寇明文
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小分子干扰RNA介导的RhoA沉默优化胎肝干细胞培养被引量：3
- 2012年
- 背景:细胞移植治疗是目前的研究热点之一,寻找良好的细胞来源并有效扩增,是大量临床应用的基础。目的:通过沉默RhoA基因优化胎肝干细胞培养方法。方法:体外培养胎肝干细胞,经小分子干扰RNA转染以沉默RhoA基因表达,分为3组:A组为干细胞组,B组为经随机打乱顺序的小分子干扰RNA转染干细胞组,C组为经小分子干扰RNA转染的干细胞组。应用反转录-聚合酶链反应、Western blot法检测胎肝干细胞在转染前后RhoA基因和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞生长的优化作用;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果与结论:转染小分子干扰RNA后C组与A、B组相比,RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P<0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多,各组间差异有显著性意义(P<0.05)。提示通过沉默RhoA基因的方法可以促进胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。
- 赵戈刘卫辉王涛王兴夏宁杨平寇明文张宁陶开山
- 关键词：胎肝干细胞细胞培养RHOA
- 骨髓间充质干细胞对急性胰腺炎大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）对急性胰腺炎（AP）大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路的影响，探讨其减轻胰腺炎的作用机制。方法采用腹腔注射L-精氨酸建立大鼠AP模型。SD大鼠随机分4组：AP未治疗组（24只）；MSCs移植组（24只）；p38MAPK抑制组（24只）和正常对照组（6只）。流式细胞术检测MSCs表面标记物；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测胰腺组织p38MAPKmRNA表达变化；同时观察组织形态学改变。结果（1）未治疗组大鼠在建模后1h时胰腺组织p38MAPKmRNA表达显著升高并达到顶峰（P〈0．01）；移植MSCs后表达明显降低，与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）未治疗组血清炎性因子水平分别为：肿瘤坏死因子（TNF）-α（614．8±54．6）ng／L、白细胞介素（IL）-1（3040．5±506．4）ng／L、IL-17（4．5±0．4）U／L，胰腺组织中性粒细胞趋化因子（CINC）和单核粒细胞趋化因子（MCP-1）染色阳性率均明显升高（P〈0．05）；移植MSCs后，CINC、MCP-1染色阳性率显著下降，血清炎性因子水平分别为：TNF-α（277．5±60．8）ng／L、IL-1（1056．2±563．1）ng／L、IL-17（1．2±0．4）U／L，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）胰腺组织苏木素-伊红（HE）染色显示，未治疗组有大量炎性细胞浸润，胰腺细胞破坏明显，腺体结构紊乱，而移植组仅见少量炎性细胞浸润，细胞偶有破坏，排列整齐，结构有序。结论急性胰腺炎时，胰腺组织内p38MAPKmRNA表达上调，胰腺组织损伤严重。MSCs移植可以明显抑制p38MAPKmRNA表达，降低胰腺组织内趋化因子和血清炎性因子水平，从而减轻胰腺损伤。
- 杨平宋振顺寇明文卢鹏赵戈张福琴
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶骨髓间充质干细胞急性胰腺炎
- L-精氨酸和雨蛙素诱导急性胰腺炎模型的对比研究被引量：9
- 2012年
- 目的:研究L-精氨酸和雨蛙素分别诱导SD大鼠急性胰腺炎(AP)模型的差异,为进一步研究急性胰腺炎提供可靠模型。方法:L-精氨酸采用3次腹腔注射,间隔1 h,雨蛙素采用7次腹腔注射,间隔1 h诱导急性胰腺炎模型。碘-淀粉比色法检测血清淀粉酶水平,血清脂肪酶测定试剂盒检测脂肪酶活性,胰腺组织切片观察组织的破坏情况,TUNEL法检测腺泡细胞凋亡。结果:①L-精氨酸诱导的大鼠模型血清淀粉酶和脂肪酶水平在诱导成功后6 h即显著升高,蛙皮素诱导的大鼠模型在12 h显著升高,与正常对照组比较均有统计学差异(P<0.05),提示急性胰腺炎建模成功。②L-精氨酸诱导的模型中胰腺组织结构破坏,有大片出血坏死灶、大量炎细胞浸润;而蛙皮素诱导的模型组织腺泡、间质水肿,炎性细胞浸润,少量散在出血坏死灶,血管变化常不明显,渗液清亮。结论:L-精氨酸和雨蛙素均能诱导SD大鼠急性胰腺炎模型,L-精氨酸诱导重症急性胰腺炎,雨蛙素诱导轻型急性胰腺炎,是研究急性胰腺炎的良好模型。
- 杨平寇明文赵戈卢鹏宋振顺
- 关键词：急性胰腺炎L-精氨酸雨蛙素
