑素的重组大肠杆菌及其构建方法和应用
- 本发明公开了产褪黑素的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。本发明首先公开了重组大肠杆菌,与受体大肠杆菌相比,其褪黑素生物合成相关蛋白的基因的表达量增加和/或所述褪黑素生物合成相关蛋白的含量增加和/或所述褪黑素生物合成相关蛋白...
- 董志扬张岩峰张山何永志张楠
- 一种高效生产转谷氨酰胺酶的方法及其专用工程菌
- 本发明公开了一种高效生产转谷氨酰胺酶的方法及其专用工程菌。本发明提供了一种蛋白质,为序列表的序列2所示的蛋白质。本发明还保护将表达所述蛋白质的DNA分子导入谷氨酸棒状杆菌得到的重组微生物。所述重组微生物可用于制备转谷氨酰...
- 董志扬张楠张山何永志张岩峰
- 改造大肠杆菌合成海藻糖途径以高效合成海藻糖被引量:9
- 2015年
- 海藻糖是相容性溶质的一种,因其具有多种生物学功能,在食品、化妆品、药品以及器官移植等方面均有很广泛应用。然而近几年生产海藻糖主要集中在使用酶催化的方法,虽然这种方法的转化效率高,但是却存在着副产物的问题,难以得到高纯度的海藻糖产品,严重制约了海藻糖的应用。本文通过基因工程技术在大肠杆菌Escherichia coli中构建了海藻糖高效合成新途径,通过全细胞催化合成海藻糖。利用PCR技术在哈氏噬纤维菌Cytophaga hutchinsonii中克隆获得海藻糖双功能合成酶基因(tpsp),采用E.coli pTac-HisA高效表达载体,实现海藻糖双功能合成酶基因(tpsp)高效表达,利用高效表达菌株进行全细胞催化,将葡萄糖高效转化为海藻糖。结果表明C.hutchinsonii海藻糖合成酶基因(tpsp)在E.coli中成功实现表达,该酶能够在胞内将葡萄糖高效转化为海藻糖,并将其转运到胞外,实现海藻糖的高效率合成,海藻糖的产量提高到1.2 g/L,相对转化率为21%。当将此高产菌株在发酵罐中进行转化时,海藻糖的产量达到13.3 g/L,葡萄糖的相对转化率达到48.6%。采用C.hutchinsonii海藻糖合成酶基因高效表达并且应用于海藻糖全细胞合成催化在国内外尚属首次报道,海藻糖的转化率及产率都已达到文献报道最高水平,本研究为开拓海藻糖生产新技术奠定了基础。
- 高超张山何永志黄健忠董志扬
- 关键词:海藻糖双功能酶海藻糖合成酶全细胞催化大肠杆菌
- 一株深海细菌新菌株及其应用
- 本发明公开了一株深海细菌新菌株及其应用。本发明所公开的深海细菌新菌株是锰氧化黄氏菌(Huangia manganoxydans)8047 CGMCC No.6697。锰氧化黄氏菌(Huangia manganoxydan...
- 黄力戴欣张山宋磊郗丽君任菲黄英董志扬
- 文献传递
- 一种内溶素突变体及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种内溶素突变体Lysmeta1<Sup>M</Sup>及其编码基因与应用。本发明提供的内溶素突变体Lysmeta1<Sup>M</Sup>如序列表的序列1所示。本发明利用温度诱导表达系统表达内溶素,构建了程...
- 董志扬王宁宁张山王丽何永志张岩峰朱雅新
- 牦牛瘤胃元基因组文库中木聚糖酶基因的分析被引量:6
- 2011年
- 【目的】了解牦牛瘤胃微生物木聚糖酶多样性及其降解特征,为木聚糖降解提供新的基因资源。【方法】根据对已构建的瘤胃微生物元基因组细菌人工染色体(BAC)克隆文库高通量测序结果的注释,筛选其中编码木聚糖酶的基因并进行多样性分析;对其中一个木聚糖酶基因及其连锁的木糖苷酶基因进行克隆表达和酶学性质表征,分析其协同作用。【结果】共筛选到14个木聚糖酶基因,均编码GH10家族木聚糖酶,其氨基酸序列之间的相似性为20.5%-91.3%;其中7个木聚糖酶基因所在的不同的DNA片段(contig)上存在木糖苷酶基因,编码的木糖苷酶属于GH43或GH3糖苷水解酶家族。将其中一对连锁的木聚糖酶(Xyn32)和木糖苷酶基因(Xyl33)分别克隆、表达和纯化。纯化后的木聚糖酶比活为1.98 IU/mg,但不具有阿魏酸酯酶活性;木糖苷酶比活为0.07 U/mg,且具有α-阿拉伯呋喃糖苷酶活性。体外实验证明,木糖苷酶Xyl33对与之连锁的木聚糖酶Xyn32的木聚糖降解具有协同作用。
- 王敏陈富荣张山朱雅新东秀珠黄力田瑞华董志扬戴欣
- 关键词:牦牛瘤胃细菌人工染色体(BAC)文库木聚糖酶
- 一种转谷氨酰胺酶的高效制备方法及其专用工程菌
- 本发明公开了一种转谷氨酰胺酶的高效制备方法及其专用工程菌。本发明提供了一种蛋白质,为序列表的序列2所示的蛋白质。本发明还保护将表达所述蛋白质的DNA分子导入谷氨酸棒状杆菌得到的重组微生物。所述重组微生物可用于制备转谷氨酰...
- 董志扬张楠张山何永志张岩峰
- 一种脱卤酶DhmB及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种脱卤酶DhmB及其编码基因与应用。本发明的脱卤酶DhmB是如下a)或b)的蛋白质:a)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质;b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或...
- 董志扬董亮戴欣张山王丽张岩峰
- 文献传递
- 四氢嘧啶生物合成与四氢嘧啶生物传感器研究
- 张山何永志董志扬