张富程
- 作品数：30 被引量：120H指数：7
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- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞TOLL样受体2的变化及其与TNF-α的关系
- 2007年
- 目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞TOLL样受体2（TLR2）的变化情况及其意义。方法：用流式细胞仪检测30例正常对照组、22例轻或中度慢性乙型肝炎患者和20例重度慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞表面TOLL样受体2的表达，ELISA法检测上述患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。结果：正常对照组、轻及中度慢性乙型肝炎组和重度慢性乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2的平均免疫荧光强度（21．5±2．7）、（27．4±2．5）、（33．6±2，9）MFI，各组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；3组外周血清TNF-α水平分别为（53．8±38．4）、（101，3±40．9）、（224．7±73．9）ng／L，各组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；慢性乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2表达水平与血清TNF-α表达水平呈正相关（r=0．84，P〈0．05）。结论：TLR2可能与慢性乙型肝炎的发病有关。
- 尉秀清韩晓燕张富程姚集鲁
- 关键词：肝炎乙型慢性肿瘤坏死因子Α细胞表面
- 全血染色法和分离外周血单个核细胞染色的五聚体技术检测抗原特异性CTL的比较被引量：5
- 2006年
- 目的分别采用分离外周血单个核细胞(PBMC)法和全血直接染色法的组织相容性抗原-肽五聚体(MHCpentamers)流式细胞技术定量分析慢性乙型肝炎(下称慢性乙肝)患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),并对两种方法进行比较。方法从慢性乙肝患者外周血中分离PBMC,用HLA-A2HBcAg抗原表位肽-MHCPentamers及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的CTL细胞,部分患者同时采用全血直接染色方法进行HBV特异性的CTL细胞的检测。结果32例HLA-A2阳性的慢性乙肝患者外周血均可检测到HBV特异性的CTL细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例平均为(1.34±1.06)%,两种染色方法检测的特异性的CTL细胞无统计学差异。结论全血直接染色结合五聚体流式细胞技术检测抗原特异性CTL是一种简便、敏感和可行的抗原表位特异性CTL检测方法。
- 邓洪韩晓燕陈幼明张富程高志良姚集鲁
- 关键词：T淋巴细胞细胞毒性HLA抗原
- 透明质酸/壳聚糖/pEGFP纳米粒介导体外基因转染关节软骨细胞与滑膜细胞的比较被引量：2
- 2012年
- [目的]以透明质酸(HA)修饰的壳聚糖(CS)/质粒DNA(pDNA)纳米粒介导体外基因转染关节软骨细胞与滑膜细胞,以明确其作为非病毒基因载体治疗关节疾病的潜能。[方法]将HA修饰的CS与负载增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)的pDNA以复凝聚法制成纳米粒,以扫描电镜检测纳米粒形态;激光粒度仪测定其粒径、Ze-ta电位及分散度(PDl);凝胶电泳阻滞试验检测HA/CS和pDNA的结合力及pDNA的释放;体外转染兔关节软骨细胞与滑膜细胞,以流式细胞仪及荧光显微镜检测转染效率。[结果]HA/CS/pDNA纳米粒多呈球形,粒径平均为(142.5±20.3)nm,表面Zeta电位平均为(25.99±8.48)mV,分散度平均为(0.283±0.089),可有效保护pDNA免受核酸酶的降解;通过调节pH值至7.5以上或加入壳聚糖酶可促使纳米粒中的pDNA释放;体外转染实验证明HA/CS/pDNA纳米粒能介导pEGFP转染软骨细胞和滑膜细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白,其对软骨细胞的转染能力较强,比裸pEGFP和CS/pEGFP纳米粒有更高的转染效率(P<0.05);但对滑膜细胞的基因转染效率较低,与CS/pEGFP纳米粒无明显差别(P>0.05)。[结论]复凝聚法制备的HA/CS/pDNA纳米粒是一种有效的新型非病毒基因转染载体,在体外可介导基因转染关节软骨细胞和滑膜细胞,其转染效率具有明显的细胞依赖性。
- 吕璐璐卢华定陆慧琼张富程赵慧清
- 关键词：壳聚糖透明质酸基因转染软骨细胞滑膜细胞
- γδT细胞、调节性T细胞、白细胞介素17及转化生长因子β1在变应性鼻炎患者外周血中的表达被引量：13
- 2013年
- 目的探讨变应性鼻炎（allergicrhinitis，AR）患者外周血中18T细胞、调节性T细胞（regulatory Tcells，Treg）、白细胞介素（interleukin，IL）17及转化生长因子β1（transforminggrowthfactor β1，TGF—β1）的表达及临床意义。方法2012年3—7月，收集32例AR患者（AR组）和20例健康志愿者（对照组）的外周血，采用流式细胞术检测外周血中18T细胞和Treg细胞比例；酶联免疫吸附试验检测血清中IL-17、TGF-β1的水平，并分析它们之间的相关性。采用SPSS16．0软件进行数据分析。结果叮8T细胞百分比在AR组和对照组分别为（13．30±8．62）％、（5．18±1．86）％，差异有统计学意义（t=5．18，P〈0．01）；Treg细胞百分比分别为（1．75±0．56）％、（4．76±1．74）％，差异有统计学意义（t=7．46，P〈0．01）。AR组血清中IL-17的表达水平为（668．55±45．15）pg／ml，高于对照组的（573．53±17．42）pg／ml，差异有统计学意义（t=8．97，P〈0．01）；AR组TGF-131的表达水平为（0．34±0．04）pg／m1，低于对照组的（0．49±0．06）0g／ml，差异有统计学意义（t=9．51，P〈0．01）。AR组患者外周血中16T细胞百分比与Treg细胞百分比呈负相关趋势（r=-0．561，P〈0．01），18T细胞百分比与IL-17呈正相关趋势（r=0．469，P〈0．01），18T细胞百分比与TGF—β1呈负相关趋势（r=-0．622，P〈0．01），Treg细胞百分比与TGF—B1呈正相关（r=0．738，P〈0．01），IL-17表达水平与Treg细胞百分比、TGF-β1无相关性（r值分别为-0．111、-0．196，P〉0．05）。结论AR患者外周血中18T细胞和Treg细胞之间存在免疫平衡失调，18T细胞可能参与了IL-17的分泌，这可能在AR的发病和发展过程中发挥重要作用。
- 黄雪琨杨钦泰陈玉莲张富程张革化
- 关键词：白细胞介素17转化生长因子Β1鼻炎变应性常年性
- 偶发型视网膜色素变性患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞检测
- 2011年
- 目的检测偶发型视网膜色素变性（RetinitisPigmentosaRP）患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例，以观察该病病变过程中是否存在自身免疫因素。方法临床实验研究。对2007年9月至2009年8月在中山大学附属第三医院眼科抽取3年内病程偶发型RP患者（19例）、3-5年内病程偶发型RP患者（15例）和健康人（22人）外周静脉血。用流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例。结果3年内病程偶发型RP患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例（9．41±d．87）％显著低于健康人外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例（13．53±6．28）％，（t=2．795，P〈0．05），差异有统计学意义。3～5年内病程偶发型RP患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例（11．17±4．90）％与3年内病程偶发型RP患者及健康人外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例比较（t值分别为2．795和1．200，P值分别为0．196和2．41，P〉0．05），差异无统计学意义。结论发病早期偶发型RP患者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg在淋巴细胞中所占的比例降低，提示在该病早期存在自身免疫现象，为对该病进行免疫学治疗提供了线索。
- 叶辉夏小平邓娟张富程宋国祥
- 关键词：视网膜色素变性自身免疫CD4^+CD25^+调节性T细胞
- 慢性HBV感染患者抗原表位特异性CTL与ALT水平无关被引量：3
- 2006年
- 【目的】通过定量分析慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞,探讨特异性细胞毒性T淋巴细胞水平与血清丙氨酸氨基转移酶水平和病毒复制状态的关系。【方法】从慢性乙型肝炎患者外周血分离外周血单个核细胞(PBMC),用HLA-A2限制的HBcAg抗原表位肽-五聚体复合体及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞,同时检测患者的肝功能和定量分析HBVDNA。【结果】32例HLA-A2阳性的慢性乙型肝炎患者外周血均可检测到HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例为1.3%±1.1%,统计分析抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞频率与丙氨酸氨基转移酶水平相关性不显著(r=0.163,P=0.163)。分组对比发现病毒载量低者(HBVDNA定量<105拷贝/mL)抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞水平(1.96%±1.26%)高于病毒载量高者(0.82%±0.52%,P<0.05)。【结论】慢性乙型肝炎患者外周血中存在抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞,抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞可能与控制HBV的复制有关,但主要肝损害并非直接由抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞引起。
- 邓洪韩晓燕陈幼明张富程彭晓谋高志良姚集鲁
- 关键词：HLA抗原
- 绞股蓝总苷对大鼠心、脑Na^+,K^+-ATP酶的抑制作用及其动力学分析被引量：9
- 2006年
- 目的观察绞股蓝总苷对心、脑微粒体Na+,K-ATP酶活性的抑制作用及动力学分析。方法采用离心法制备大鼠心、脑组织微粒体酶,以比色法测定Na+,K-ATP酶活力,通过酶动力学研究方法分析绞股蓝总苷对心、脑微粒体Na+,K-ATP酶活性的抑制作用。结果绞股蓝总苷体外可逆性抑制大鼠心、脑微粒体Na+,K-ATP酶活性,并呈浓度依赖性,且对脑微粒体Na+,K-ATP酶的抑制作用较强,其IC50分别为(58.79±8.25)、(52.07±6.25)mg/L。降低Na+,K+浓度或增加ATP浓度则增强其抑制酶活性作用。酶动力学分析显示,绞股蓝总苷对微粒体Na+,K-ATP酶的作用近似Na+的竞争性拮抗剂、底物ATP的反竞争性抑制剂、K+的混合性抑制剂。结论绞股蓝总苷通过抑制心、脑Na+,K-ATP酶活性而发挥其强心作用和中枢抑制作用。
- 韩晓燕卫洪波张富程
- 关键词：绞股蓝总苷微粒体酶动力学
- 变应性鼻炎患者外周血中IL-27和Treg细胞的相关性分析被引量：6
- 2013年
- 目的探讨外周血IL-27和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在变应性鼻炎(AR)发病机制中的作用。方法 2012年3月至7月,收集AR患者32例(AR组)和20例健康志愿者(对照组)外周血,采用流式细胞术(FCM)检测外周血中Treg细胞比例;ELISA检测血清中IL-27、IL-10和TGF-β1的水平。结果 AR组Treg细胞百分率[(1.75±0.56)%]明显低于对照组[(4.76±1.75)%],两组比较的差异有统计学意义(P<0.01)。AR组IL-27、IL-10和TGF-β1的水平分别为(24.43±16.36)pg/ml、(14.29±6.16)pg/ml、(0.34±0.04)pg/ml,均低于对照组(44.09±13.12)pg/ml、(31.32±21.20)pg/ml、(0.49±0.06)pg/ml,两组之间的差异有统计学意义(P<0.01)。AR患者外周血中IL-27和Treg细胞百分率、IL-10、TGF-β1存在正相关(r分别为0.825,0.646,0.517,P<0.01),Treg细胞百分率和IL-10、TGF-β1存在正相关(r=0.622,0.738,P<0.01),IL-10和TGF-β1无相关性(r=0.304,P>0.05)结论 AR患者外周血中IL-27水平降低,Treg细胞百分率降低及其主要分泌因子IL-10、TGF-β1水平降低,且IL-27与Treg细胞百分率、IL-10、TGF-β1水平呈正相关,提示在AR发病中IL-27对Treg细胞可能具有免疫调节作用。
- 黄雪琨杨钦泰陈玉莲张富程张革化
- 关键词：变应性鼻炎IL-27调节性T细胞
- 重组人IL1-Ra与TGF-β1共转染软骨细胞的基因表达被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨重组人IL1-Ra与TGF-β1基因转染软骨细胞的表达情况。方法:体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的IL1-Ra与TGF-β1质粒通过脂质体介导下共转染软骨细胞,通过荧光显微镜观察转基因的表达和荧光定量PCR检测其表达。结果:荧光显微镜观察有绿色荧光蛋白表达,荧光定量PCR鉴定证实转染的软骨细胞中转基因得到表达。结论:IL1-Ra与TGF-β1基因共转染软骨细胞可以获得表达,为基因治疗骨关节炎的研究提供基础。
- 张平蔡道章刘斌温机智曾春侯雪瑞张富程陆慧婷
- 关键词：IL-1RA转化生长因子-Β1基因转染软骨细胞
- HBV X蛋白对阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡的影响
- 2010年
- 目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis BvirusX protein,HBVX)对阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡及p53、PTEN表达的影响。方法:用阿霉素(2.5g/mL)分别处理HepG及稳定表达GFP、GFP-HBVX融合蛋白的细胞系HepG/GFP、22HepG/GFP-HBVX,处理后不同时间在显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:流式细胞术检测显2示阿霉素处理后36h,HepG/GFP-HBVX细胞凋亡率为3.94%,明显低于HepG(59.03%)、HepG/GFP细胞(61.38%)222(P<0.05),而与未处理对照组细胞(2.12%、2.78%、2.55%)无明显差别(P>0.05)。结论:HBVX蛋白能够抑制阿霉素诱导的细胞凋亡。
- 佘吉佳杨林王霞范红梅张富程陈幼明谢奇峰
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白阿霉素细胞凋亡
