唐美琼
- 作品数:6 被引量:0H指数:0
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 一种组蛋白脱乙酰化酶基因HDA19的CRISPR_Cas9载体构建及其应用
- 本发明涉及红麻分子育种领域,特别是指一种组蛋白脱乙酰化酶基因HDA19的CRISPR_Cas9载体构建及其应用。所述载体为在载体pYLCRISPR‑Cas9Pubi‑H上插入红麻HDA19基因三个靶点的T1‑sgRNA表...
- 陈鹏韦范李增强谢红英史奇奇唐美琼
- 文献传递
- 费氏中华根瘤菌HN01中putA基因的研究
- 脯氨酸氧化成谷氨酸过程中需要两种酶的催化:脯氨酸脱氢酶(PDH)和5-二氢吡咯羧酸脱氢酶(P5CDH)。在根瘤菌中,.这两种酶是由putA基因编码的。本工作通过分子生物学的方法克隆到了快生型费氏中华根瘤菌HN01中的pu...
- 唐美琼
- 关键词:费氏中华根瘤菌启动子GUS活性
- 文献传递
- 费氏中华根瘤菌HN01的putA基因克隆
- 2010年
- 从快生型大豆根瘤菌费氏中华根瘤菌HN01的基因组文库中克隆到一个putA(脯氨酸脱氢酶)基因,该基因与已报道的苜蓿中华根瘤菌1021中putA基因在核苷酸和氨基酸水平上分别有82%和86%相似性.利用自杀性质粒pK18mob构建含有putA基因部分片段的重组质粒,通过三亲本结合导入出发菌株HN01中,获得正向插入的极性突变体GXHNPA和反向插入非极性突变体GXHNPB.将putA基因完整的ORF连接到广宿主载体pLAFRJ上,获得用于互补的质粒pGXHN37,通过三亲接合,将pLAFRJ导入GXHNPA和GXHNPB获得互补菌株GXHNPHA和GXHNPHB.对出发菌株、突变菌株、互补菌株进一步的研究发现,以脯氨酸为唯一C、N源的MM培养基中培养时,突变体均不能生长,互补菌株和野生型HN01没有差异,而在完全培养基YMB中培养时,突变菌株生长不受影响.植株实验发现,突变体均能有效结瘤,但是固氮酶活与出发菌株相比有所下降,结瘤时间延迟1d,竞争结瘤能力下降,而互补菌株与野生型HN01没有明显的差异.
- 唐美琼申佩弘许兢蒋承建陈钢武波
- 关键词:克隆突变体结瘤
- 费氏中华根瘤菌lrp基因的克隆、突变与功能
- 2008年
- 通过分子克隆技术,从费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01基因组文库中克隆到一个lrp基因.该基因与已报道的苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021的lrp基因在核苷酸水平上有89%相似性,在氨基酸水平上有99%相似性.利用自杀质粒pK18mob构建含有lrp基因部分片段的重组质粒,通过三亲本结合后导入原始菌株HN01中,经过同源单交换,获得发生正向插入突变的突变株GXHNLTA和反向插入突变的突变株GXHNLTB.将lrp基因ORF连接到载体pLAFR3上,获得用于互补的质粒pGXHNL100,将该质粒通过三亲本接合导入突变株中,获得互补株GXHNWA、GXHNWB.对野生型菌株、突变株、互补株进一步研究发现,在以脯氨酸、亮氨酸、丝氨酸等氨基酸为唯一碳、氮源的MM培养基中培养时,突变体GXHNLTA、GXHNLTB的生长均滞后于出发菌株HN01.植株试验表明,突变菌株GXHNLTA、GXHNLB比野生菌株HN01开始结瘤的时间提前1d,在结瘤效率、单株瘤数、瘤重、固氮酶活性方面并无显著差别.
- 陈钢唐美琼孙云许兢武波
- 关键词:SINORHIZOBIUMFREDIILRP基因突变
- 一种组蛋白脱乙酰化酶基因HDA19的CRISPR_Cas9载体构建及其应用
- 本发明涉及红麻分子育种领域,特别是指一种组蛋白脱乙酰化酶基因HDA19的CRISPR_Cas9载体构建及其应用。所述载体为在载体pYLCRISPR‑Cas9Pubi‑H上插入红麻HDA19基因三个靶点的T1‑sgRNA表...
- 陈鹏韦范李增强谢红英史奇奇唐美琼
- 文献传递
- 费氏中华根瘤菌HN01中putA基因的研究
- 本工作的主要目的是探索快生型大豆根瘤菌HN01(Sinorhizobium fredii HN01)中脯氨酸脱氢酶编码基因putA在竞争结瘤的分子机理,为进一步研究结瘤固氮机理打下基础。采用PCR扩增的方法,从本实验室已...
- 唐美琼许兢武波
- 文献传递