姜孝玉
- 作品数：40 被引量：78H指数：6
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广东省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学天文地球更多>>
- 一种海葵神经毒素基因Sr6及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr6及其编码的蛋白，以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT－PCR的方法，从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr6，其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
- 文献传递
- 海洋生物药用功能基因研究进展
- 究开发新的海洋蛋白多肽类药物,开展了海洋生物药用功能基因的研究.共构建26个高质量的海洋生物组织cDNA文库,对来源于15种药用海洋生物共17个cDNA文库进行了大规模测序.利用生物信息学和快速功能基因筛选技术,初步确定...
- 陈尚武于文功徐安龙王磊杨文利姜孝玉董美玲钟肖芬彭立胜涂洪斌刘文华
- 关键词：海洋生物海洋药物功能基因药效学
- 血管生成抑制因子人内皮抑素基因的克隆与原核表达
- 2005年
- 目的:构建血管生成抑制因子人内皮抑素非融合蛋白大肠杆菌表达载体。方法:实验于2004-02/12在中山大学生命科学院医药分子生物学实验室完成,表达质粒由中山大学医药分子实验室保存,肝细胞来源于南方医科大学珠江医院引产胎儿肝脏。用反转录多聚合酶链反应得到人内皮抑素全基因,连接PGEM-T载体,在16℃下以进行16h连接反应,转化大肠杆菌DH5α,对所获克隆扩大培养,提取质粒经EcoRI,BamHI酶切鉴定。将带有插入片段的重组质粒命名为PGEM-Tendo。对其阳性克隆扩大培养,大量提取质粒,以T7,SP6为测序引物进行全自动正、反向测序确认。将PGEM-Tendo质粒及表达载体pBV220经EcoRI,BamHI酶切后定向连接,转化入大肠杆菌DH5α,聚合酶链反应鉴定阳性克隆,命名为pBV220-endo。将含pBV220-endo的DH5α工程菌在30℃小量培养,经42℃热诱导4h后收菌,对所收菌和诱导前细菌进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶。离心收集菌体并超声破碎,将超声后的上清液和沉淀进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果:反转录—聚合酶链反应获得内皮抑素基因含酶切位点约573bp,用EcoRI,BamHI双酶切,10g/L琼脂糖凝胶电泳上可见约为552bp的内皮抑素片段和约为3000bp的PGEM-T载体片段,说明内皮抑素已成功构建在PGEM-T载体上。经全自动正、反向测序,Genbank分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素功能区段基因,该基因的第471位氨基酸编码碱基由G突变为A,但编码的氨基酸都是精氨酸,经十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,出现特异性蛋白质条带,大小与人内皮抑素蛋白大小相符合。非融合重组蛋白内皮抑素主要以不溶的包涵体形式表达,表达量为14.5%。结论:克隆的552bp的内皮抑素基因,经与GenBank中人胶原XVIIIcDNA中内皮抑素基因比较,基因序列基本一致,说明人内皮抑素基因在大肠杆菌�
- 杨芳何援利姜孝玉郑丹
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 一种海葵神经毒素基因Sr6及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr6及其编码的蛋白，以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT-PCR的方法，从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr6，其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
- 文献传递
- 海葵溶细胞素的研究进展被引量：8
- 2005年
- 刘伟王娟姜孝玉杨文利徐安龙
- 关键词：海葵腔肠动物门肽类毒素化学刺激神经毒素去极化
- 一种海葵神经毒素基因Sr4及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr4及其编码的蛋白，以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT-PCR的方法，从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr4，其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
- 文献传递
- 一种海葵神经毒素基因Sr1及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr1及其编码的蛋白，以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT－PCR的方法，从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr1，其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
- 文献传递
- 重组海葵溶细胞素对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：2
- 2002年
- 目的观察重组海葵溶细胞素(Src)对离体大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VCMC),应用不同浓度的Src分别进行刺激VCMC并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果各组的细胞增殖率分别为对照组:0.802±0.055;Src100μg/ml组:0.115±0.014;Src10μg/ml组:0.213±0.016;Src1μg/ml组:0.335±0.097,Src100ng/ml组:0.663±0.060;Src10ng/ml组:0.678±0.129;Src1ng/ml组:0.738±0.072。统计分析显示100ng/ml以上浓度的Src能明显抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖(P<0.05),并呈现剂量依赖性(P<0.05)。结论重组海葵溶细胞素Src对大鼠血管平滑肌细胞增殖有一定的抑制作用。
- 欧阳平姜孝玉杨文利徐安龙
- 关键词：血管平滑肌细胞药物作用细胞增殖
- 一种海葵神经毒素基因Sr7及其应用
- 本发明涉及一种海葵神经毒素基因Sr7及其编码的蛋白，以及该蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本发明用RT－PCR的方法，从玫瑰红绿海葵触手总RNA中分离得到的海葵神经毒素基因Sr7，其DNA序列如序列表中<40...
- 徐安龙陈慧萍王磊董美玲杨文利姜孝玉涂洪斌
- 文献传递
- 金钱鱼毒腺cDNA表达文库的构建及EST序列分析被引量：12
- 2004年
- 以金钱鱼 (Scatophagusargus)毒腺为出发材料 ,构建以真核表达载体pcDNA3 0为基础的金钱鱼毒腺cDNA表达文库 .应用SMARTTM cDNALibraryConstruction技术和生物信息学分析等方法 ,通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得了 2 0 1个金钱鱼新表达序列标签 (ESTs) ,其中已确定全长cDNA的克隆有 2 7个 ,包括多个核糖体大小亚基蛋白 (ribosomalprotein)、细胞凋亡相关蛋白 (programmedcelldeath 10 ) ,G蛋白信号调控子 (Gproteinsignalingregulator)、胸腺素(thymosinbeta 4 )、延伸因子 (translationelongationfactor 1 alpha)和泛素 (ubiquitin)等 .金钱鱼毒腺cDNA表达文库的成功构建 ,为研究金钱鱼毒腺的活性组分及其作用机制奠定了基础 。
- 陈慧萍姜孝玉涂洪斌杜晶春卫剑文杨文利徐安龙
- 关键词：金钱鱼毒腺CDNA功能基因
