- 兔实验性骨关节病髁突软骨细胞表达软骨基质分子的变化及白细胞介素1β的影响被引量：5
- 2003年
- 目的 :研究外源性炎症因子白细胞介素 1β(interleukin 1β,IL 1β)对颞下颌关节骨关节病与正常髁突软骨细胞代谢活动的影响 ,探讨其在颞下颌关节骨关节病进展过程中所发挥的作用。方法 :采用 2 0 μg·L-1重组白介素1β(recombinedhumaninterleukin 1β ,rhIL 1β)刺激体外贴壁培养条件下的成兔正常成熟髁突软骨细胞与兔实验性颞下颌关节骨关节病模型髁突软骨细胞 ,RT PCR方法检测、比较细胞对软骨基质成分Ⅱ型胶原、蛋白多糖聚糖体、胶原酶以及内源性生长因子胰岛素样生长因子 1(insulin likegrowthfactor 1,IGF 1)和转移生长因子 β1(trans forminggrowthfactor β1,TGF β1)的mRNA表达变化。结果 :在 2 0 μg·L-1rhIL 1β的刺激下 ,(1)正常成熟髁突软骨细胞Ⅱ型胶原和软骨蛋白多糖聚糖体的表达均明显降低 ,胶原酶表达水平变化不明显 ;(2 )在IL 1β的作用下 ,骨关节病软骨细胞对Ⅱ型胶原和胶原酶的表达水平降低 ,对软骨蛋白多糖聚糖体的表达水平无明显影响 ;(3)IL 1β对正常和骨关节病髁突软骨细胞内源性生长因子IGF 1和TGF β1的表达均无明显影响。 结论 :蛋白多糖聚糖体的合成 ,导致髁突软骨病变发生 ,而且能不断干扰骨关节病髁突软骨细胞代谢 ,导致关节软骨基质环境进一步恶化。
- 常嘉马绪臣马大龙
- 关键词：髁突软骨细胞白细胞介素1Β
- 颞下颌关节骨关节病髁突软骨细胞细胞生物学研究
- 目的：研究颞下颌关节骨关节病髁突组织中软骨细胞凋亡发生的特点;探讨颞下颌关节骨关节病软骨细胞的细胞生物学特性以及细胞因子对正常和骨关节病软骨细胞生物学特性的影响;研究软骨细胞体外培养中出现的去分化现象;探讨软骨细胞去分化...
- 常嘉
- 关键词：颞下颌关节骨关节病软骨细胞去分化藻酸盐凝胶
- 颞下颌关节髁突软骨细胞体外培养中去分化现象研究被引量：15
- 2004年
- 目的 研究去分化髁状突软骨细胞的细胞生物学特性。方法 连续在体外贴壁条件下培养传代正常乳兔髁突软骨细胞至第 2 0代 ,观察培养细胞的形态变化 ,免疫组化法和RT -PCR法对传代过程中的数代细胞对II型胶原与蛋白多糖聚糖体的表达情况进行连续检测 ,观察细胞软骨基质蛋白表达分泌的变化以及发生明显去分化软骨细胞的超微结构特点。结果 在贴壁培养条件下 ,髁状突软骨细胞去分化现象于细胞传代第 3代后逐渐显著 ,第 6代后培养的软骨细胞几乎完全去分化。去分化细胞胞体拉长 ,呈“成纤维细胞”样外观。去分化过程中 ,细胞对软骨基质蛋白的表达水平逐渐降低 ,细胞增殖速度增强。透射电镜观察显示 ,去分化软骨细胞细胞核明显呈分叶状 ,表现出异型核。结论 髁突软骨细胞在体外贴壁培养传代过程中会发生去分化现象 ,丧失软骨细胞特征性细胞表型。
- 常嘉马绪臣焦岩涛
- 关键词：颞下颌关节髁突体外培养骨关节病
- 颞下颌关节骨关节病髁状突软骨细胞体外培养及细胞生物学特性研究被引量：11
- 2001年
- 目的 :从兔的颞下颌关节骨关节病模型动物获得髁状突软骨细胞并行体外培养。方法 :采用部分关节盘手术切除的方法制造颞下颌关节骨关节病模型 ,组织大体观察、超微结构观察和组化检测方法确定骨关节病的存在。在此基础上 ,通过机械分离、胰蛋白酶和胶原酶联合消化的方法从骨关节病髁状突软骨组织中获得软骨细胞 ,进行体外环境下的贴壁培养 ;通过软骨细胞特异性蛋白的免疫组化方法进行细胞鉴定。四甲基偶氮唑盐法比较病理模型细胞与正常细胞的增殖能力差异。结果 :上述颞下颌关节骨关节病模型全面地模拟了骨关节病变关节软骨组织的特征 ;利用机械分离、胰蛋白酶胶原酶联合消化的方法成功地从骨关节病髁状突软骨组织中分离出软骨细胞并在体外贴壁条件下培养成活 ;应用特异性的Ⅱ型胶原多克隆抗体和聚合性糖胺多糖单克隆抗体对培养细胞进行免疫组化检测鉴定 ,均显示阳性。骨关节病髁状突软骨细胞的增殖能力高于正常细胞。结论 :成功地建立了骨关节病髁状突软骨细胞的体外模型 ;骨关节病早期的髁状突软骨细胞表现出增殖活跃的特性。
- 常嘉马绪臣孙开华武登诚焦岩涛
- 关键词：细胞生物学颞下颌关节疾病细胞体外培养动物实验
- 颞下颌关节骨关节病髁突软骨细胞及基质合成代谢特性的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨颞下颌关节骨关节病(TMJOA)软骨细胞的细胞生物学特性。方法 通过手术切除部分关节盘的方法,制造TMJOA的兔动物模型;从模型动物处于骨关节病病变增殖修复期的髁突软骨组织中获取细胞体外培养,并采用RT-PCR法比较病变软骨细胞与正常对照细胞对软骨基质蛋白、基质胶原酶和内源性生长因子的表达差异。结果 从TMJOA模型的髁突软骨组织中获得细胞经体外培养、鉴定,确认为软骨细胞;骨关节病髁突软骨细胞对软骨基质蛋白的表达不平衡,对内源性基质胶原酶的表达水平和内源性生长因子TGF-β1、IGF-1的表达明显增强。结论 本研究从细胞生物学角度证实了骨关节病早期关节软骨内出现合成代谢活跃的组织学特点,并发现该阶段组织细胞的修复代偿反应可致软骨基质成分合成的不平衡,最终可导致软骨基质环境改变。
- 常嘉马绪臣马大龙李现庭夏东岚
- 关键词：颞下颌关节骨关节病软骨细胞基质合成基质代谢下颌骨髁状突
- 兔髁状突软骨细胞藻酸盐凝胶三维培养体系的建立被引量：2
- 2002年
- 目的 :建立兔髁状突软骨细胞的藻酸盐凝胶三维培养体系。方法 :利用机械与酶消化的方法获得均一性的兔髁状突软骨细胞 ,在二维贴壁培养条件下增殖至P2代 ;将P2代细胞高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质 ,进行三维培养 ;分别对培养细胞凝胶微球行石蜡包埋与树脂包埋切片 ,对三维培养条件下的软骨细胞行组织化学、免疫组织化学检测和超微结构观察。藻酸盐凝胶三维体系培养 6周后 ,以EDTA分解凝胶 ,收获培养的软骨细胞 ,免疫组化法检测三维体系中收获的软骨细胞的蛋白合成能力。结果 :藻酸盐凝胶三维培养体系中的髁状突软骨细胞生长状态良好 ;培养 6周后从凝胶体系中收获细胞的软骨特异性功能蛋白表达水平较转入三维体系前未见降低 ,培养细胞保持了良好的分化表型。结论 :成功地建立了髁状突软骨细胞的藻酸盐凝胶三维培养体系 ,在该体系中 ,软骨细胞生长状态与功能蛋白分泌能力良好。
- 常嘉马绪臣魏明洁王晶焦岩涛
- 关键词：髁状突三维培养体系细胞培养
- 颞下颌关节骨关节病发病机理及髁突软骨细胞生物学研究
- 马绪臣张震康马大龙方平科甘业华姚向前焦岩涛常嘉傅开元程鹏武登诚
- 颞下颌关节骨关节病（TMJOA）发病机理和细胞生物学的研究。通过关节液的检测首次发现IL-1及其受体拮抗剂IL-1rα、IL-10、TGF-β在正常人和TMJOA患者中存在显著差异。认为IL-1rα、IL-10、TGF-...
- 关键词：
- 关键词：颞下颌关节骨关节病发病机理
- 颞下颌关节骨关节病动物模型的建立及组织病理学观察被引量：13
- 2003年
- 目的 建立稳定的颞下颌关节骨关节病动物模型。方法 通过外科手术切除部分关节盘的方法 ,在成年兔上建立较为稳定的颞下颌关节骨关节病动物模型 ;分别于术后第 15天、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月和 6个月将实验兔处死 ,取实验侧髁突组织进行组织病理学观察 ;1%甲苯胺蓝染色 ,观察病变髁突组织中蛋白多糖的分布范围与水平变化。结果 本研究中的颞下颌关节骨关节病模型从组织病理学上先后观察到了关节盘损伤后早期关节软骨的应激性修复增殖 ,中期软骨基质渐进性损耗 ,后期软骨基质损耗丧失、纤维组织修复覆盖及骨赘形成等软骨退行性变过程。甲苯胺蓝染色显示 ,病变早期肥大增厚的软骨组织中蛋白多糖含量降低 ,且分布不均匀 ;病变晚期的髁突较深层软骨组织中仍可见有蛋白多糖的合成与分布。结论 本研究所建立的颞下颌关节骨关节病动物模型能较好地模拟骨关节病的组织病理学变化过程 ,且具有结果稳定。
- 常嘉马绪臣武登诚焦岩涛
- 关键词：颞下颌关节骨关节病动物模型组织病理学手术切除手术方法
- 颞下颌关节骨关节病髁突组织细胞凋亡的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 研究颞下颌关节骨关节病髁突组织中软骨细胞凋亡发生的特点,探讨细胞凋亡在颞下颌关节骨关节病发病机制中的作用。方法 通过手术切除部分关节盘的方法建立颞下颌关节骨关节病动物模型,15 d-6个月内采用TUNEL法标记髁突各相应时段的凋亡细胞,结合相应组织学变化,观察、分析颞下颌关节骨关节病髁突组织中细胞凋亡发生的特点。结果 关节盘损伤后软骨产生明显应激性修复增殖反应时,凋亡细胞主要集中于关节表面的纤维层中;随着关节软骨和骨组织不断改建,软骨组织中逐渐出现大量的细胞凋亡现象,主要发生于表面纤维层与增殖层,尤其集中在软骨细胞簇中;在软骨组织消耗严重时,浅表区域内的细胞凋亡现象逐渐减少,肥大钙化层中出现了较多的凋亡细胞。结论 颞下颌关节骨关节病髁突软骨组织中存在过量凋亡的现象,软骨细胞异常增殖与过度凋亡导致软骨基质自身调节机制的破坏可能是骨关节病发生的重要原因之一。
- 常嘉马绪臣武登诚焦岩涛
- 关键词：颞下颌关节骨关节病髁突细胞凋亡凋亡细胞关节盘软骨组织
- 藻酸盐凝胶三维培养体系在TMJ骨关节病髁突软骨细胞体外培养中的应用被引量：6
- 2002年
- 目的 将藻酸盐凝胶三维培养体系应用于颞下颌关节骨关节病 (osteoarthritisoftemporomandibularjoint,TMJOA)髁突软骨细胞的体外培养。方法 利用机械与酶消化的方法从TMJOA患者手术切除患疾髁突软骨中获得髁突软骨细胞 ,部分细胞在二维贴壁培养条件下体外培养 1周 ;部分细胞在高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质 ,进行三维培养 4周 ;分别对贴壁条件下培养细胞和藻酸盐细胞凝胶微球石蜡包埋切片进行Ⅱ型胶原和软骨特异性蛋白多糖的免疫组化鉴定。结果 从骨关节病髁突软骨组织中收获并行体外培养成活的细胞 ,鉴定为软骨细胞 ;体外培养的藻酸盐凝胶三维培养体系中的髁突软骨细胞生长状态良好 ;培养 4周后细胞保持了良好的分化表型。结论 成功地体外培养成活了人TMJOA髁突软骨细胞 ;成功地将藻酸盐凝胶三维培养体系应用于人TMJOA髁突软骨细胞体外培养 ,在该体系中 ,软骨细胞生长状态与功能蛋白分泌能力良好。
- 常嘉马绪臣魏明洁王晶焦岩涛
- 关键词：藻酸盐凝胶三维培养体系髁突软骨细胞颞下颌关节骨关节病
