周静
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:广东医学院衰老研究所更多>>
- 发文基金:广东省高等学校自然科学研究重点项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- AHA1蛋白与A型核纤层蛋白在细胞中的共定位被引量:1
- 2013年
- 目的构建AHA1与荧光蛋白GFP融合的真核表达载体,并在HEK293细胞中进行表达,然后检测AHA1重组蛋白在细胞中的表达,以及与A型核纤层蛋白在细胞中的共定位。方法提取HEK293细胞中总RNA,随之逆转录成cDNA,然后设计引物扩增AHA1的编码序列后构建到pEGFP-N1载体中,转染HEK293细胞后,通过免疫印迹检测重组AHA1蛋白在细胞中的表达,采用激光共聚焦显微镜观察重组AHA1蛋白与A型核纤层蛋白在细胞中的共定位。结果经PCR和DNA限制性内切酶鉴定,最后通过DNA测序并进行序列相似性分析比对,确定pEGFP-N1-AHA1重组质粒构建成功;在HEK293细胞中转染pEGFP-N1-AHA1重组质粒后,检测发现,重组AHA1蛋白在细胞中已经成功表达,并且部分AHA1蛋白与核纤层蛋白A共定位于细胞的核膜上,但是AHA1蛋白与核纤层蛋白C在细胞中不能共定位。结论成功构建了AHA1与GFP荧光蛋白的重组质粒,并且AHA1蛋白与核纤层蛋白A在细胞中能够共定位,而不与核纤层蛋白C共定位。
- 蒋智文陈维春郑慧玲周静刘新光
- 关键词:免疫印迹
- 重组金属硫蛋白2A质粒的构建与表达被引量:2
- 2012年
- 目的构建重组金属硫蛋白2A(MT-2A)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究MT-2A奠定基础。方法从人骨骼肌细胞cDNA文库中PCR扩增MT-2A基因DNA序列,构建重组表达质粒MT2A-pET32a,PCR与DNA测序法鉴定插入序列;重组细菌用IPTG诱导表达,His-bind亲和层析柱纯化MT-2A蛋白,Western blotting鉴定蛋白特性。结果扩增获得的MT-2A基因片段长186bp,DNA测序证实MT2A-pET32a重组质粒构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约为29×103,Western blotting证实为目的蛋白。结论成功构建了重组原核表达质粒MT2A-pET32a,在大肠埃希菌内诱导表达并纯化获得MT-2A。
- 刘振杰赵树勇周静骆艳婷郑慧玲陈维春熊兴东徐宁刘新光
- 关键词:基因表达大肠埃希菌
- 组成型活化酶CK2的研究进展
- 细胞的整个生命过程几乎都受到丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸磷酸化的调控,这是一种最普遍的可逆性的蛋白活性调控机制.对于人类而言,基因组编码的大约600种蛋白激酶催化这些反应.从某种意义上讲,蛋白激酶扮演'解说员'的角色,它可以把...
- 刘新光阮杰周静赵树勇
- 关键词:酪蛋白激酶基因工程嗜酸性
- 文献传递
- A型核纤层蛋白的C端相互作用蛋白的筛选及鉴定
- 2013年
- 目的:筛选A型核纤层蛋白(laminA)相互作用蛋白,探讨laminA造成细胞早老的机理。方法:以laminA的C末端区域为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法从人骨骼肌cDNA文库中筛选laminA相互作用蛋白。并采用GST—Pulldown实验和western blotting进行鉴定。结果:筛选得到包括MT-2A在内的14个候选相互作用蛋白。MT-2A与laminA能相互作用。结论:MT-2A在细胞外与laminA相互作用。
- 刘振杰赵树勇周静郑慧玲陈维春熊兴东徐宁刘宝华周中军刘新光
- 关键词:酵母双杂交DOWN
- 蛋白激酶CK2与补体系统
- 2006年
- 蛋白激酶CK2是一种高度保守的、在真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶。它由两个催化亚基(α和/或α′)和两个调节亚基β组成,参与了一系列细胞生理功能的过程。CK2与补体系统中的某些成分C1r、C3、C9有着密切的关系,从而影响补体系统在杀灭、溶解细胞以及吸引吞噬细胞、调节吞噬作用等方面的生理功能。该文就近年来有关CK2对补体系统成分进行磷酸化的作用及其对补体生理功能方面影响的研究作一综述。
- 周静刘新光梁念慈
- 关键词:补体蛋白激酶类磷酸化