孙叶方
- 作品数：19 被引量：53H指数：5
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Quicktrans转化试剂盒的应用
- 2002年
- 目的 :明确快速转化法的转化效率及影响因素。方法 :采用Quicktrans快速转化试剂盒制备感受态细胞 ,对不同类型的质粒进行转化。同时分析菌种、冻存时间对转化的影响 ,并与常规氯化钙法进行转化效率的比较。结果 :快速转化法可有效转化不同类型的质粒 ,对于同一种质粒 ,不同菌种和冻存时间对转化效果无影响。快速转化法转化效率高于常规氯化钙法。结论 :快速转化法是一种快速。
- 孙叶方王捍国肖明振赵守亮
- 关键词：质粒分子生物学
- 中间型类杆菌与其它几株口腔常见菌之间的相互关系一动物实验被引量：1
- 1991年
- 用动物模型的方法观察了中间型类杆菌与其它几株口腔优势菌之间的相互关系。在小鼠模型中,中间型类杆菌分别与α—溶血性链球菌、具核梭杆菌、粘性放线菌、微小消化链球菌、迟缓真杆菌进行两两混合接种于皮下,并与单菌接种的结果相比较。结果表明中间型类杆菌能与α—溶血性链球菌,具核梭杆菌、粘性放线菌之间有协同作用。在狗牙模型中,中间型类杆菌分别与α—溶血性链球菌,具核梭杆菌混合按种子狗牙根管内,以观察其对尖周组织的影响。结果表明混合组造成的尖周破坏加重,单菌组无致病性。
- 倪龙兴史俊南杨聚才孙叶方张孝齐
- 关键词：动物模型
- 用动物模型法检测感染根管内常见厌氧菌的相互关系
- 1993年
- 用小鼠皮下接种的方法观察了牙龈类杆菌、中间型类杆菌和产黑色素类杆菌分别与α-溶血性链球菌之间在毒力或致病性上的相互影响。结果显示:混合接种组细菌毒力明显增强,注射区以外转移性脓肿的形成率增加,小鼠死亡率增加,原接种菌的存活力提高,说明这些感染根管内优势厌氧菌与兼性厌氧菌之间存在着明显的协同关系。
- 倪龙兴史俊南孙叶方杨聚才张孝齐
- 关键词：动物模型根管感染优势菌
- 新型磁胶根管充填料抑菌作用的初步观察被引量：1
- 1993年
- 用新型磁性胶体根管充填料(简称新磁胶)对感染根管内部分常见的需氧菌和厌氧菌:金黄色葡萄球菌(Sa)、α—溶血性链球菌(Sh)、中间型类杆菌(Bi)和具核梭杆菌(Fn)进行抑菌试验。结果新磁胶和胶液对Bi和Sh有中度抑制作用,对Fn和Sa基本上无抑制作用;两种材料的抑菌性有选择性,相差极显著(P<0.01)。磁粉对上述4种细菌均无抑制作用。新磁胶与酚醛树酯液对比,前者抑菌谱较窄,抑菌作用也较小,二者相差极显著(P<0.01)。
- 徐逸敏史俊南孙叶方
- 关键词：抑菌作用需氧菌厌氧菌
- hOP-1成熟肽基因表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2002年
- 目的 :构建hOP - 1成熟肽基因表达载体 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为研究OP - 1的功能作用以及制备OP - 1抗体奠定基础。方法 :构建hOP - 1/pEH4表达载体 ,转化大肠杆菌DH5α ,温度诱导表达OP- 1,SDS -PAGE对表达产物进行检测 ,凝胶薄层扫描判定蛋白表达量。结果 :pEH4/OP - 1重组表达载体转化DH5α,经温度诱导后 ,SDS -PAGE显示Mr约为 14× 10 3 的新蛋白条带。薄层扫描测定 ,表达蛋白占菌体总蛋白量的 33%。结论 :构建的hOP - 1/pEH4表达载体 ,在大肠杆菌DH5α中获得OP -
- 岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英
- 关键词：基因表达大肠杆菌蛋白
- hOP-1全长基因克隆及真核表达载体的构建
- 2004年
- 目的 证实人牙乳头细胞中OP 1的表达 ,获得hOP 1全长基因及其高效真核表达载体。方法 提取人牙乳头细胞总RNA ,反转录合成cDNA ,以特异性引物扩增hOP 1全长基因并克隆入T载体 ,筛选阳性克隆进行序列测定后。构建高效真核表达载体pCI OP 1并筛选鉴定。结果 PCR扩增得到一特异性的约 13 0 0bp的片段 ,序列测定结果表明与国外已发表的序列完全一致。构建的pCI OP 1质粒 ,用于基因转染纯度较好。结论 人牙乳头细胞中首次克隆到hOP 1全长基因 。
- 岳玲史俊南柴玉波孙叶方荫俊文玲英
- 关键词：全长基因克隆人牙乳头细胞真核表达载体
- 11种充填垫底材料抑菌性能比较被引量：7
- 1998年
- 目的：评价１１种牙科水门汀对牙髓卟啉菌、变形链球菌的抑菌作用。方法：细菌培养琼脂扩散法。结果：水门汀Ｃｅｒａｍｌｉｎ和ＣＯ－１对牙髓卟啉菌抑菌作用最强，其次是Ｄｙｃａｌ、Ｃａｌａｒ和Ｃａｒｂｃｈｅｍ；ＧＤ、ＶＬＣＣａｌａｒ、ＧＩ－１、ＺＯＥ和ＺＰＣ的作用较弱。在对变形链球菌作用中，Ｃａｌａｒ、ＣＯ－１最强，其次是ＺＯＥ、ＧＩ－１、ＺＰＣ、Ｄｙｃａｌ，其余的作用较弱。结论：１１种水门汀对牙髓卟啉菌、变形链球菌均有不同程度的抑菌作用。
- 赵信义杨聚才孙叶方
- 关键词：水门汀抗菌性变形链球菌
- 氢氧化钙对人牙髓细胞内游离钙的影响被引量：13
- 2001年
- 目的 检测Ca(OH) 2 对体外培养的人牙髓细胞内Ca2 +的影响。方法 在RPMI16 40培养液中加入Ca(OH) 2 、CaCl2 和NaHCO4 ,培养第 6代人牙髓细胞 ,用Fluo 3荧光探针负载后 ,再次用Ca(OH) 2 刺激 ,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2 +。结果 含Ca(OH) 2 培养液培养的牙髓细胞 ,再用Ca(OH) 2 刺激时胞内Ca2 +升高 ;其他条件培养的细胞 ,Ca(OH) 2 刺激时Ca2 +无变化。结论Ca(OH) 2 可导致人牙髓细胞内Ca2
- 吴海珍文玲英史俊南孙叶方杨晓峰王春梅
- 关键词：牙髓共焦显微镜检查氢氧化钙细胞内游离钙
- 牙髓紫卟啉菌内毒素对炎症性细胞因子的介导作用被引量：9
- 1999年
- 牙髓紫叶琳菌ＡＴＣＣ３５４０６是近年来新发现的重要致病性专性厌氧菌，采用改良酚－氯仿－石油醚法提取牙髓紫卟啉菌ＡＴＣＣ３５４０６内毒素脂多糖，通过Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法以及胸腺细胞增殖法测定脂多糖的细胞生物学活性。结果显示：纯化脂多糖可不同程度地诱导小鼠模型生成肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、集落刺激因子（ＣＳＦ）和白介素－１（ＩＬ－１），并在一定范围内呈剂量依赖型，提示牙髓紫卟啉菌内毒素在动物模型和细胞模型中具有显著的细胞生物学和免疫学活性．
- 荫俊王忠泽侯晓军陈跃峰张松乐张郁孙叶方
- 关键词：内毒素细胞因子
- 产黑普氏菌内毒素脂多糖的免疫生物学活性研究被引量：2
- 1999年
- 目的在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性。方法采用Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）、集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＣＳＦ）、白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１，ＩＬ－１）的诱导活性以及局部皮肤斯氏反应（ＳＰＤ５０）。结果产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素可显著地诱导ＴＮＦ、ＣＳＦ和ＩＬ－１的产生，在一定剂量范围内呈剂量依赖型。并可导致家兔典型的皮肤局部斯氏反应。
- 荫俊张松乐侯晓军陈跃峰陈跃峰张郁王忠泽
- 关键词：细胞因子内毒素类生物学活性
