张升宁 作品数:126 被引量:243 H指数:7 供职机构: 昆明市第一人民医院 更多>> 发文基金: 云南省科技厅科研基金 云南省社会发展科技计划 云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 建筑科学 更多>>
大鼠减体积肝移植术后肝脏细胞骨架差异蛋白的表达变化 2015年 目的利用蛋白质组学及相关技术研究大鼠减体积肝移植术后肝脏参与细胞骨架差异蛋白的表达变化.方法实验首先用改良法建立Lewis—Wistar大鼠减体积肝移植模型,然后在术后1,3和7 d获取移植术后肝脏组织,最后应用蛋白组学技术与预先获取的供、受体原肝脏组织建立双向凝胶电泳图谱,再利用串联质谱(MS-MS)分析及数据库对胶上差异表达的蛋白质点进行鉴定.结果本次实验中所有蛋白质点采用变化倍数大于10倍为标准进行差异蛋白点的选择,结果总共发现了72个差异点,应用串联质谱分析和数据库等对差异质点进行分析和鉴定,发现有32个蛋白的功能比较明确,其中有3个差异表达的蛋白在减体积移植术后肝脏参与细胞骨架的过程,表达变化比较明显,差异蛋白质点总数占所有差异表达质点的7%.结论应用蛋白质组学的技术研究大鼠减体积肝移植术后肝脏病理生理过程中细胞骨架差异蛋白的变化,对于进一步研究细胞骨架蛋白在肝移植术后肝脏病理生理过程中的作用及作用机理有重要的意义. 刘静 李立 冉江华 张升宁 李来邦 陈奕明关键词:减体积肝移植 细胞骨架 差异蛋白 FK506在肝移植术后的个体化治疗分析 被引量:1 2010年 目的探讨FK506(他克莫司)在肝移植术后的个体化治疗。方法回顾性分析了我院自2006年5月~2009年8月已经成功完成的119例肝移植,术后均以FK506为基础的抗免疫排斥用药的临床资料情况。结果无一例发生过严重的急性排斥反应,有9例发生过轻微的急性排斥反应,发生率为7.5%(9/119);9例患者全部治愈,其总的治愈率为100%(9/9);其中7例经过对FK506和MMF加量后治愈,治愈率为77.8%(7/9);2例逐渐加重最终接受激素冲击治疗而治愈,激素治疗的成功率为100%(2/2),激素治疗在整个治疗中占22.2%(2/9)。结论FK506在肝移植术后的抗免疫排斥用药应该遵循个体化的原则,从小剂量开始,应该结合患者的FK506的血药浓度、肝功能、机体耐受力等进行综合评估和调节。 刘静 张升宁 李铸 李来邦 赵永恒 冉江华 李立关键词:术后 肝移植 FK506 个体化治疗 树突状细胞的培养及成熟的鉴定 被引量:6 2015年 目的探讨人体外周血树突状细胞在体外培养诱导其成熟的方法,通过得到成熟的细胞培养技术,对树突状细胞功能的研究奠定实验基础.方法通过Ficoll-Hypaque梯度离心法得到单个核细胞,再诱导使其分化、扩增、纯化形成稳定的树突状细胞,通过树突状细胞自身形态、特异性表型,抗原摄取能力,鉴别培养的细胞,从而得到具有典型特征的树突状细胞.结果树突状细胞培养第7天,加入LPS后,倒置显微镜及扫描电镜下观察,树突状细胞成熟中,细胞胞质增大,细胞膜表面能形成大量树突状突起,表面标志物CD80、CD86、CD11c、HLA-DR的表达增高(P<0.05),共聚焦显微镜下,成熟的树突状细胞对抗原的吞噬能力减弱.结论Ficoll-Hypaque梯度离心法能够得到稳定的树突状细胞体外培养体系. 李望 张升宁 冉江华 苏晓三 李来邦 陈奕明关键词:树突状细胞 表型 抗原 联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除治疗结直肠癌肝转移 被引量:4 2015年 目的探讨联合肝脏离断和门静脉结扎的2步肝切除新技术在提高结直肠癌肝转移患者可切除的意义.方法结直肠癌肝转移患者接受联合肝脏离断和门静脉结扎的2步肝切除,手术第1步,门静脉右支结扎后离断右三肝和左外侧叶肝实质,待健侧肝组织增生后再行右三肝切除.结果第1步手术后7 d,残肝体积从313.5 m L增加到559.1 m L,并在第1步手术后8 d,第2步手术行右三肝切除.第2步手术后8 d患者顺利出院,肝功能恢复基本正常,联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除诱导了残肝组织快速的增生.结论联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除提高了结直肠癌肝转移患者的可切除率.联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除有较高的并发症率和死亡率,因此需要仔细选择手术患者;该术式的可行性、安全性还需要进一步研究评估. 张升宁 李来邦 任刚 陈奕明 刘滇生 刘剑 冉江华 李立关键词:肝切除 结直肠癌肝转移 肝脏肿瘤 肝移植后乙型肝炎复发核苷类抗乙肝药物联合小剂量乙肝免疫球蛋白可能防治吗? 被引量:5 2010年 背景:近年来国内外均报道,抗乙型肝炎免疫球蛋白和拉米夫定在预防乙型肝炎、肝硬化肝移植后乙型肝炎的复发中取得了良好效果,但各大中心对于抗乙型肝炎免疫球蛋白使用剂量的报道不尽相同。目的:拟验证和探讨核苷类抗乙肝药物联合小剂量乙肝免疫球蛋白预防肝移植后乙型肝炎病毒复发的效果。方法:回顾性分析2006-05/2009-02昆明市第一人民医院暨昆明医学院附属甘美医院肝移植中心因乙型肝炎相关性肝病行肝移植患者59例,移植前诊断为乙型肝炎后肝硬化失代偿期50例,其中乙型肝炎病毒DNA阳性15例。移植前5例给予拉米夫定治疗,1例给予阿德福韦酯治疗,1例给予恩替卡韦片治疗,治疗时间为2周~1年。移植后所有患者术后第1天开始肌注200U/d的乙肝免疫球蛋白,1个月后根据患者的乙肝两对半的滴度情况进行调整,55例患者同时口服拉米夫定,3例服用阿德福韦酯,1例服用恩替卡韦。结果与结论:2例患者移植后出现乙型肝炎病毒再感染,未检测是否为YMDD变异毒株感染,移植后1年和1年以上乙型肝炎病毒再感染率均为2%。移植前血清乙型肝炎病毒DNA阴性者移植后乙型肝炎病毒再感染率为2%,乙型肝炎病毒DNA阳性者移植后乙型肝炎病毒再感染率为7%。提示因乙型肝炎相关性肝病而行肝移植患者,移植后服用核苷类抗乙肝药物,同时联合200U小剂量乙型肝炎免疫球蛋白可以很好地预防肝移植后乙型肝炎的复发。 刘静 张升宁 李铸 李来帮 冉江华 李立关键词:乙肝免疫球蛋白 肝炎病毒 乙型 复发 腺苷蛋氨酸在肝移植术后缺血再灌注治疗中的效果 2011年 目的回顾性总结腺苷蛋氨酸在肝移植术后缺血再灌注治疗中的效果。方法现将35例肝移植术后患者分为两组,对照组给予基础保肝治疗,干预组在保肝治疗基础上加用腺苷蛋氨酸,治疗后分别观察总胆红素和直接胆红素的变化。结果对照组术后第1天均有明显升高,之后逐渐下降,但术后1~2周胆红素明显升高,而术后1个月降至接近正常。干预组在术后1天也明显升高,之后逐渐下降,术后1~2周未见明显升高,术后14天明显下降,术后1个月降至接近正常。结论腺苷蛋氨酸可以减轻肝移植术后缺血再灌注损伤,消退黄疸,恢复肝功能。 吴淑媛 梁宇 曹海鹰 刘静 张升宁 李铸 冉江华关键词:肝移植 腺苷蛋氨酸 缺血再灌注 长链非编码RNA核富集转录体1调节不均一核糖核蛋白A2蛋白对人肝细胞癌进展的研究 被引量:4 2016年 目的 通过RNA免疫共沉淀寻找长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)相关的RNA结合蛋白,验证这些RNA结合蛋白参与NEAT1调节肝癌相关基因核内不均一核糖核蛋白A2(hnRNPA2)表达的分子机制,观察NEAT1调节hnRNP A2的表达对人肝细胞癌的进展的影响.方法 查询Starbase 2.0数据,寻找与NEAT1相互作用密切的RNA结合蛋白,通过RNA免疫共沉淀明确能同时与NEAT1和NEAT1所调控基因mRNA相互作用的RNA结合蛋白,RNA pull-down明确RNA结合蛋白与NEAT1作用靶点片段,使用转染试剂Lipofectamine 2000和siRNA NEAT1(终质量浓度100 nmol/L)敲低HepG2细胞NEAT1表达,Western blot、免疫组织化学检测NEAT1对hnRNP A2蛋白的调节,使用逆转录病毒STP-重组逆转录病毒载体作为载体建立hnRNP A2过表达模型并应用于NEAT1低表达的HepG2细胞模型中,细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验(10 μl/2 000个细胞)和Transwell小室研究NEAT1低表达的HepG2细胞(2×10^5个/孔)过表达hnRNP A2后与对照组的增殖、侵袭功能.HepG2经NEAT1敲低后2×10^6/0.2 ml腋下注射建立裸鼠皮下成瘤模型,与对照组(si-NC)比较肿瘤体积,hnRNP A2表达.结果 U2AF65能够与NEAT1和hnRNP A2 mRNA相互作用(富集度分别为IgG的82.659倍和53.527倍),NEAT1敲低降低了hnRNP A2 mRNA转录和蛋白表达(P<0.01),这种调控作用可能与NEAT1-U2AF65复合物相关,hnRNPA2过表达可以促进NEAT1敲低的HepG2细胞增殖和侵袭功能(P<0.01).结论 NEAT1通过调节hnRNP A2蛋白影响了肝细胞癌细胞的增殖和侵袭能力. 莽源祎 李立 冉江华 张升宁 刘静 李来邦 陈奕明 刘剑 高杨 任刚关键词:肝细胞 长链非编码RNA RNA结合蛋白 重组人生长激素对肝脏缺血再灌注损伤中的能量代谢变化 被引量:1 2007年 目的:探讨在肝脏缺血再灌注损伤中,应用rhGH(重组人生长激素)后,对肝细胞能量代谢的影响。方法:(1)用Pringle s法建立80只Sprague Dawley(SD)大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,实验组40只,对照组40只,另10只作空白对照。实验组皮下注射rhGH针剂0.2 U·100g^(-1)·d^(-1)共7 d,对照组分别给予等量的生理盐水。(2)分别于术后第1天、第7天、第14天、第28天取肝组织用高效液相色谱法检测ATP、ADP、AMP,并计算EC(能荷)。结果:rhGH组和对照组不同时点的EC水平的组间同期比较示:在1 d、28 d无显著差异(P>0.05),7 d、14 d有显著差异(P<0.05);组内14 d与28 d比较,无显著差异(P>0.05),其余各时点均有显著差异(P<0.05)。结论:rhGH能改善肝脏缺血再灌注损伤时肝细胞能量代谢状态。 冉江华 郭永章 李立 刘静 张升宁 李铸关键词:重组人生长激素 缺血再灌注损伤 能荷 大鼠减体积肝移植术后早期死亡的原因分析 被引量:2 2010年 目的探讨大鼠减体积肝移植术后早期死亡的原因。方法选择170对健康SD大鼠,体质量为260~280g,供体为雌性(170只),受体为雄性(170只),供、受体体质量相差10g,一般为供体体质量比受体体质量轻。改良前术式实施70只,改良后术式实施100只。结果成功实施的170只大鼠减体积肝移植模型中,早期(术后12h~术后3d)死亡25只,早期死亡率为14.7%,其中改良前术式死亡18只,改良后术式死亡7只。早期死亡的原因分布为:腹腔出血8只(4.7%),肠梗阻4只(2.4%),气体栓塞3只(1.8%),肝功能不良3只(1.8%),气胸3只(1.8%),肺部感染2只(1.2%),复温过度2只(1.2%)。结论大鼠减体积肝移植术后早期最常见的死亡原因是腹腔出血,其次为肝功能不良、气体栓塞、肠梗阻、气胸、肺部感染和复温过度。 刘静 李江 张升宁 李铸 李来帮 廖丽琼 冉江华 李立关键词:减体积肝移植 肝移植急性排斥反应早期诊断的实验研究 冉江华 李立 张升宁 刘静 李铸 李来邦 张鸿青 吴淑媛 张熙冰 刘滇生 罗惠林 蒋益舟 梁宇 主要技术内容:1、改良恒河猴肝移植模型的建立(1)选用健康恒河猴进行同种异体肝移植10次,借鉴临床肝移植和各种动物模型建立的方法,使用门静脉袖套法建立稳定的恒河猴原位肝移植模型;(2)10次恒河猴原位肝移植模型手术成功率...关键词:关键词:排斥反应 动物实验