屈巾力
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南华大学船山学院更多>>
- 发文基金：湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目湖南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒16型E5蛋白真核载体的构建及表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E5蛋白真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E5,分析E5在HeLa细胞及BALB/c小鼠肌肉组织中的表达。方法设计HPV16 E5基因引物,PCR扩增E5基因,经BamHI、EcoRI酶切后将其连接入pcDNA3.1(+),PCR及双酶切筛选阳性克隆并测序。将构建的pcDNA3.1(+)/HPV16 E5转染HeLa细胞,利用RT-PCR测定HPV16 E5 mRNA表达。将6只BALB/c小鼠分为3组,分别取100 mg pcDNA3.1(+)/HPV16 E5、100 mg pcDNA3.1(+)、100 mL PBS经肌肉注射小鼠,2周1次,共4次;末次接种后第14天取小鼠股四头肌制成石蜡切片,免疫组织化学法检测E5蛋白在小鼠肌肉组织中的表达。结果 PCR扩增得到252 bp HPV16 E5基因片段,DNA测序结果显示E5基因片段正确地连入pcDNA3.1(+)。构建的pcDNA3.1(+)/HPV16 E5在HeLa细胞表达大小为252 bp的HPV16 E5 mRNA。小鼠股四头肌细胞膜被染成棕黄色。结论构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)/HPV16 E5能在HeLa细胞及小鼠肌肉组织中表达HPV16 E5蛋白。
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- 关键词：E5
- 人乳头瘤病毒16型E5与IL-12联合基因疫苗的免疫活性被引量：3
- 2011年
- 为了研制人乳头瘤病毒16型(HPV16)防治性疫苗,分析了HPV16 E5与IL-12联合基因疫苗的免疫活性。将构建的pcDNA3.1(+)/E5与pcDNA3.1(+)/IL-12联合免疫BALB/c小鼠,以ELISA测定小鼠血清中抗HPV16 E5 IgG水平、小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4含量;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应。结果显示末次免疫后,联合基因疫苗组和单基因疫苗组血清IgG A450值分别明显高于pcDNA3.1(+)组、pcDNA3.1(+)/IL-12组和PBS组(P<0.01);且联合基因疫苗组显著高于单基因疫苗组(P<0.01)。联合基因疫苗组和单基因疫苗组的IFN-γ和IL-4含量分别均明显高于pcDNA3.1(+)组、pcDNA3.1(+)/IL-12组和PBS组IFN-γ和IL-4含量(P<0.01),且联合基因疫苗组含量显著高于单基因疫苗组(P<0.01)。联合基因疫苗组和单基因疫苗组脾淋巴细胞刺激指数(SI)分别显著高于pcDNA3.1(+)组、pcDNA3.1(+)/IL-12组和PBS组(P<0.01);联合基因疫苗组与单基因疫苗组比较,SI差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明HPV16 E5单基因疫苗以及与IL-12联合基因疫苗均能刺激机体产生较强的免疫应答,且联合基因疫苗优于单基因疫苗。
- 李薇唐双阳朱翠明屈巾力龙敏芝陈熙万艳平
- 关键词：E5IL-12疫苗
