庄向生
- 作品数：121 被引量：564H指数：14
- 供职机构：福建省农业科学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项福建省自然科学基金福建省属公益类科研院所基本科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌可视化LAMP检测方法的建立与应用被引量：11
- 2013年
- 【目的】建立一种可快速检测副猪嗜血杆菌的环介导等温扩增(LAMP)方法。【方法】根据GenBank中副猪嗜血杆菌肽聚糖相关脂蛋白(PalA)基因序列,在其保守区域设计外引物、内引物和环引物用于LAMP检测。优化副猪嗜血杆菌LAMP检测的反应体系,在反应产物中加入SYBR GreenⅠ,对检测结果进行肉眼判定,建立副猪嗜血杆菌可视化LAMP检测方法,评价该检测方法的特异性、敏感性。用建立的副猪嗜血杆菌可视化LAMP检测方法对临床分离的8株不同血清型副猪嗜血杆菌进行检测。从疑似患副猪嗜血杆菌病的猪体内采集10种体液,用所建立的可视化LAMP检测方法进行检测。【结果】建立了副猪嗜血杆菌可视化LAMP检测方法,该法在55℃水浴1h即可对副猪嗜血杆菌核酸进行高效扩增,反应结束后加入SYBR GreenⅠ即可通过肉眼观察对结果进行判断。该方法具有很强的特异性,其对DNA核酸的最低检测限为40fg,是常规PCR检测最低限的100倍,显示出较高的敏感性;用建立的LAMP方法对8株不同血清型副猪嗜血杆菌进行检测,结果均为阳性。用建立的LAMP方法对10种体液进行检测,结果鼻液、气管液、胸腔渗出物、心脏血、脑膜液、腹腔液和关节囊液呈阳性,唾液、心包液和尿液呈阴性。【结论】建立了一种可对副猪嗜血杆菌进行快速检测并可凭肉眼判定结果的可视化LAMP方法,该法操作简便、反应快速、敏感性强、特异性高,适合在兽医基层进行推广应用。
- 车勇良陈如敬王隆柏江斌吴学敏刘玉涛严山庄向生周伦江
- 关键词：副猪嗜血杆菌环介导等温扩增技术
- 生物技术在国内禽病诊治中的应用
- 2001年
- 王标周伦江庄向生
- 关键词：生物技术单抗核酸探针禽病
- 鸡传染性法氏囊病的快速诊断被引量：5
- 1994年
- 应用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＦＭ＿１４）及其荧光标记物（ＦＭ＿１４－ＦＩＴＣ），对接种ＩＢＤ疫苗、强毒感染和自然病例鸡组织进行直接荧光抗体试验（ＤＦＡ）、斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳ－Ａ）和琼脂扩散试验（ＡＧＰ）三种检测方法的比较。结果表明，鸡接种疫苗后１０天内ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ均呈阳性反应，而ＡＧＰ只在接种后６～８天的样品中检出抗原。２２例人工感染鸡和４０例自然发病鸡组织的检测结果表明，ＤＦＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的敏感性基本一致，且高于ＡＧＰ，它们的整鸡阳性率分别为９６．８％、９５．２％和３８．７％；所有的ＡＧＰ阳性标本Ｄｏｔ－ＥＬＩ－ＳＡ和ＤＦＡ均为阳性，后两种方法的符合率为８７％。９６批次（被检鸡群达３８７００头份）野外送检病例之脾、肺、肾和法氏囊组织切片ＤＦＡ阳性率分别为４０％，１１％、１０％和８８％，而总阳性率则为９５％。
- 庄向生程由铨黄宁林天龙李怡英吴平
- 关键词：单克隆抗体鸡病IBD
- 鸭新型疱疹病毒的致病性研究被引量：3
- 2003年
- 本研究分别探讨了F株鸭新型疱疹病毒对番鸭、半番鸭、鹅和SPF鸡的致病性。经实验室人工感染试验表明该株病毒可导致雏番鸭、雏半番鸭发病、死亡 ,对雏番鸭的致死率为 2 5 %～ 6 6 .7% ,对雏半番鸭的致死率为 2 0 % ,且死亡鸭表现出与自然感染该病的病死雏番鸭、雏半番鸭相同的病变 ,自致死鸭脏器中重新分离到原攻击病毒 ;人工感染幸存鸭大多腹泻、生长发育明显受阻、体况消瘦。通过同居感染雏番鸭试验结果表明 ,该病毒不易经空气传播。对雏鹅、SPF雏鸡的人工感染试验结果可见 ,该病毒对雏鹅。
- 黄瑜李文杨程龙飞彭春香庄向生
- 鸭大肠杆菌病的诊治
- 2001年
- 翁秋美郑国荣王长兵刘健宏庄向生
- 关键词：大肠杆菌病
- 福建省猪流感H1和H3抗体的血清学调查被引量：8
- 2011年
- 为了掌握福建省猪群猪流感H1亚型和H3亚型的感染情况,采用ELISA方法,对2009年与2010年采集的1 323份血清进行了猪流感H1和H3抗体测定。结果显示,2009年全省猪群感染猪流感H1和H3的抗体阳性率分别为50.5%和21.0%,其中规模猪场的阳性率分别为53.2%和23.0%,散养户的阳性率分别为21.0%和7.8%,屠宰场的阳性率分别为33.3%和9.1%;2010年全省规模猪群感染猪流感H1和H3的抗体阳性率分别为49.4%和18.4%,其中种猪的阳性率分别为56.1%和20.1%,商品猪的阳性率分别为39.2%和15.8%。结果表明,福建省猪群不论饲养规模大小还是不同猪群均在不同程度上感染了猪流感,且感染猪流感H1的抗体阳性率比H3的高。
- 王隆柏俞玉鸿吴顺意修金生魏宏车勇良陈如敬吴学敏庄向生周伦江
- 关键词：猪流感血清学
- 猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒的分离与初步鉴定被引量：17
- 2003年
- 从患败血症仔猪的肺脏、淋巴结组织中分离到1株猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV);流行特征表现为仔猪出现严重的呼吸道症状;该病毒能在Marc-145细胞上生长,但不能在Vero、BHK21、RK等细胞上增殖;分离毒适应Marc-145细胞后,产生以皱缩、脱落、崩解为特征的细胞病变,分离毒Marc-145第4代的TCID50为10-6.725·0.1ml-1;ELISA抗体检测表明,病猪和分离毒接种仔猪体内含有PRRSVIgG、IgM抗体。
- 庄向生张德明周伦江王隆柏魏宏
- 关键词：症状细胞病变
- 猪圆环病毒Ⅱ型单克隆抗体的制备及应用被引量：2
- 2010年
- 【目的】制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体,并对其进行鉴定和应用。【方法】以超离纯化的猪圆环病毒Ⅱ型作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经间接ELISA筛选获得了2株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为8-60和10-48,对其生物学特性进行鉴定,并将其作为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。【结果】8-60和10-48的染色体数平均为98～105对,间接ELISA检测其细胞培养上清液效价分别为1∶16和1∶32,小鼠腹水效价分别为1∶3×212和1∶3×213,抗体的免疫球蛋白亚型均为IgM。间接免疫荧光结果显示,8-60和10-48能与PCV2发生反应;利用这种特性,建立了能诊断PCV2病原的间接免疫荧光诊断方法,实际应用结果表明,其诊断结果与PCR方法诊断结果基本一致,阳性和阴性的符合率分别为93.75%和100%。【结论】以制备的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。
- 车勇良周伦江王隆柏魏宏陈少莺陈如敬庄向生
- 关键词：单克隆抗体CAP蛋白ELISA方法间接免疫荧光
- 副猪嗜血杆菌oppA基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 采用PCR方法扩增副猪嗜血杆菌(Hps)的寡肽结合蛋白(Opp A)基因,序列测定结果表明,扩增片段全长1654 bp.将扩增片段插入表达载体p GEX-6P-1中,转化BL21进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明,重组融合蛋白大小约为87 ku,以纯化的重组蛋白Opp A作为抗原,建立Hps抗体的间接ELISA检测方法.通过试验确定最佳的反应条件为:抗原包被浓度为1.0μg·孔-1,于37℃包被1 h,待检血清的稀释度为1∶50,阳性判断标准(D450 nm)大于0.643.特异性和重复性试验结果表明,建立的间接ELISA方法具有良好的特异性和稳定性,可用于Hps抗体的检测.
- 车勇良陈如敬江斌王隆柏魏宏吴学敏庄向生周伦江
- 关键词：副猪嗜血杆菌克隆间接ELISA
- 猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因的克隆与表达被引量：2
- 2008年
- 猪圆环病毒II型(PCV2)是引起断奶后仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原。笔者用PCR方法扩增PCV2截短的ORF2基因并亚克隆至表达载体pGEX-6P-1,构建的重组表达质粒命名为pGEX-ORF2,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃经IPTG诱导4h。PCV2的cap蛋白以包涵体形式得到有效表达。经SDS-PAGE及Western blot分析表明表达的重组蛋白分子量约为46KD,重组蛋白具有良好的免疫学活性。
- 车勇良庄向生陈少莺魏宏王隆柏周伦江
- 关键词：ORF2原核表达
