周青松
- 作品数：5 被引量：9H指数：1
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖皮质激素受体M565R、C638S、L753F、A573Q、GR2439insA定点诱变体的构建及鉴定
- 2015年
- 目的：在PRShGRα质粒的基础上构建人糖皮质激素受体的M565R、C638S、L753F、A573Q、GR2439insA诱变表达受体，为研究糖皮质激素抵抗的分子机制打下基础。方法采用Stratagene公司生产的QuickChange定点诱变试剂盒对PRShGRα质粒进行诱变，并对诱变体的编码区全长进行测序。结果测序结果表明M565R、C638S、L753F、A573Q、GR2439insA定点诱变体均诱变成功，且没有碱基的错配、插入、缺失情况。结论成功构建M565R、C638S、L753F、A573Q、GR2439insA定点诱变体，为进一步研究受体功能变化奠定实验基础。
- 崔颖鹏陈培松欧阳涓黄彬周青松路强姜傥
- 关键词：质粒
- 血管紧张素Ⅱ与其介导的蛋白质酪氨酸激酶JAK2信号通路在缺血再灌注肾损伤时小管上皮细胞逆向分化中的作用
- 2009年
- 目的探讨血管紧张素（Ang）Ⅱ与其介导的蛋白酪氨酸激酶JAK2信号通路在急性缺血再灌注肾损伤模型中发生的肾小管上皮细胞逆向分化的作用机制。方法（1）建立Wistar大鼠急性缺血再灌注肾损伤模型，采用放射免疫法检测肾脏局部AngⅡ的水平变化，采用免疫组织化学ABC法和RT—PCR，观察间充质细胞表面标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。（2）模拟高、中、低浓度的肾素-血管紧张素系统（RAS）环境，体外观察培养的肾小管上皮细胞（NRK-52E）逆向分化的情况。（3）先后阻断AngⅡ受体（AT2R）及其介导的AngⅡ信号转导通路的JAK2，研究AngⅡ与JAK2通路对肾小管上皮细胞逆向分化的影响。结果（1）肾脏缺血再灌注损伤后0、24、48、72、96、120h，局部AngⅡ含量持续增高，分别为（406．7±106．1）、（463．0±112．9）、（526．6±128．3）、（649．5±131．5）、（875．g±150．2）、（980．8±155．2）ng／L，P〈0．05。（2）缺血再灌注后48h，肾小管上皮细胞开始表达α-SMA mRNA及蛋白质。（3）高浓度（10^-7mol／L）AngⅡ刺激可诱导体外培养的肾小管上皮细胞表达α—SMA，且呈剂量和时间依赖性。10^-9mol／L浓度AngⅡ刺激30min时，α-SMA表达水平最高。无论是阻断AT2R抑或JAK2信号通路，肾小管上皮细胞表达α-SMA均明显受到抑制。结论急性缺血再灌注损伤时肾小管上皮细胞可向间充质细胞逆向分化，局部RAS启动与其密切相关。AngⅡ可能通过AT2R及其介导的JAK2信号通路促发肾小管细胞的逆向分化。
- 姜傥周青松皮蕾黄彬
- 关键词：肾小管肾素-血管紧张素系统蛋白酪氨酸激酶类
- pax2基因在肾小管上皮细胞转分化中的作用被引量：8
- 2007年
- 目的探讨pax2基因在大鼠慢性肾小管间质纤维化过程中的表达及其对肾小管上皮细胞转分化的可能作用。方法大鼠5/6肾切除造模,分别于术后2、4、6、8、10、12周取左肾皮质,采用逆转录(RT)-PCR及免疫组织化学的方法检测模型组和正常对照组的pax2和-αSMA的表达。结果病变组织见系膜细胞和基质增生,间质炎症细胞浸润,基底膜变厚。5/6肾切除模型组大鼠在术后第2周出现pax2mRNA的强表达,第4周达高峰,与正常对照组比较P<0.05,此后下降至痕量表达;α-SMA mRNA也在术后第2周表达逐渐增强,第8周达高峰,与正常对照组比较P<0.05,此后逐渐下降。免疫组织化学染色显示,5/6肾切除模型组pax2蛋白的表达、肾小管上皮细胞中α-SMA的表达与pax2mRNA、α-SMA mRNA的表达趋势相同。结论在大鼠慢性肾间质纤维化的过程中,受损的肾小管上皮细胞可向肌成纤维细胞转分化,肾小管发育胚胎基因pax2在此过程中的一过性表达可能起到重要的作用。
- 皮蕾姜傥欧阳涓周青松崔颖鹏黄彬
- 关键词：肾小管间质纤维化转分化
- 胚胎分化/发育基因pax2与WT1的序列启动在肾小管上皮细胞逆向分化中的意义被引量：1
- 2009年
- 目的:通过观察肾小管上皮细胞(TEC)胚胎分化/发育关键基因Wilm s肿瘤基因(WT1)和pax2的序列启动,探讨TEC逆向分化的分子机制及病理生理学意义。方法:从胚胎肾、肾脏损伤模型及体外细胞培养3方面入手,通过RT-PCR、免疫组织化学等技术,研究TEC逆向分化时,胚胎期控制TEC分化/发育的关键基因pax2和WT1的表达、pax2和WT1之间的关系以及它们与TEC逆向分化间的关系。结果:(1)胚胎期:pax2和WT1mRNA先后在胚胎11.5 d及14 d时开始出现表达并逐渐增强,出生14 d后仅有痕量表达。免疫组化显示,成年大鼠中仅肾小球足突细胞表达WT1,TEC中pax2和WT1表达阴性。(2)5/6慢性肾损伤模型:损伤第2周,部分TEC重新出现pax2和WT1的表达,第4周达高峰,两者表达趋势相吻合。pax2在第10周尚有一个新的表达高峰,随后逐渐下降至痕量。(3)TEC体外培养:经炎性因子IL-1α(10μg/L)、AngII(10-9mol/L)掺入培养后,TEC分别在0.5、24 h内重新表达pax2和WT1,随后α-SMA出现高表达,细胞呈现间充质样细胞特征。以WT1中和抗体、An-gII受体阻断剂封闭WT1和pax2基因的作用后,α-SMA表达水平明显降低,细胞基本保持原有特征不变。结论:控制胚胎肾分化/发育的关键基因pax2和WT1在成年肾遭受损伤时,可获得重新表达,呈现序列启动现象,TEC同时出现胚胎间充质细胞特征;pax2和WT1的重新表达与细胞浸浴环境(高浓度细胞因子)密切相关,可能作为内在启动机制参与TEC的逆向分化。
- 姜傥皮蕾袁飞周青松黄彬
- 关键词：肾小管上皮细胞基因PAX2基因WT1
- 糖皮质激素受体α亚型M565R、C638S、L753F、A573Q、GR2439VA定点诱变体的构建
- 糖皮质激素是下丘脑-垂体-肾上腺分泌的一种重要激素,它是一种强有力的物质代谢及炎症反应调节剂.糖皮质激素被广泛用于自身免疫疾病的治疗,但是有部分患者对糖皮质激素的反应性降低或无反应,即糖皮质激素抵抗.本研究在PRShGR...
- 崔颖鹏姜傥欧阳涓黄彬周青松路强
- 关键词：糖皮质激素自身免疫性疾病激素治疗定点诱变
- 文献传递
