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细菌素研究进展及在水产养殖中的应用前景被引量：7: 2006年; 细菌素是细菌产生的具有杀菌作用的一类多肽,分为广谱与窄谱.本文论述了细菌素的分类、遗传结构和作用机制,以及在食品工业、饲料和临床治疗中的应用,并阐述了细菌素在水产养殖病害防治中的潜在应用价值.; 张之文苏永全丁少雄王军; 关键词：细菌素大肠杆菌素乳酸菌素水产养殖

赤点石斑鱼HSP60基因克隆及弧菌应激前后的组织表达特性分析被引量：6: 2011年; HSP60(heat shock protein 60,热休克蛋白60)作为高度保守的热休克蛋白家族的一员,不仅可以在应激状态下帮助其他蛋白正确折叠并恢复天然构象,还可作为危险信号作用于天然免疫系统。基于HSP60的EST序列设计特异引物,采用RACE技术成功克隆获得赤点石斑鱼HSP60 cDNA全序列及基因组全序列。其cDNA序列全长2 351 bp,包括75 bp的5′UTR,539 bp的3′UTR和1 737 bp的开放阅读框,共编码578个氨基酸。核苷酸及氨基酸序列比对结果显示该基因与其他脊椎动物的相似性很高。基于氨基酸序列构建的系统进化树与传统物种树基本吻合,说明HSP60可能是1个潜在的可用于物种系统进化研究的良好标记。所获得的赤点石斑鱼HSP60基因组全序列含有8个内含子和9个外显子,也与已知其他硬骨鱼类基本一致。这种在序列特征、蛋白空间结构及基因组结构上的高度保守性意味着HSP60在动物生命活动中可能发挥着至关重要的作用。通过实时PCR检测结果发现HSP60在赤点石斑鱼各组织中均有表达,而攻毒后鱼体肝的表达量显著增高(P<0.05),鳃、脾、胃和脑等重要组织器官的表达量也有不同程度的提高,该结果证实了HSP60基因在鱼类非特异性免疫应答中发挥了作用。; 曲朦施晓峰张之文丁少雄; 关键词：赤点石斑鱼 HSP60 克隆

大黄鱼Ghrelin基因的克隆和序列分析被引量：2: 2009年; 利用RT-PCR、RACE等技术,从大黄鱼胃组织中克隆得出Ghrelin基因的cDNA(649 bp),其中包含5’非翻译区(5’UTR),起始密码子,信号肽、成熟肽、C-端肽序列的编码区,终止密码子,3’非翻译区(3’UTR)和相对较少见的多核苷酸化信号(ATTAAA).获得的cDNA编码108个氨基酸,与已报道的硬骨鱼类Grelin mRNA比对显示,相似性(Simi-larity)和一致性(Identity)最高(黑鲷Acanthopagrus schlegelii)可达81%和73%,推测的成熟肽包含硬骨鱼Ghrelin的相同活性中心和修饰位点,证明是鱼类Ghrelin同源基因.; 徐斌毛勇张之文苏永全; 关键词：GHRELIN 基因克隆大黄鱼

大黄鱼感染哈维氏弧菌后血液生化指标的变化及组织病理学观察被引量：47: 2010年; 从患病大黄鱼病灶中分离出病原哈维氏弧菌,并人工回接感染大黄鱼,病鱼出现典型的皮肤溃疡症。测定大黄鱼血液各项指标发现,病鱼单核细胞、嗜中性粒细胞、血栓细胞百分率明显下降,而淋巴细胞百分率增加,均呈极显著差异(P<0.01)。患病大黄鱼总蛋白为(12.8±3.95)g/L,对照组鱼为(19.4±4.33)g/L,病鱼球蛋白、甘油三脂、血糖含量也明显低于对照组(P<0.01)。然而病鱼谷丙转氨酶为(37±5.11)IU/L,对照组为(28±5.54)IU/L;病鱼谷草转氨酶为(164±47.19)IU/L,对照组为(117±21.84)IU/L,均呈极显著差异(P<0.01)。研究结果说明,病鱼肝脏和肾脏组织受损。对患病大黄鱼进行病理组织学观察,结果发现病鱼病变组织头肾、肝出现不同程度的变性以及坏死。细胞超微病变观察发现,头肾肾小管上皮细胞变性、坏死。肝细胞胞浆内脂滴积累多。血清指标的测定可以作为大黄鱼哈维氏弧菌病细菌感染的指标。; 徐晓津徐斌王军苏永全张之文陈心; 关键词：大黄鱼哈维氏弧菌血液生化指标组织病理

赤点石斑鱼、大黄鱼几种天然免疫因子的基因克隆及特性研究: 脊椎动物中免疫系统主要由天然免疫与适应性免疫两部分组成。鱼类作为最低等的脊椎动物，虽然在进化中获得了适应性免疫，由于鱼类的适应性免疫的产生受到多种因素的影响。在抵抗外界病原入侵的过程中，鱼类的天然免疫系统仍然具有至关重要...; 张之文; 关键词：免疫因子基因克隆适应性免疫凝集素肽聚糖识别蛋白; 文献传递

黄鳍金枪鱼巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的克隆与序列分析被引量：2: 2009年; 采用同源克隆的方法、利用RACE技术从黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)肝脏中克隆了其MIF(TaMIF)的cDNA序列。TaMIF的cDNA全长706 bp含一个345 bp的开放阅读框,编码一个长115氨基酸的蛋白质。信号肽预测分析表明TaMIF没有信号肽。序列分析与进化分析表明,黄鳍金枪鱼与近海养殖鱼类MIF的氨基酸序列高度相似、进化地位相近,预示着深海鱼类TaMIF与近海养殖鱼类具有相似的生物学功能。研究结果是对深海鱼类MIF基因信息资料的重要补充。; 毛勇王军张之文王定苏永全; 关键词：分子克隆

赤点石斑鱼ICLP基因的克隆和序列分析被引量：3: 2009年; MHC class II invariant chain-like proteins（ICLP）因子与免疫反应密切相关，其参与对抗原的处理，保证多肽不被进一步降鹪为氨基酸．通过RACE反应获得赤点石斑鱼ICLP2cDNA全序列，全长1837bp，包括44bp的5’UTR区，861bp的开放阅读框以及932bp的3’UTR区．编码286个氨基酸，推测的蛋白质分子量为31878u．对赤点石斑鱼10个组织的1CLP2基因进行PCR扩增和测序，结果表明赤点石斑鱼ICLP2基因的表达不存在组织特异性．此外，氨基酸序列同源比对的结果表明。赤点石斑鱼与其它16种脊椎动物ICLP2的相似度在25％～78％之间．与狼鲈和鳜鱼ICLP2因子的同源程度最高，分别为78％和74％．根据ICLP的氨基酸序列构建的脊椎动物系统进化树，表明了该分子的氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好指标．; 王颖张之文丁少雄杜佳莹施晓峰陈晓峰; 关键词：赤点石斑鱼

赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)MHC IIB基因的克隆与表达多态性分析被引量：18: 2009年; 主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex，MHC）是脊椎动物体内重要的非特异性免疫基因之一。为了研究赤点石斑鱼的MHC基因的结构与表达特性，本研究运用RACE，Realtime PCR及SSCP等技术，首次成功克隆获得赤点石斑鱼（Epinephelus akaara）非特异性免疫因子MHC IIB基因的4个cDNA全序列，序列全长为1195～1355bp，含有3’UTR、启动子、多肽结合区（β1）、IGC区（β2）、跨膜区、胞质区和5’UTR区，编码区大小为750bp。氨基酸序列分析发现赤点石斑鱼MHC IIB分子具有经典MHC蛋白分子的空间结构，在多肽结合区存在极其丰富的变异，β1区由1个α螺旋与4个反向平行的β折叠构成多肽结合区，β2区由多个β折叠构成2个反向平行的三明治结构。利用SSCP技术研究了赤点石斑鱼MHC IIB的表达多态性，发现其在头肾、心、肝等12个组织器官中均能有效表达，表达多态性也异常丰富。此外，根据MHC IIB分子中相对保守的IGC区氨基酸序列构建了脊椎动物的系统进化树，也表明了该分子的IGC区氨基酸序列可以作为研究鱼类物种间进化关系的良好标记。; 丁少雄张之文杜佳莹王军曾华嵩王颖陈晓峰; 关键词：赤点石斑鱼 MHC 多态性

利用改良Nest-tetra-primer specific PCR技术对两种石斑鱼的鉴别: 2009年; 云纹石斑鱼(Epinephelus moara)和褐石斑鱼(E.bruneus)为石斑鱼属内近缘种,外形相似常被混淆.本研究改良建立了Nest-tetra-primer specific PCR方法,获得了云纹石斑鱼和褐石斑鱼线粒体DNAND2基因内的3个特异性条带,分别为内参序列NC1(394bp)、特异性条带ND2-M(268bp)和ND2-B(122bp),以及核基因组中核糖体DNAITS1区的5个特异性条带,分别为内参序列NC2(588bp)、NC3(563bp),特异性条带rDNA-M(426bp)、ITS1-M(488bp)和ITS1-B(304bp).研究结果不仅为两种石斑鱼的鉴别提供了稳定、可靠、快捷的特异性分子标记,而且也为鱼类近缘种的DNA鉴别提供了新的途径.; 郭明兰苏永全张之文丁少雄王军; 关键词：云纹石斑鱼 SPECIFIC PCR

哈维氏弧菌人工感染大黄鱼的组织病理学研究被引量：12: 2009年; 从患病大黄鱼病灶中分离出病原哈维氏弧菌,并且人工回接感染大黄鱼,病鱼出现典型的皮肤溃疡病症.对患病大黄鱼进行病理组织学观察,结果发现病鱼病变组织头肾、脾、胸腺、肝和粘膜性淋巴组织肠的上皮细胞出现不同程度的变性以及坏死.细胞超微病变观察发现,这些组织的线粒体出现空泡化,头肾出现较多空泡,肾小管上皮细胞变性、坏死.颗粒细胞的细胞核核膜部分溶解.脾窦和脾索分界不明显,脾颗粒细胞核核膜溶解,胸腺中有较多空泡.肝细胞胞浆内脂滴积累多.肠绒毛萎缩,肠上皮细胞胞质多数线粒体、内质网等相互聚集固缩,粘膜上皮细胞坏死、脱落,以上研究结果有利于今后进行其致病机理的研究.; 徐晓津徐斌王军苏永全张之文陈心; 关键词：哈维氏弧菌大黄鱼组织病理

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