孙然
- 作品数：26 被引量：98H指数：6
- 供职机构：吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、SFN基因启动子区甲基化异常与皮肤鳞癌关系的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨O^6_甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（MGMT）、SFN基因启动子区甲基化异常与皮肤鳞癌发生的关系及临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测40例皮肤鳞癌和20例正常皮肤组织中MGMT、SFN两组基因甲基化状态及mRNA的表达。结果鳞癌组织中的MGMT、SFN基因启动子附近甲基化频率分别为42．5％、35．0％，明显高于正常皮肤组织的10．0％和5．0％，差异有统计学意义（P〈0．05），而鳞癌组织中MGMT和SFN的mRNA表达则低于正常皮肤组织（P〈0．05）。结论皮肤鳞癌组织中MGMT、SFN基因启动子区附近高甲基化与该肿瘤的发生密切相关。
- 王亮王伟杨宏凤孙然孙鸿燕丛宪玲
- 关键词：皮肤鳞癌甲基化
- 利用CAL-1-L929细胞建立一种抑制性寡聚脱氧核苷酸筛选体系
- 2018年
- 目的利用树突状细胞CAL-1的肿瘤坏死因子-α（TNF—α）检测平台，以进一步应用于抑制性寡聚脱氧核苷酸的筛选。方法以含有未甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸CpG（CpGODN）0800（3μg／ml）作为刺激剂，将其作用CAL-1细胞（2×10^5个细胞／孔），48h后收集上清，作用于L929细胞（2×10^4个细胞／孔））。培养18h，加入水疱性口炎病毒（VSV），培养72h，检测570nm处的吸光度值。结果筛选条件确定为CpGODN0800终质量浓度为3μg／ml，CAL-1上清液1：5倍稀释。L929细胞数在2×10^4个细胞／孔），反应时间为24h。应用此条件成功筛选小自行设计的抑制性ODN—SAT05f。结论建立实验体系，成功检测了自行设计的抑制ODN和CpGODN诱导的CAL-1细胞的TNF—α的生物学活性。
- 孙然李春梅张永胜张乐宁时景伟
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α
- 膀胱癌组织中KIAA0101的表达和临床意义
- 2012年
- 目的检测膀胱尿路上皮癌组织中KIAA0101的表达情况,探讨KIAA0101的表达与膀胱尿路上皮癌生物学行为的相关性。方法采用RT-PCR检测63例膀胱癌组织和癌旁组织中KIAA0101的mRNA水平表达情况,采用Westernblot方法检测上述癌组织中KIAA0101的蛋白表达水平。将KIAA0101基因表达水平与患者临床病理学特征及预后进行相关性分析。结果癌组织中KIAA0101的转录和翻译水平均高于正常组织,两者有统计学差异(P<0.01)。KIAA0101的表达与肿瘤临床分期和浸润深度有关,KIAA0101高表达者预后较差(P<0.001)。结论 KIAA0101基因的表达水平增高可能与膀胱尿路上皮癌的发生、临床分期及其浸润深度有关,且有望成为判断膀胱尿路上皮癌预后的一个重要指标。
- 刘明晖王长宏晋学飞孙然
- 关键词：膀胱肿瘤逆转录聚合酶链反应
- 结直肠癌组织EGFR表达与淋巴结及肝转移相关性的Meta分析被引量：6
- 2013年
- 目的:分析研究表皮生长因子(EGFR)在中国结直肠癌患者癌组织中的表达与淋巴结转移及肝脏转移的相关性。方法:利用万方、维普、CNKI、PubMed、Web of Science和EMBASE数据库,以"结直肠癌、结直肠肿瘤、大肠癌、EG-FR、表皮生长因子受体"为关键词,检索2000-2012年公开发表的关于结直肠癌患者癌组织中EGFR的表达与淋巴结转移及肝脏转移关系的文献,对文献进行筛选和评价,符合标准的文献用Revman 5.0软件进行Meta分析。结果:EG-FR表达与淋巴结转移相关文献入选17篇,共2 092例患者,淋巴结转移患者1 040例,523例EGFR阳性,无淋巴结转移者1 052例,327例EGFR阳性,异质性检验提示各研究结果间存在异质性(χ2=43.48,P=0.000 2,I2=63%),采用随机效应模型进行合并OR=3.17,95%CI=2.19～4.60,合并效应量的检验结果显示z=6.08,差异有统计学意义(P<0.01),提示有淋巴结转移的患者,癌组织中EGFR的表达高于无淋巴结转移者;EGFR表达与肝转移相关文献入选4篇,共385例患者,其中肝转移患者154例,90例EGFR阳性,无肝转移者231例,65例EGFR阳性,异质性检验存在异质性(χ2=14.44,P=0.002,I2=79%),采用随机效应模型进行合并,OR=3.99,95%CI=1.04～15.36,合并效应量的检验结果显示z=2.01,差异有统计学意义(P=0.04),提示有肝转移的患者,癌组织中EGFR的表达显著高于无肝转移者。结论:在中国结直肠癌患者中,发生淋巴结转移和肝转移的患者癌组织中EGFR的表达明显升高,EGFR检测对筛选高危转移者具有重要意义。
- 孙鸿燕孙然刘铁王雷杨宏凤丛宪玲
- 关键词：结直肠肿瘤肝转移META分析
- 利用小鼠脾细胞上清抗病毒活性建立新型抑制性ODN的体外筛选方法
- 2009年
- 目的：通过检测小鼠脾细胞上清抗病毒活性,建立一种体外筛选小鼠敏感的新型抑制性寡聚脱氧核苷酸（ODN）的方法,为后续小鼠体内实验提供抑制性ODN的体外筛选方法。方法：将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组,收集不同浓度（0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00、16.00及32.00 mg.L-1）的CpG 2216刺激上清及CpG 2216作用小鼠脾细胞不同时间（3、6、12、24、48、72及96 h）的刺激上清,通过VSV病毒保护实验检测的A578评价各组上清的抗病毒活性,确定CpG 2216的最佳作用浓度、作用时间及刺激上清稀释度;再将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216＋抑制性ODN（A151）组,同上确定A151的最佳作用浓度;将小鼠脾细胞分为对照组、CpG 2216刺激组、CpG 2216＋抑制性ODN（MAT0106）组,应用上述优化的实验条件如各ODN剂量、作用时间等处理细胞后,收集刺激上清,采用VSV病毒保护实验,观察各抑制性ODN的抑制作用,以初步判定此方法的可行性。结果：筛选方法确定为：浓度为5×10^6·mL^-1的小鼠脾细胞铺于96孔圆底细胞培养板,加入CpG 2216至终浓度2 mg·L^-1和/或抑制性ODN至终浓度16 mg·L^-1,孵箱中培养24 h后收集上清,1∶4稀释上清后加入已贴壁的L929细胞板内,共孵育18 h后弃上清,加入VSV病毒液继续培养48 h。弃净上清后结晶紫染色、脱色并检测A578。此种筛选方法可以区别本室自行设计的抑制性ODN之间的抑制活性。结论：成功建立了抑制性ODN抑制小鼠脾细胞抗病毒活性的筛选方法,抑制性ODN的小鼠体外筛选方法的建立,为后续抑制性ODN在小鼠体内的生物学活性观察提供了体外筛选平台。
- 杨光孙然孙陆果万敏王莉吴秀丽胡大利王丽颖于永利
- 关键词：CPGODN小鼠近交BALBC脾细胞抗病毒活性
- 银杏叶注射液对冠心病患者血清CRP、TNF-α水平的影响及临床疗效分析被引量：5
- 2012年
- 目的观察分析银杏叶注射液治疗冠心病的临床疗效及对患者血清C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响，总结其临床意义。方法选取我院2009年5月～2011年5月56例冠心病患者，随机分为观察组和对照组，每组各28例，对照组采取抗缺血、调脂、抗血小板等常规治疗，观察组在常规治疗的基础上加用银杏叶注射液治疗，观察比较两组治疗效果。结果观察组总有效率为89-3％（25／28），对照组总有效率为71．4％（20／28），两组治疗效果比较差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组和对照组治疗后血清CRP、TNF-α水平均有下降，观察组治疗后下降程度更为明显（19〈0．05）。结论在常规治疗的基础上加用银杏叶注射液治疗肺心病的临床疗效显著，能有效改善心功能。降低血脂及炎症反应。缓解临床症状，减少并发症发生．具有重要的临床应用价值。
- 刘明晖孙然齐山王羽丰方美善王长宏
- 关键词：银杏叶注射液冠心病C反应蛋白肿瘤坏死因子-Α
- 结直肠癌患者凋亡蛋白酶活化因子1、ARF抑癌基因和RUNT相关转录因子3基因甲基化标志物研究被引量：4
- 2016年
- 目的 观察结直肠癌组织中凋亡蛋白酶活化因子1（APAF1）、ARF抑癌基因（p14ARF）和RUNT相关转录因子3（RUNX3）基因启动子区甲基化状态,探讨其用于诊断的意义.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术检测70例结肠癌患者及对应正常肠黏膜细胞中APAF1、p14ARF和RUNX3基因的甲基化状态.结果 APAF1、p14ARF和RUNX3基因在结肠癌组织的甲基化比例分别为78.5％、54.2％和47.1％;在病理分期为Ⅱ期组织中高表达的基因有RUNX3、APAF1,在病理分期为Ⅲ期高表达的基因有p14ARF和APAF1.结肠癌组织中APAF1、p14ARF和RUNX3基因甲基化明显高于结肠息肉（P＜0.05）.结论 APAF1、p14ARF和RUNX3基因异常甲基化与结肠癌发病密切相关.
- 孙然陈丽波李长锋
- 关键词：结直肠癌抑癌基因甲基化特异性聚合酶链反应
- 应用RAW264.7-L929细胞系建立一种新型抑制性ODN的筛选方法
- 2009年
- 目的:为研究拮抗TNF-α的新型免疫抑制性ODN建立一种快速的筛选方法。方法:以CpGODN1826作为刺激剂,将其作用于小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞,6h后收集上清,作用于L929细胞,利用L929是TNF-α敏感细胞的原理,检测TNF-α活性。结果:筛选条件确定为CpGODN1826终浓度为20mg/L,RAW264.7上清液1/80倍稀释。放线菌素D浓度为1mg/L,L929细胞数在2×104个/孔,反应时间为18h。应用此条件成功筛选出自行设计的抑制性ODN-IMO03。结论:建立的实验体系,能很好的区分自行设计的ODN抑制CpGODN1826诱导的RAW264.7细胞的TNF-α的生物学活性。
- 孙然杨光吴秀丽孙陆果王丽颖于永利
- 关键词：TNF-Α放线菌素D
- 铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝菌毛株对膀胱癌细胞增殖的抑制作用及机制被引量：2
- 2014年
- 目的 观察铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝菌毛株（PA-MSHA）对膀胱癌细胞株的作用,探讨其作用机制.方法 使用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测肿瘤细胞的增殖,荧光染色法检测细胞凋亡形态,分光光度法检测凋亡因子半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-2和Caspase-9的水平.结果 磷酸盐缓冲液（PBS）组作用T24和5637细胞A450值分别为1.31和1.62,PA-MSHA组A450值分别为0.28和0.41,两组差异有统计学意义（P＜0.05）;PA-MSHA处理后的膀胱癌细胞出现凋亡小体;PA-MSHA能够活化T24和5637细胞中Caspase-3及Caspase-9蛋白,与PBS组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 PA-MSHA可以抑制T24和5637细胞增殖,并诱导凋亡.
- 李劲然丛乐乐杜珍武孙然张乐宁
- 关键词：脱噬作用
- 白头翁提取液对溃疡性结肠炎模型大鼠血清TNF-α、IL-10的影响被引量：13
- 2015年
- 目的研究白头翁提取液对溃疡性结肠炎模型大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-10的影响。方法将Wistar大鼠48只随机分为6组:正常对照组、模型组、中药高、中、低剂量组、SASP组,采用TNBS法制备溃疡性结肠炎大鼠模型,中药高、中、低各剂量组分别按相应剂量给予白头翁水提取液灌胃;SASP组给予SASP水溶液灌胃;正常对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,各组均连续给药15 d后观察大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)及检测血清中TNF-α、IL-10含量。结果与正常对照组比较,模型组大鼠CMDI评分均增加;与模型组比较,白头翁各剂量组与SASP组CMDI评分均降低;与SASP组比较,白头翁中剂量组显著降低。与正常对照组相比,模型组大鼠血清中TNF-α含量显著上升,IL-10含量显著下降;与模型组相比,白头翁各剂量组与SASP组大鼠血清中TNF-α含量均显著下降,IL-10含量显著上升。结论白头翁水提取液在溃疡性结肠炎的治疗中可能通过降低血浆中TNF-α水平和升高IL-10水平,起到促进溃疡性结肠炎肠黏膜修复与溃疡愈合的作用。
- 吴强刘明晖孙然晋学飞王璞
- 关键词：溃疡性结肠炎血清细胞因子TNF-ΑIL-10
